Gonadotropins are heterodimers consisting an alpha chain ($Cg{\alpha}$) and a beta chain. Interestingly, presence of complicated $LH-{\beta}$ transcripts in rat testis was accidently found; testicular $LH-{\beta}$ transcripts were confined in seminiferous tubules to spermatids, and the translated products were localized in the elongated spermatids. We hypothesized that mouse testis has potential to produce the tissue specific $LH-{\beta}$ with similar structure to the rat testicular forms. To verify our hypothesis, we examined the adult mouse (ICR) testis using RT-PCR and immunohistochemistry. The PCR revealed the presence of the identical products in the reactions for three LH subunit types. The expected product sizes for mouse $Cg{\alpha}$ and $LH-{\beta}$ known as pituitary type were 224 bp and 503 bp, respectively. The testicular type $LH-{\beta}$ products were produced by a primer set based on the rat sequences, with unexpected size of 800 bp. Sequencing revealed that the proximal and distal parts (2-82 and 661- 773 bp, respectively) were homologous to rat testicular $LH-{\beta}$ cDNA, and middle part (83-660 bp) was a unique mouse-specific region. Both $Cg{\alpha}$ and $LH-{\beta}$ positive signals were in the round and elongated spermatids and mature sperms, and the $LH-{\beta}$ signals were more intense. In conclusion, our study demonstrated that the presence and localization of the LH subunits in mouse testis. Further studies will be needed to understand the precise structure and function of mouse testicular LH.
본 연구에서는 vesicular stomatitis virus G glycoprotein (VSV-G)를 envelope로 가지는 pantropic retrovirus vector system을 이용하여 재조합 human FSH 유전자가 전이된 형질전환 닭을 생산하고자 하였다. Human FSH $\alpha$ 및 $\beta$ 유전자와 CTP linker는 human pituitary gland cDNA library에서 RT-PCR 방법을 이용하여 cloning하였으며, 각각의 fragment는 FSH$\beta$-CTP-FSH$\alpha$ 순서의 단일사슬로 연결하였다. 연결된 FSH$\beta$-CTP-FSH$\alpha$는 retroviral vector 내의 $\beta$-actin promoter의 조절 하에 도입한 후, PT67 packaging cell line에 transfection하여 virus를 생산하였으며 생산된 virus는 pantropic한 virus producing cell인 GP293에 infection하여 FSH 유전자가 도입된 virus를 생산하였다. FSH 유전자의 발현을 in vitro에서 확인하기 위하여 CHO (chinese hamster ovary) 세포에 virus를 감염시킨 후, 세포의 배양액을 취하여 electrochemilumine-scence immunoassay 방법으로 정량하였다. In vitro에서 전이 후 발현이 확인된 FSH 외래유전자의 retroviral vector virus를 초원심분리로 고농축하여 stageX의 계란의 배반엽 층에 주입하였으며, 그 결과 18%의 부화율과 91%의 부화한 닭의 유전자 전이율을 확인할 수 있었다. 전이된 유전자의 확인은 FSH$\beta$와 Neo 유전자에 대한 primer를 이용한 RT-PCR의 방법을 이용하였다. In vitro에서와는 달리 in vivo에서는 FSH 유전자의 전이는 확인되었으나 발현을 확인하지는 못하였는데, 이는 적은 수의 실험군이 형질전환율에 비해 상대적이지 못하였거나, 외래 유전자인 FSH의 발현에 의한 생리적인 부작용이 유발되어 해당개체가 부화되지 못한 것으로 추정된다. 본 문제점을 해결하기 위하여 실험군의 수를 늘리고 외래 유전자에 대한 controllable expression system이 보완될 필요성이 요구되며, 이러한 점이 해결된다면 높은 유전자 전이율에 기인하여 retrovirus를 이용한 형질전환 방법은 형질전환 가금의 생산에 있어서 매우 효율적이고 주목할 만한 방법으로 사료된다.
The somatotropic (GH-IGF-I) axis consists of many hormonal and nutritional factors that control GH release from the somatotrophs in the anterior pituitary. The GH-releasing substances are GHRH and GHS (GHRP or ghrelin), while the GH release-inhibiting substances are somatostatin (SRIF), insulin-like growth factor-I (IGF-I), leptin and glucocorticoids. However, there is evidence showing that nutrition is involved in the control of the somatotropic axis. In addition, weaning is a drastic event for neonates because their alimentary and endocrine circumstances are changed due to the switch, even if gradual, from a liquid milk diet to one composed of such solids as hay and grains. The biological role of ghrelin is one of the hormonal factors that have been focused on ever since ghrelin was discovered at the end of the last century. A 27-amino acid peptide that is mainly synthesized and released from the abomasum epithelium, ghrelin has not been fully evaluated in relation to the somatotropic axis of the ruminant. It has also proven difficult even to investigate the cellular mechanisms of ghrelin action, because this hormone exerts animal-species-dependent actions via a complex set of intracellular signaling pathways. This is also the case for the action of leptin. Another substance, IGF-I, shows a partial inhibitory action on GH secretion in the ruminant. The effect of nutrition is also different among animal species. This is evident by the fact that undernutrition suppresses the circulating GH levels in rodents, but increases it in ruminants and humans. Recently, weaning has been shown to change the postprandial GH responses in ruminants; milk feeding increases, but hay and concentrate feeding suppress, the postprandial circulating GH levels. Even if the postprandial GH level is increased, the ghrelin level is decreased by milk feeding. Macronutrients also possess stimulatory and inhibitory actions on GH secretion in vivo and in vitro. These findings indicate the complexity of the control mechanisms of the somatotropic axis. In the present review, we summarize recent findings on the factors controlling the axis of the ruminant.
Objective : All kinds of stimulus can be work as a stressor, and too much stress can makes disease and leads to a death. It has studied to know what kinds of study have carried out for controlling stress with acupuncture. Methods : It has searched articles in various web sites with key words of acupuncture, stress, hormone, adrenal, cortisol, catecholamine, epinephrine, and ACTH. Result : 1. It will work in the hypothalamus-pituitary gland-adrenal axis to control stress with acupuncture. 2. It has studied most in the years of 1990's and with acupoint of BL23 (腎兪) about controlling stress with acupuncture in Korea. 3. It has studied most in USA, the years of 2000's and with acupoints of ST36 (足三里), PC6 (內關) about controlling stress with acupuncture in Korea. Conclusion : It can be said that is growing interest about controlling stress with acupuncture in other countries, and it should be studied more various about controlling stress with acupuncture in Korea.
폐암에서 중추성 요붕증이 병합되는 경우는 드물며, 그 원인은 대개 뇌하수체로의 전이에 의한 것으로, 이런 경우 수술적 치료나 방사선 치료가 도움이 된다. 그러나 부종양성 증후군의 일부로 발현될 수도 있으며, 이 경우에는 데스모프레신으로 효과적으로 치료할 수 있다. 저자들은 갈증, 다음, 다뇨를 주소로 내원한 비소세포폐암 환자에서 수분제한검사로 중추성 요붕증을 확진한 환자를 경험하였기에 이를 보고하는 바이다.
An observational study was conducted to evaluate the effect of anterior pituitary gonadtropin on super-ovulation in donors, embryo quality, development stage of embryo, transfer location, corpus luteum quality of recipient, ease of transfer and induced versus natural estrus on pregnancy rates. The data were collected from 451 non-surgical transfers of fresh and frozen bovine embryos. 1. The average number of CL, formed in ovaries which were stimulated with follicular stimulating hormone, and/or APG, were 11. 1${\pm}$1.21, 12.3${\pm}$1.84, respectively. The numbers of embryos recovered were 8.2${\pm}$1.35, 8.7${\pm}$ 1.39, and the numbers of transferable embryos were 6.4${\pm}$0.98. 6.6${\pm}$1.01. respectively. 2 There was no effect of spontaneous versus prostaglandin-induced estrus of recipients on pregnany rates of either fresh (61.5% vs. 59.5%) or previously frozen(54.5% vs. 58.5%) embryos. 3. There were significant differences(p<0.05) in pregnancy rates for embryo grade 1(63.6%), grade 2 (45.4%) and grade 3 (30.4%) in fresh group and for grade-1 (60.5%), grade-2 (47.8%) and grade-3 (18.1%) in previously frozen embryos. 4. The recipients transfered with embryo morulae were found to have a lower (p<0.05) pregnancy rates than those transfered with embryos of blastocyst in be th fresh and previously frozen embryos. 5. There was no significant difference between transfer locations in pregnancy rates using both fresh and frozen embryos. 6. Attempts to select recipients for high pregnancy rates on the basis of corpus luteum (CL) quality were performed. CL were classified into 3 quality grades, on the basis of size and prominence. Quality grades 1 and 2 group had higher (p<0.05) pregnancy rates than grade-3 group using both fresh and frozen embryos. 7 Ease of transfer was ranked to a scale of one to three on the basis of increasing difficulty (time required). Transfers ranted as ease score 1 and 2 had significantly higher (P<0.05) pregnancy pregnancy rates (45.8%, 66.6%) than ease score 3 (27.7%, 31.8%) using both fresh and frozen embryos respectively.
The effects of continuous GH(hGH) secretion on the female reproduction was studies in adults female transgenic rats expressing the hGH gene with a mouse whey acid protein (mWAP) promotor. Two line of transgenic female rats carrying the mWAP/hGH gene were established and used in the study. One was characterized by relatively high levels of serum hGH (high line), and the other had relatively low levels (low line). 1. High line female rats had recurring, Pseudopregancy-like estrous cycles accompanied by increased serum progesterone level for 2 weeks after ovulation, and they were fertile. 2. In the rats, luteinization occurred spontaneously without cervical stimulation, probably due to high levels of serum hGH, which has prolactin (PRL)-like activity in the rat. 3. Low line female rats had recurring, regular 4-days estrous PRL surge following cervical stimulation were not, detected and PRL secretion was not induced by a dopamine antagonist. 4. The ovarian tissue in this line had a much higher number of corpora lutea and grew much heavier than in normal littermates, suggesting impairment of PRL induced structural luteolized. Su, pp.ession of PRL secretion in the low line rats was, at least in part, due to a marked decrease in the number of lactotrophs in the pituitary. The present study shows that the serum hGH level plays a crucial role in regulating luteal function in female transgenic rats expressing the hGH gene.
골든 햄스터의 생식활동은 광주기에 의해 조절된다. 그들의 생식능력은 여름에 왕성하고 겨울에는 퇴화한다. 송과선에서 분비되는 멜라토닌은 계절적 번식동물에서 생식활동을 중재한다. 멜라토닌 수용체가 최근에 사람을 포함하는 몇몇 동물에서 확인되었지만 골든 햄스터의 생식능력과 관련하여 알려진 바가 많지 않다. 역전사 PCR 방법을 사용하여 멜라토닌 수용체의 일부 유전자를 동정하였다(309 염기). 멜라토닌 수용체의 핵산 서열과 추론된 아미노산 서열을 보고된 다른 동물들과 비교하였다. 멜라토닌 수용체는 시상하부, 뇌하수체, 혈액, 지라에서 명백히 탐지되었다. 광주기가 정소 무게 및 생식 호르몬에 현저한 영향을 주었지만 멜라토닌 수용체의 발현에는 영향을 뚜렷하게 보이지 않았다. 이러한 결과는 생식을 조절하는 멜라토닌은 그 수용체의 수보다 수용체에 결합하는 친화도가 더 중요함을 시사한다.
Prolactin (PRL) is a pituitary hormone involved in various physiological processes, including lactation, mammary development, and immune function. To further investigate the in vivo and comparative endocrine roles of PRL, mouse PRL cDNA fused to the cytomegalovirus promoter, was introduced into muscle by direct injection. Previously we studied the function of rat PRL using the same protocol. PRL mRNA was detected in the muscle following injection by RT-PCR and subsequent Southern blot analysis. PRL was also detected and Western blot analysis revealed a relatively high level of serum PRL. In the pCMV-mPRL-injected female mice, the estrous cycle was extended, especially in diestrus stage and the uterus thickening that was shown in normal estrous stage was not observed. In the pCMV-mPRL-injected male mice, new blood vessels were first found at 5 weeks of age and fully developed blood vessels were found after 8 weeks in the testis. The number of Leydig cells increased within the testis and the testosterone level in serum was observed high. Finally, the number of white blood cells (WBCs) increased in the pCMV-mPRL-injected mice. The augmentation of WBCs persisted for at least 20 days after injection. When injection was combined with adrenalectomy, there was an even greater increase in number of WBCs, especially lymphocytes. This increase was returned normal by treatment with dexamethansone. Taken together, our data reveal that intramuscularly expressed mouse PRL influences reproductive functions in female, induces formation of new blood vessels in the testis, and augments WBC numbers. Of notice is that the Leydig cell proliferation with increased testosterone was conspicuously observed in the pCMV-mPRL-injected mice. These results also suggest subtle difference in function of PRL between mouse and rat species.
This study was attempted to investigate the effect of raclopride, a dopamine $D_2$ receptor antagonist, on renal function in dog. Raclopride (70-220$\mu\textrm{g}$/kg), when given intravenously, Produced antidiuresis along with the decrease in free water clearance ( $C_{H_2O}$), urinary excretion of sodium and potassium ( $E_{Na}$ , $E_{K}$), partially decreased osmolar clearance ( $C_{osm}$) and increased reabsorption rates of sodium and potassium in renal tubules ( $R_{Na}$ , $R_{K}$). Raclopride administered into a renal artery did not influence on renal function in small doses (10 and 30$\mu\textrm{g}$/kg), whereas exhibited the decrease of urine volume (Vol) and $C_{H_2O}$ both in experimental and control kidney in much dose (100$\mu\textrm{g}$/kg), at this time, the decreased rates of both Vol. and $C_{H_2O}$) were more prominent in control kidney rather than that elicited in experimental kidney, and then only via was decreased in control kidney but increased in experimental kidney. Raclopride administered via carotid artery (30-200$\mu\textrm{g}$/kg) did not influence at all on renal function. Antidiuretic action induced by raclopride given intravenously was not affected by renal denervation. Raclopride given into carotid artery was little effect on renal function without relation to renal denervation. Above results suggest that raclopride produces antidiuresis by potentiation of antidiuretic hormone (ADH) action in blood without increase of ADH secretion in posterior pituitary gland, it is not related to renal nerve function in dogs.ogs.s.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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