• 제목/요약/키워드: plasma dilution

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범가자미, Verasper variegatus 수컷에서 $estradiol-17\beta$에 의해 유도된 vitellogenin의 면역학적 특성 (Immunological Characteristics of the Vitellogenin Induced by $Estradiol-17\beta$ in Male Spotted Flounder, Verasper variegatus)

  • 김윤;김우진;백혜자;김경길;방인철;한창희
    • 한국수산과학회지
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    • 제30권3호
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    • pp.480-487
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    • 1997
  • 범가자미, Verasper variegatus의 vitellogenin (Vg)을 분리하기 위하여 수컷에 $etradiol-17\beta(E_2) $를 처리하여 Vg의 합성을 유도하여 SDS-PAGE와 western blot으로 확인 하였다. 분리된 Vg의 분자량은 175 kD 이었으며 암컷 특이단백질이었다. $E_2$ 처리한 수컷 혈청을 찬 증류수로 침전시킨후 Sepharose CL-6B column chromatography에 의해 Vg을 분리하였다. 분리한 Vg에 대한 항혈청을 만들어 특이성을 western blot으로 확인하였고, 또한 Vg를 대한 단클론항체를 만들기 위하여 분리한 Vg을 Balb/c에 면역시켜 비장세포와 NS1 myeloma 세포를 세포융합하여 hybridoma를 만들었다. 세포융합된 18개 clone중 효소면역측정법에 의해 Vg과 가장 반응성이 높은 clone을 4D6으로 명명하였고, 이에 대한 특이성을 $E_2$가 처리되지 않은 수컷 혈청, $E_2$가 처리된 수컷혈청과 분리한 Vg를 사용하여 western blot으로 확인하였다.

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저희석 유리구 용해법에 의한 암석시료 미량원소 분석법 (Low Dilution Glass Bead Digestion Technique for the Trace Element Analysis of Rock Samples)

  • 박찬수;신형선;오혜영;문종화;정창식
    • 암석학회지
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    • 제20권3호
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    • pp.161-172
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    • 2011
  • 유도결합 플라즈마 질량분석법에 의한 암석 시료의 미량원소 정량분석을 위한 전처리 과정으로 통상 산분해법인 비이커-가열판 용해법이 사용된다. Zr과 Hf은 다른 비유동성 원소들과 함께 지구조 해석에 이용되는 중요한 원소이지만 암석 내에 이들을 농집시키는 불용성 광물이 있으면 비이커-가열판 용해법으로 완전히 용해되지 않는다. 이러한 불용성 광물을 용해시키기 위해 고압 테프론 용기법이나 알칼리 용융법을 이용하는데 전처리시간이 너무 오래 걸리거나 농도가 낮은 희토류원소 등의 분석 정확도가 감소하는 문제점이 있다. 이 연구에서는 자동 용융 기기를 사용하여 미국지질조사소의 암석 표준시료 3종(AGV-2, BHVO-2, G-3)을 저희석 유리구로 제작하고 이 유리구를 분말로 만들어 산분해를 거쳐 용해시킨 방법(유리구 용해법)으로 전처리한 후, 유도결합 플라즈마 질량분석기와 유도결합 플라즈마 원자방출분광기를 이용하여 희토류 원소를 포함한 30종의 미량원소 분석을 실시하였으며 시료에 대한 최종적인 희석비율은 1:2,000 이하로 유지하였다. 이 유리구 용해법에 의한 분석결과를 암석 분말시료를 이용한 비이커-가열판 용해법과 비교해 보았다. 대체적으로 Cr, Co, Ni, Cu, Zn, Pb 등의 원소분석 결과는 두 방법 모두 3종의 표준물질에서 추천치와 잘 부합되었으며 유리구 용해법을 이용한 분석에서 Pb, Zn 등 휘발성 원소의 손실은 나타나지 않았다. 저어콘을 많이 함유한 화강암 표준시료(G-3)의 Y, Zr, Hf과 중희토류원소에 대해서는 비이커-가열판 용해법의 경우 추천치에 비해 체계적으로 낮은 값을 보인 반면 유리구 용해법은 추천값에 잘 부합되는 결과를 얻었다. 이 연구의 유리구 용해법을 이용하면 불용성 원소를 포함한 미량원소 분석의 정확도가 크게 향상될 것으로 기대된다.

한우 체지방 감소 쇠고기 생산을 위한 복강 및 피하지방 항체 개발 (Development of Polyclonal Antibodies to Abdominal and Subcutaneous Adipocytes for Fat-Reduced Hanwoo Beef Production)

  • 최창원;김유현;김성진;송만강;권응기;오영균;홍성구;최성호;백경훈
    • 한국축산식품학회지
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    • 제28권5호
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    • pp.651-659
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    • 2008
  • 본 연구는 국내 고유종인 한우의 부위별 불가식 체지방 감소를 위한 특이 다클론 항체의 개발 및 타장기 안전성을 확인하고자 실시되었다. Collagenase digestion 방법으로 한우의 복강 및 피하지방세포 원형질막 단백질을 분리하여 면양에 3회에 걸쳐 수동면역 주사하고, 면역 주사 전 및 후에 비면역혈청과 항혈청(항체)을 생산하였다. 생산된 한우 부위별 지방 항체의 역가와 한우의 주요 장기 조직인 심장, 신장, 간장, 폐, 근육 및 비장세포의 원형질막 단백질에 대한 타장기 교차반응성과 한우의 부위별 지방 조직에서 지방세포를 분리하고 각각 배양시킨 후 개발된 한우 지방 항체를 직접 주입한 뒤 LDH 수준을 조사하였다. 복강 및 피하지방세포 원형질막 단백질들은 서로 유사하면서도 특이적인 단백질을 가지고 있는 것으로 SDS-PAGE 분석을 통해 확인할 수 있었다. 희석배율 1:1,000배를 기준으로 비 면역혈청은 항원-항체 결합 반응이 거의 측정되지 않았으나, 복강 및 피하지방 항체는 희석배율 1:128,000배 및 1:64,000배까지 각각 항원-항체 반응이 감지되었으며, 이는 본 연구에서 생산한 부위별 지방 특이 다클론 항체가 지방세포 원형질막 단백질에 대해 매우 강한 역가를 가진 항체임을 시사한다. 또한 복강 및 피하지방 항체는 타 장기들과는 특이한 반응을 나타내지 않았다. 본 연구에서 개발한 두 항체들은 모두 항원으로 이용된 부위의 지방세포 원형질막 단백질과 가장 높은 반응을 나타내었으며, 복강 및 피하지방특이항체는 비 면역혈청에 비해 유의적으로 높은 세포독성 효과가 있음을 확인할 수 있었다. 이상의 결과를 종합할 때 본 연구에서 개발된 복강 및 피하 지방 감소 다클론 항체는 높은 역가, 타 장기 안전성 및 세포 파괴 효과가 있었으며 생체 타장기 안전성 등 향 후 기존의 전체 지방에서 생산한 항체의 단점을 보완할 수 있는 연구가 지속될 경우 불가식 체지방이 감소된 저지방 한우 고급육 생산이 가능하리라고 사료된다.

개 희석 정액의 다양한 filtration 처리 후 정자평가 (Evaluation of Extended Canine Semen after Different Filtration Treatment)

  • 김용준;김진영;김수희;이영준
    • 한국임상수의학회지
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    • 제24권4호
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    • pp.577-583
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    • 2007
  • It is important to obtain semen with good quality for efficient fertilization and pregnancy. To obtain these semen, various methods have been developed but most of these methods are time consuming and require costly equipment. Therefore, the objective of this research is to investigate the usability of column filtration system as quick and simple method to get sperm with better quality. Ejaculates were obtained from 5 dogs and analyzed with basic quality parameters before each filtration. Sperm concentration was adjusted to $5{\times}10^7/ml$ after dilution. The experimental groups were divided into non-filtered group(control) and filtered groups(glass wool, Sephadex 5% and Sephadex 20%). Ejaculates were filtered through each filter system and assessed by recovery rate of sperm, motility, normal morphology, CFDA/PI stain and plasma membrane integrity(hypo-osmotic swelling test, HOST). The lowest recovery rate of spermatozoa was recorded in glass wool filtration group, followed by 20% Sephadex filtration group(p<0.05). There was no significant difference between control(non-filtered) and 5% Sephadex filtration poop. Also, there was no significant difference of sperm motility assessed under light microscope among experimental groups. Morphological normality of canine spermatozoa was the highest in the glass wool filtration group and the lowest in the 5% Sephadex filtration group with no significant differences versus 20% Sephadex filtration and control group, respectively(p<0.05). Viability of canine sperm assessed by CFCA/PI staining was the highest in the glass wool filtration poop with no significant difference versus the control group, and the lowest in the 20% Sephadex filtration group with no significant difference versus 5% Sephadex filtration group, respectively(p<0.05). HOS values of canine sperm was the highest in the 20% Sephadex filtration group with no significant difference versus 5% Sephadex filtration group, and the lowest in the control poop with no significant difference versus glass wool filtration group, respectively(p<0.05). Therefore, these results indicated that filtration treatment for extended canine sperm would be useful method to get sperm with better quality by trapping the damaged sperm, consequently filter would be physical barrier against injured or immotile sperm.

Effect of Supplemental Corn Dried Distillers Grains with Solubles Fed to Beef Steers Grazing Native Rangeland during the Forage Dormant Season

  • Murillo, M.;Herrera, E.;Ruiz, O.;Reyes, O.;Carrete, F.O.;Gutierrez, H.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제29권5호
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    • pp.666-673
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    • 2016
  • Two experiments were conducted to evaluate the effects of the level of corn dry distillers grains with solubles (CDDGS) supplementation on growing performance, blood metabolites, digestion characteristics and ruminal fermentation patterns in steers grazing dormant forage. In Exp. 1, of growth performance, 120 steers ($204{\pm}5kg$ initial body weight [BW]) were distributed randomly into 3 groups (each of 40 steers), which were provided with the following levels of CDDGS supplement: 0%, 0.25%, or 0.50% BW. All groups of steers were grazed for 30 days in each of 3 grazing periods (March, April, and May). Approximately 1,000 ha of the land was divided with electric fencing into 3 equally sized pastures (333 ha in size). Blood samples were collected monthly from 20 steers in each grazing group for analysis of glucose (G), urea-nitrogen (UN) and non-esterified fatty acids. Final BW, average daily gain (ADG) and supplement conversion (CDDGS-C) increased with increasing levels of CDDGS supplementation (p<0.05).The CDDGS supplementation also increased the plasma G and UN concentrations (p<0.05). In Exp. 2, of digestive metabolism, 9 ruminally cannulated steers ($BW=350{\pm}3kg$) were distributed, following a completely randomized design, into groups of three in each pasture. The ruminally cannulated steers were provided the same levels of CDDGS supplementation as in the growing performance study (0%, 0.25%, and 0.50% BW), and they grazed along with the other 40 steers throughout the grazing periods. The dry matter intake, crude protein intake, neutral detergent fiber intake (NDFI), apparent digestibility of dry matter (ADDM), crude protein (ADCP) and neutral detergent fiber (ADNDF) increased with increasing levels of CDDGS supplementation (p<0.05). The ruminal degradation rates of CP (kdCP), NDF (kdNDF) and passage rate (kp) also increased with increasing levels of CDDGS supplementation (p<0.05). Ruminal ammonia nitrogen ($NH_3$-N) and propionate concentrations also increased with increasing levels of CDDGS supplementation (p<0.05). However, acetate concentrations decreased with increasing levels of CDDGS supplementation (p<0.05). Liquid dilution rate increased with increasing levels of CDDGS supplementation but ruminal liquid volume decreased (p<0.05). On the basis of these findings, we can conclude that CDDGS supplementation enhanced the productive performance of cattle grazing native rangeland without negatively affecting forage intake, glucose and urea-nitrogen blood concentrations, ruminal degradation and ruminal fermentation patterns.

산란계에 편백나무 정유 살포가 닭진드기에 미치는 영향 (Effect of Spraying Chamaecyparis obtusa Essential Oil on the Elimination of Red Mite (Dermanyssus gallinae) in Laying Hens)

  • 임천익;박승규;최호성;류경선
    • 한국가금학회지
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    • 제45권3호
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    • pp.193-200
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    • 2018
  • 본 연구는 편백나무 정유를 70% 함유한 FC-S 살포액을 배율별로 희석하여 살포시에 닭진드기 제거와 안전성에 미치는 영향을 구명하고자 실행하였다. 닭진드기에 감염된 산란계 300수를 5개 처리구와 5반복 반복당 12수씩 18일간 배치하였다. 각 처리구의 살포액은 FC-S를 0배(원액, FC-S 0), 50배(FC-S 50) 및 100배(FC-S 100)로 희석한 시료와 증류수(NC) 및 시중에서 판매되는 천연살충제(PC)를 이용하였다. 닭진드기 숫자, 산란율, 난중은 매일 확인하였고, 계란품질과 혈액성상은 사양실험 종료 후 측정하였다. 안전성 검사를 위하여 산란계의 사료섭취, 호흡기증상, 침울, 설사 및 폐사 증상을 확인하였다. 본 연구결과, FC-S 0을 살포시에 80% 이상의 닭진드기가 제거되었으며(P<0.01), FC-S 50 처리구도 PC 처리구보다 개선되었다. FC-S 100 처리구는 PC 처리구보다 진드기 제거에 미치는 영향이 적었지만, NC 처리구에 비하여 닭진드기 제거는 매우 개선되었다(P<0.01). FC-S를 살포한 후 산란계의 생산성, 계란품질, 혈액성상 및 안전성에 미치는 영향은 처리구간에 유사하였으며, 통계적 차이가 없었다. 본 연구결과, FC-S의 살포는 산란계에 미치는 영향은 없었으므로, 닭진드기에만 선택적으로 작용하였다고 사료되며, FC-S 0~50배 희석배율의 살포는 상용화되어 판매되는 살포액보다 효과적으로 닭진드기를 제거하였다.

방사면역측정을 위한 항 Gastrin 혈청의 생산 및 평가 (Production and Evaluation of Anti-Gastrin Serum for Radioimmunoassay)

  • 박형진;권혁일;이윤렬;신원임;서상원;오양석
    • The Korean Journal of Physiology
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    • 제23권1호
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    • pp.89-98
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    • 1989
  • New Zealand white 계의 토끼에게 EDC를 사용하여 hemocyanin에 접합시킨 human G-17-I을 면역한 결과 gastrin의 방사면역측정에 적합한 항 gastrin 혈청을 얻는데 성공하였다. 본 실험에서 얻은 항 gastrin 혈청의 역가는 1:25,000이며 human G-17-I과 human big gastrin에 매우 친화력이 높은 반면 다른 위장관 peptide 들과는 교차반응성이 아주 낮았다. 본 항 gastrin 혈청의 effective affinity constant는 $1.77{\times}10^{11}/M$이었다. 또한 총 결합부위(total binding sites)는 255 nM, 이질성지수(heterogeneity index)는 0.84 그리고 average affinity constant는 $0.79{\times}10^{11}/M$이었다. 본 실험에서 얻은 항 gastrin 혈청을 사용하여 사람과 흰쥐의 혈장 gastrin 농도를 방사면역측정법으로 측정한 결과 이미 잘 알려진 결과와 동일한 성적을 얻을 수 있었다. 이러한 결과들을 종합하여 볼때 본 실험에서 얻은 항 gastrin 혈청은 생리적농도로 존재하는 gastrin의 방사면역측정에 적합한 것으로 생각된다.

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고혈압(高血壓)에 있어서 Renin-Angiotensin계(系) 및 총교환(總交換) 나트륨에 관(關)한 연구(硏究) (A Study on Renin-Angiotensin System and Total Exchangeable Sodium in Hypertension)

  • 최강원;박정식;이정상;고창순
    • 대한핵의학회지
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    • 제10권1호
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    • pp.1-14
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    • 1976
  • The etiologic role of renin-angiotensin system and sodium-volume status in the pathophysiology of various forms of hypertension was investigated. Plasma renin activity (PRA) was measured by radioimmunoassay, while sodium-volume status was evaluated by the determination of total exchangeable sodium(NaE) using isotope dilution method. The subjects consisted of 25 controls, 24 patients with essential hypertension, with chronic renal failure (13 with hypertension, 9 without hypertension) and with malignant hypertension. The results were as follows: 1. An inverse correlation between NaE and PRA was noted in control subjects (r=-0.598, p<0.001) and normal renin essential hypertension(r=-0.551, p<0.05) and the chronic renal failure with hypertension. (r=-0.790, p<0.001) 2. NaE increased markedly the in chronic renal failure with hypertension ($66.9{\pm}8.69mEq/kg$ of LBM, p<0.001) and the chronic renal failure without hypertension ($54.9{\pm}9.28mEq/kg$ of LBM, p<0.05), while mild increase was noted in malignant hypertension ($51.7{\pm}6.24mEq/kg$ of LBM, 0.05$50.1{\pm}7.24mEq$) as well as in its renin subgroups.(p>0.1) 3. Absolute value of PRA was not deviated significantly from control group ($2.53{\pm}1.416ng/ml/hr$) except in malignant hypertension ($6.09{\pm}2.042$, p<0.001). But PRA was inappropriately high in relation to prevailing NaE in the chronic renal failure with hypertension (eleven of thirteen patients) and malignant hypertension (ten of fourteen patients), while PRA variatiation was within physiologic range in the chronic renal failure without hypertension. 4. The NaE-PRA product was markedly increased in the chronic renal failure with hypertension ($514.4{\pm}42.10$, p<0.001) and in malignant hypertension ($442.7{\pm}55.03$, p<0.001), while moderately increased NaE-PRA product was noted in the chronic renal failure without hypertension ($402.6{\pm}59.67$, p<0.001). No significant difference in NaE-PRA product was noted in essential hypertension ($354.4{\pm}62.38$, p>0.1). It is suggested that renin-angiotensin system plays a predominant role in the pathogenesis of malignant hypertension and in hypertension of chronic renal failure, though sodium retention is also contributing factor. PRA variation in essential hypertension does not appear to be associated with any consistent change in Na-volume status, suggesting the existence of another mechanism in the genesis of hypertension and PRA variation.

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Rapid Screening of Naturally Occurring Radioactive Nuclides (238U, 232Th) in Raw Materials and By-Products Samples Using XRF

  • Park, Ji-Young;Lim, Jong-Myoung;Ji, Young-Yong;Lim, Chung-Sup;Jang, Byung-Uck;Chung, Kun Ho;Lee, Wanno;Kang, Mun-Ja
    • Journal of Radiation Protection and Research
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    • 제41권4호
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    • pp.359-367
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    • 2016
  • Background: As new legislation has come into force implementing radiation safety management for the use of naturally occurring radioactive materials (NORM), it is necessary to establish a rapid and accurate measurement technique. Measurement of $^{238}U$ and $^{232}Th$ using conventional methods encounter the most significant difficulties for pretreatment (e.g., purification, speciation, and dilution/enrichment) or require time-consuming processes. Therefore, in this study, the applicability of ED-XRF as a non-destructive and rapid screening method was validated for raw materials and by-product samples. Materials and Methods: A series of experiments was conducted to test the applicability for rapid screening of XRF measurement to determine activity of $^{238}U$ and $^{232}Th$ based on certified reference materials (e.g., soil, rock, phosphorus rock, bauxite, zircon, and coal ash) and NORM samples commercially used in Korea. Statistical methods were used to compare the analytical results of ED-XRF to those of certified values of certified reference materials (CRM) and inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS). Results and Discussion: Results of the XRF measurement for $^{238}U$ and $^{232}Th$ showed under 20% relative error and standard deviation. The results of the U-test were statistically significant except for the case of U in coal fly ash samples. In addition, analytical results of $^{238}U$ and $^{232}Th$ in the raw material and by-product samples using XRF and the analytical results of those using ICP-MS ($R^2{\geq}0.95$) were consistent with each other. Thus, the analytical results rapidly derived using ED-XRF were fairly reliable. Conclusion: Based on the validation results, it can be concluded that the ED-XRF analysis may be applied to rapid screening of radioactivities ($^{238}U$ and $^{232}Th$) in NORM samples.

개체병렬결합(parabiosis)실험모델과 혈액교환을 이용한 노화(aging)연구 분석 (Parabiosis and Blood Exchange Techniques in Aging Research)

  • 정경태
    • 생명과학회지
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    • 제33권2호
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    • pp.208-215
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    • 2023
  • 최근 수십년간 노화연구의 영역은 유전자 수준에서부터 세포 수준을 거쳐 혈액을 교환하는 in vivo 모델까지 진보를 거듭하면서 발전하고 있다. 예쁜꼬마선충에서 수명을 연장시킬 수 있는 유전자의 존재가 알려지면서, 유전체학, 단백질체학, 대사체학, 전사체학과 같은 다양한 분석방법이 사용되면서 보다 다양한 노화 연관 표적분자들이 발견되었다. 따라서, 표적분자들 간의 상호관계에 대한 연구결과도 증가하고 있다. 또한, 두 실험동물을 외과적으로 결합시킨 개체병렬결합 방법을 사용한 노화연구로 노화 현상을 역행시킬 수도 있는 인자가 보고되었고, 젊은 개체의 혈액 내에 존재할 수 있는 노화 역행 인자를 찾기 위한 더 정확하고, 효과적인 연구로 확장되면서, 노화연구의 방법에 새로운 패러다임이 확립되었다. 2022년 실험동물에 정교하게 혈액을 교환할 수 있는 장치에 대한 논문이 발표되었고, 이 장치를 사용한 연구가 노화 역행에 영향을 줄 수 있는 새로운 결과를 제시하였다. 새롭게 고안된 장치와 그로 인한 결과뿐만 아니라 젊은 혈액 또는 조건화된 혈액을 주입하여 얻은 최신 연구결과로 처음 발표되었던 GDF11 외에도 혈액 내에 존재하는 노화 역행 후보물질로서 β2m, TIMP2, VCAM1, Gpld1, clusterin과 같은 혈액 내 용해성 인자뿐만 아니라 mcicroglia 세포와 neuroinflammation과 같은 생화학적 현상이 직접적으로 노화요인으로 증명되고 있다. 이 총설에서는 이 같은 노화연구에 대한 최신 결과에 대해 논의하고자 한다.