한국작물학회 2017년도 9th Asian Crop Science Association conference
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pp.14-14
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2017
The discipline of plant breeding is experiencing a renaissance impacting crop improvement as a result of new technologies, however fundamental questions remain for predicting the phenotype and how the environment and genetics shape it. Inexpensive DNA sequencing, genotyping, new statistical methods, high throughput phenotyping and gene-editing are revolutionizing breeding methods and strategies for improving both quantitative and qualitative traits. Genomic selection (GS) models use genome-wide markers to predict performance for both phenotyped and non-phenotyped individuals. Aerial and ground imaging systems generate data on correlated traits such as canopy temperature and normalized difference vegetative index that can be combined with genotypes in multivariate models to further increase prediction accuracy and reduce the cost of advanced trials with limited replication in time and space. Design of a GS training population is crucial to the accuracy of prediction models and can be affected by many factors including population structure and composition. Prediction models can incorporate performance over multiple environments and assess GxE effects to identify a highly predictive subset of environments. We have developed a methodology for analyzing unbalanced datasets using genome-wide marker effects to group environments and identify outlier environments. Environmental covariates can be identified using a crop model and used in a GS model to predict GxE in unobserved environments and to predict performance in climate change scenarios. These new tools and knowledge challenge the plant breeder to ask the right questions and choose the tools that are appropriate for their crop and target traits. Contemporary plant breeding requires teams of people with expertise in genetics, phenotyping and statistics to improve efficiency and increase prediction accuracy in terms of genotypes, experimental design and environment sampling.
An efficient molecular breeding technique for coffee plants was developed. In order to produce transgenic coffee plants, we established a model transformation procedure via Agrobacterium method. We isolated a gene encoding a protein possessing 7-methylxanthine methyltransferase (theobromine synthase) activity, and it was designated as Coffea arabica 7-methylxanthine methyl transferase; CaMXMT. Using this clone, we produced transgenic coffee plants, in which the expression of CaMXMT is suppressed by double-stranded RNA interference (RNAi) andlor anti-sense methods. The expression pattern of CaMXMT was analyzed by reverse transcription-PCR method and we found that, in the transformed cell lines, the level of transcripts were obviously suppressed by RNAi. The endogenous level of caffeine in the transformed cells was dramatically reduced in comparison with non-transformed cells.
The traditional plant imprownent methods consisted of pure line selection, cross breeding, heterosis breeding, polyploid breeding, mutati-onbreeding, ect.Biotechmoiogy is divided into gene spliclng , monocle-nal antibodies , protein engineering , agricultural research, and microbiological engineering. Of these , high plants deal with agricultural research, and the importent part of which is tissue culture and celLculture , Tissue .culture and cell culture are again divided into embryoculture, test tube fertilization, anther and pollen culture, somatichybridization , transformation, recombination, recombinant DNA moleculehybrid plasmid, ect For these haploid production, protoplast culture,protoplast fusion, selection and propagation, ect. , the technical sett-lement is needed.
Since whole-genome duplication (WGD) of diploid Chrysanthemum nankingense and de novo assembly whole-genome of C. seticuspe have been obtained, they have afforded to perceive the diversity evolution and gene discovery in the improved investigation of chrysanthemum breeding. The robust tools of high-throughput identification and analysis of gene function and expression produce their vast importance in chrysanthemum genomics. However, the gigantic genome size and heterozygosity are also mentioned as the major obstacles preventing the chrysanthemum breeding practices and functional genomics analysis. Nonetheless, some of technological contemporaries provide scientific efficient and promising solutions to diminish the drawbacks and investigate the high proficient methods for generous phenotyping data obtaining and system progress in future perspectives. This review provides valuable strategies for a broad overview about the high-throughput identification, and molecular analysis of gene function and expression in chrysanthemum. We also contribute the efficient proposition about specific protocols for considering chrysanthemum genes. In further perspective, the proper high-throughput identification will continue to advance rapidly and advertise the next generation in chrysanthemum breeding.
캡사이신은 고추의 매운맛을 결정하는 화합물이며 HPLC등과 같은 액상 크로마토그래피를 통한 정량법이 가장 많이 이용되고 있다. HPLC 방법은 정확하게 캡사이신 함량을 측정할 수 있으나 전처리 시간이 길고 고가의 장비를 필요로 하는 단점이 있다. Gibb's reagent로 불리는 2,6-dichloroquinone chlorimide는 캡사이신의 벤젠 구조와 반응하여 발색을 하며 이 반응을 이용해 상대적인 캡사이신의 양을 측정할 수 있다. 본 연구는 Gibb's reagent를 통한 발색반응은 캡사이신의 양에 비례하여 증가하며, 고추 태좌를 이용하였을 때에도 동일한 결과를 확인할 수 있었다. 또한, 이러한 방법을 대량 신속 캡사이신의 함량 측정을 위하여 고추의 과실을 절단하여 발색반응을 시키거나 Gibbs reagent를 미리 도포시켜 놓은 조건에서도 동일하게 신뢰할만한 결과를 확인하였다. 육종 목표에 따라 Gibb's reagent를 통한 개체 선별을 쉽게 하여 실제 육종 포장에서 간이적인 방법으로 매운 맛에 대해서 정성적 분석과 대략적인 정량적 분석이 가능하게되었다. 이러한 방법은 기존의 액상 크로마토그래피 등의 방법에 비해 시간과 비용이 절약되며 정확성에서도 큰 차이를 보이지 않아 고추 육종 포장에서의 활용을 기대할 수 있다.
The tissue blot immunobinding assay (TBIA) is widely used for the detection and localization of plant viruses in various plant tissues. The basic experimental procedures of TBIA sampling and blotting were simplified using commercially available micropipette tips. This method was termed the ring-blot immunobinding assay (R-BIA), as the blot on the membrane forms a ring shape. The detection efficacy of R-BIA was tested for two chili pepper viruses, pepper mild mottle tobamovirus (PMMoV) and pepper mottle potyvirus (PepMoV), following the optimized serological procedures of TBIA (length of the incubation period and BSA concentration, and primary and secondary antibodies). Sensitivity of the R-BIA was about 1 ng/ml of purified PMMoV in pepper leaf sap from a healthy pepper plant. R-BIA also showed high specificity in the detection of PMMoV and PepMoV. Moreover, the modified sampling and blotting procedures were simpler and more reliable than other TBIA methods (such as whole-leaf blotting and crushed-leaf blotting), suggesting that the R-BIA may be used for medium- to large-scale detection of plant viruses in laboratories with minimal facilities.
Orchidaceae species account for one-tenth of all angiosperms including more than 30,000 species having significant ecological, evolutionary, and economic importance. Despite Orchidaceae being one of the largest families among flowering plants, crucial cytogenetic information for studying species diversification, inferring phylogenetic relationships, and designing efficient breeding strategies is lacking, except for 10% or less of orchid species cases involving mostly chromosome number or karyotype analysis. Also, only approximately 1.5% of the identified orchid species from less than a hundred genera have genome size data that provide crucial information for breeders and molecular geneticists. Various molecular cytogenetic techniques, such as fluorescence in situ hybridization (FISH) and genomic in situ hybridization (GISH), have been developed for determining ploidy levels, analyzing karyotypes, and evaluating hybridity, in several ornamental crops including orchids. The estimation of genome size and the determination of nuclear DNA content using flow cytometry have also been employed in some Orchidaceae subfamilies. These different techniques have played an important role in supplementing beneficial knowledge for effective plant breeding programs and other related plant research. This review focused on orchid breeding summarizes the status of current cytogenetic tools in terms of background, advancements, different techniques, significant findings, and research challenges. Principal roles and applications of cytogenetics in orchid breeding as well as different ploidy level determination methods crucial for breeding are also discussed.
The plant breeding technology was developed with genetic engineering. Many researchers and breeders have turned from traditional breeding to molecular breeding. Genetically modified organisms (GMO) were developed via molecular breeding technology. Currently, molecular breeding technologies facilitate efficient plant breeding without introducing foreign genes, in virtue by of gene editing technology. Gene targeting (GT) via homologous recombination (HR) is one of the best gene editing methods available to modify specific DNA sequences in genomes. GT utilizes DNA repair pathways. Thus, DNA repair systems are controlled to enhance HR processing. Engineered sequence specific endonucleases were applied to improve GT efficiency. Engineered sequence specific endonucleases like the zinc finger nuclease (ZFN), TAL effector nuclease (TALEN), and CRISPR-Cas9 create DNA double-strand breaks (DSB) that can stimulate HR at a target site. RecQl4, Exo1 and Rad51 are effectors that enhance DSB repair via the HR pathway. This review focuses on recent developments in engineered sequence specific endonucleases and ways to improve the efficiency of GT via HR effectors in plants.
Background: Panax ginseng Meyer is a traditional medicinal plant famous for its strong therapeutic effects and serves as an important herbal medicine. To understand and manipulate genes involved in secondary metabolic pathways including ginsenosides, transcriptome profiling of P. ginseng is essential. Methods: RNA-seq analysis of adventitious roots of two P. ginseng cultivars, Chunpoong (CP) and Cheongsun (CS), was performed using the Illumina HiSeq platform. After transcripts were assembled, expression profiling was performed. Results: Assemblies were generated from ~85 million and ~77 million high-quality reads from CP and CS cultivars, respectively. A total of 35,527 and 27,716 transcripts were obtained from the CP and CS assemblies, respectively. Annotation of the transcriptomes showed that approximately 90% of the transcripts had significant matches in public databases.We identified several candidate genes involved in ginsenoside biosynthesis. In addition, a large number of transcripts (17%) with different gene ontology designations were uniquely detected in adventitious roots compared to normal ginseng roots. Conclusion: This study will provide a comprehensive insight into the transcriptome of ginseng adventitious roots, and a way for successful transcriptome analysis and profiling of resource plants with less genomic information. The transcriptome profiling data generated in this study are available in our newly created adventitious root transcriptome database (http://im-crop.snu.ac.kr/transdb/index.php) for public use.
Nguyen, Van Binh;Giang, Vo Ngoc Linh;Waminal, Nomar Espinosa;Park, Hyun-Seung;Kim, Nam-Hoon;Jang, Woojong;Lee, Junki;Yang, Tae-Jin
Journal of Ginseng Research
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제44권1호
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pp.135-144
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2020
Background: Panax species are important herbal medicinal plants in the Araliaceae family. Recently, we reported the complete chloroplast genomes and 45S nuclear ribosomal DNA sequences from seven Panax species, two (P. quinquefolius and P. trifolius) from North America and five (P. ginseng, P. notoginseng, P. japonicus, P. vietnamensis, and P. stipuleanatus) from Asia. Methods: We conducted phylogenetic analysis of these chloroplast sequences with 12 other Araliaceae species and comprehensive comparative analysis among the seven Panax whole chloroplast genomes. Results: We identified 1,128 single nucleotide polymorphisms (SNP) in coding gene sequences, distributed among 72 of the 79 protein-coding genes in the chloroplast genomes of the seven Panax species. The other seven genes (including psaJ, psbN, rpl23, psbF, psbL, rps18, and rps7) were identical among the Panax species. We also discovered that 12 large chloroplast genome fragments were transferred into the mitochondrial genome based on sharing of more than 90% sequence similarity. The total size of transferred fragments was 60,331 bp, corresponding to approximately 38.6% of chloroplast genome. We developed 18 SNP markers from the chloroplast genic coding sequence regions that were not similar to regions in the mitochondrial genome. These markers included two or three species-specific markers for each species and can be used to authenticate all the seven Panax species from the others. Conclusion: The comparative analysis of chloroplast genomes from seven Panax species elucidated their genetic diversity and evolutionary relationships, and 18 species-specific markers were able to discriminate among these species, thereby furthering efforts to protect the ginseng industry from economically motivated adulteration.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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