Objective : The aim of this study was to evaluate the microanatomy and histological features of the central myelin in the root exit zone of facial nerve. Methods : Forty facial nerves with brain stem were obtained from 20 formalin fixed cadavers. Among them 17 facial nerves were ruined during preparation and 23 root entry zone (REZ) of facial nerves could be examined. The length of medial REZ, from detach point of facial nerve at the brain stem to transitional area, and the thickness of glial membrane of central myelin was measured. We cut brain stem along the facial nerve and made a tissue block of facial nerve REZ. Each tissue block was embedded with paraffin and serially sectioned. Slices were stained with hematoxylin and eosin (H&E), periodic acid-Schiff, and glial fibrillary acid protein. Microscopy was used to measure the extent of central myelin and thickness of outer glial membrane of central myelin. Thickness of glial membrane was examined at two different points, the thickest area of proximal and distal REZ. Results : Special stain with PAS and GFAP could be differentiated the central and peripheral myelin of facial nerve. The length of medial REZ was mean 2.6 mm (1.6-3.5 mm). The glial limiting membrane of brain stem is continued to the end of central myelin. We called it glial sheath of REZ. The thickness of glial sheath was mean $66.5{\mu}m(40-110{\mu}m$) at proximal REZ and $7.4{\mu}m(5-10{\mu}m$) at distal REZ. Conclusion : Medial REZ of facial nerve is mean 2.6 mm in length and covered by glial sheath continued from glial limiting membrane of brain stem. Glial sheath of central myelin tends to become thin toward transitional zone.
Min-A Je;Haneul Lee;Heechul Park;Dong Hyeok Kim;Yeongdon Ju;Jaewon Lim;Sunghyun Kim;Jungho Kim
대한의생명과학회지
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제29권1호
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pp.48-52
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2023
Formaldehyde use is associated with serious health risks, which can affect medical personnel and technicians. Therefore, we investigated the efficacy of an alternative fixative, with respect to two types of formalin fixatives, by hematoxylin and eosin (H&E) staining, periodic acid Schiff (PAS) staining, immunohistochemical (IHC) staining, and RNA extraction. For H&E staining, the circular nucleus was stained dark blue by the basic dye hematoxylin and the cytoplasm was stained red by the acid dye eosin in all three fixative samples. No difference was found in the Duksan General Science (DGS), Sigma-Aldrich, and Core-Fix fixative samples (Corebiotech) used to fix kidney tissue, after PAS staining. IHC staining showed that CD4 was significantly increased in the lippolysaccharide (LPS)-treated group compared to the control group (vehicle), confirming the changes in specific molecules. The quantity and quality of RNA from tissues fixed in the three types of fixatives were evaluated. The average concentration of RNA was 106 ng/µL and average purity at A 260/280 ratio was 1.7~2.0, regardless of fixative used. For quality of protein, glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) protein was confirmed by Western blotting. In conclusion, Core-Fix can be used as a fixative for pathological tissues, in histological and molecular diagnoses.
방사선 및 각종 독성물질에 의한 고환 정세관세포의 사멸은 apoptosis와 관련이 있다고 알려져 있으나 정세관상피주기에 따른 apoptosis 발생에 대한 변화연구는 미진하다. 본 연구에서는 감마선을 조사한 ICR 마우스의 고환에서 apoptosis 발생을 transferase-mediated end labeling (TUNEL) 과 periodicacid-Schiff (PAS) 염색을 동시에 실시하여 관찰하였다. Apptosis는 TUNEL 양성으로 나타났으며 특징적 형태변화를 보였다. 2 Gy (분당 2 Gy의 선량률)의 방사선을 조사하고 24시간동안의 변화를 관찰한바 방사선조사 후 12시간에 가장 높은 apoptosis 발생을 보였고 이후 감소하였다. 8 Gy까지의 방사선을 조사하고 8시간에 변화를 관찰한 결과 모든 정세관상피주기에서 방사선 용량에 비례한 apoptosis의 발생이 관찰되었다. 방사선 용량-반응은 linear-quadratic 곡선 [y=(-0.014${\pm}$0.009)$D^{2}$ +(0.31${\pm}$0.697)D+0.3575. Y는 정세관 당 TUNEL 양성세포의 수, D는 방사선 용량(Gy), $r^{2}$=0.9]에 가장 일치 하였다. 최대반응은 8 Gy에서 관찰되었으며, 0.5 Gy조사군에서도 변화가 나타났다. 이러한 변화는 정세관상피주기 V에서 B정조세포와 정세관상피주기 XII의 분열기 정자세포에서 가장 현저하였다.
저자는 붕어, 두꺼비, 유혈목이, 십자매, 소를 재료로 담낭 상피세포의 조직학적인 관찰과 조직화학적인 성상의 관찰로 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 상피세포의 형태는 동물마다 차이를 가지며, 일부의 동물에서 보고된 이른바 통상세포와 간상세포의 2종의 세포를 조직화학적 면에서는 뒷받침 할 수 없었다. 2. 붕어는 단층 원주세포, 두꺼비는 점막주름 상부는 원추형, 주름 측면부는 원주형, 주름 기부는 사다리꼴 세포, 유혈목이는 단층 원주상피로서 높이가 얕은 원주형 내지 입방형 세포 그리고 소는 단층 원주상피로서 원주형이 되었다. 3. 세포질의 eosinophility는 붕어에서는 모든 상피세포의 핵상단부 세포질에서 강하고 균일하였고, 두꺼비에서는 세포질 전체가 약한 세포가 다수 출현하였고, 유혈목이는 핵상부 세포질이 균일하게 강하였으며, 십자매에서는 전 세포질이 균일하였고, 소에서는 세포질 전체가 비교적 균일하였으며 핵 주위 세포질이 환상으로 약하였다. 4. PAS 반응에서 동물에 따른 강약의 차이를 보였고, 세포질이 밝게 보이는 명세포와 어둡게 보이는 암세포로 나눌 수 있었으며, 명세포의 출현은 붕어에서 6.4%, 두꺼비에서 4.3%, 그리고 십자매에서 3.7%였으며 유혈목이와 소에서는 명세포가 출현하지 않았다. 5. Ninhydrin-Schiff에 양성인 단백질 함량은 소, 붕어, 십자매, 두꺼비, 유혈목이의 순이었는데 붕어, 유혈목이, 십자매에서는 점막주름 상부세포들이 풍부하였고, 두꺼비에서는 부위 별 차이가 없을 뿐만 아니라 세포질에 균일하게 함유하였다. 6. 중성 지방은 붕어, 유혈목이, 십자매, 소에서는 세포의 형태에 관계없이 염색성을 보이지 않거나 약한 세포가 출현하였고, 두꺼비에서는 세포 부위의 차이는 있으나 전세포에서 염색성을 나타내었다. 7. RNA 와 DNA는 모든 동물에서 세포의 형태에 관계없이 점막주름 상부세포가 강하고 점막주름 기부 및 측면부의 세포에서는 약한 반응을 보였다.
The transplantation of cartilage, especially auricular cartilage, has assumed a role of importance in the field of plastic and reconstructive surgery. From long years ago, many reports have appeared in the literature describing the experimental and clinical results of the use of cartilage. At present, the evidence for survival of autograft of cartilage is admitted, But, the results for interrelationship between the bone and cartilage grafts with or without perichondrium is not so conclusive. The purpose of this study were observed as to whether autogenous cartilage grafts were fixed by means of tie with 4-0 vicryl and fibrin adhesive on the femur or microscopic findings of union state in 16 rabbits. We sacrified the experimental animals after 1, 2, 4, 6 weeks postoperatively and made the specimens as a routine laboratory procedures and stained with Hematoxylin-Eosin stain, Verhoeff-van Gieson elastic fiber stain, and alcian blue periodic acid-Schiff(AB-PAS) for mucopolysaccharide. Histologic evaluation was performed under microscope. The obtaind results were as follows : 1. Fibrous union was formed between the grafting cartilage and the femur, nor any findings of calcification and formation of new bone. 2. Partial fibrous adhesion was observed in fibrin adhesive groups on 6 weeks postoperatively. 3. Appositional growth has performed more in fibrin adhesive groups than tie groups. 4. There are little difference in both for new copillary proliferation and fibroblast activations. 5. Degenerative changes have apperared more in tie groups than adhesive groups, but not related to the healing periods.
To study some informations on the morphogenesis and developmental process of the coronal suture in rats, the author performed daily oral administrations of demethylchlorotetracycline, a kind of tetracycline group, in the amount of 30mg/kg of body weight to the female rats from the 7th day of pregnancy to the time of delivery. Microscopic evaluation was undertaken on the fetal rats in the experimental group. The subject of this experiment were defined to the fetal rats of each group at 1st, 3rd, 7th and 14th day after birth. All these fetal rats were sacrificed and the heads were removed. All the tissue sections were fixed with $10\%$ formalin, Bouin' and Carnoy' solution and then stained by Hematoxylin-Van Gieson stain, or Feulgen and Rossenbeck, Periodic acid Schiff, and prepared for alcian blue reaction. The results were as follows; 1. The directions of osteogenic fibers were arranged irregulary during first 3 days, but after the 7th day they tended to change radial directions like control group. 2. The density of deep stained cells by Feulgen-Rossenbeck reaction were shown leu in the experimental group than that in the control group in first 3 days, but there was shown no significant difference between both groups after the 7th day. 3. PAS reaction in early stage was generally negative in the experimental group unlike as in the control group, but diffuse reaction was observed in the loose middle zone like as in the control group after 14th day. 4. Alcian blue reaction was negative in cambial zone, and slightly positive in uniting zone compared with control group in early stage. After 14th day, however, there was observed a tendency of moderately positive reaction.
The cytologic distinction of carcinoma cells from reactive mesothelial cells can be difficult, especially in specimens containing abundant reactive mesotheilal cells and inflammatory cells with scant carcinoma cells. This study evaluates the usefulness of mucin and immunocytochemistry for discrimination between reactive mesotheilal cells and carcinoma cells, and sensitivity and specificity of these stains for the detection of metastatic carcinoma in serous effusions. Immunocytochemical panel including mucin cytochemistry with the periodic acid-Schiff(PAS) reaction after or without diastase digestion was undertaken on 127 serous effusion specimens with histologically confirmed diagnoses. The specimens including cell smears and cell blocks were stained with PAS and antibodies to carcinoembryonic antigen(CEA), epithelial membrane antigen(EMA), cytokeratln(CK), and vimentin. The sensitivities of these stains for metastatic carcinoma(127 cases) were 49%(46/94) in PAS, 48%(60/124) in CEA, 89%(97/109) in EMA, 88%(93/106) in CK, and 25%(20/81) in vimentin. The sensitivities of stains for reactive mesothelial cells(36 cases) were 19%(7/36) in EMA, 78%(28/36) in CK, and 75%(27/36) in vimentin. The PAS and CEA stains were not reacted with all cases of benign reactive serous effusions containing abundant reactive mesothelial cells. The specificities of stains for metastatic carcinoma(127 cases) were 100% in PAS, 100% in CEA, 81% in EMA, 22% in CK, and 25% in vimentin. The optimal combination of stains for use in a panel was PAS and CEA. Combined results from these two stains yielded an advanced sensitivity of 8% in PAS and 4% in CEA for metastatic carcinoma. EMA was also cosiderably useful for identification of carcinoma cells. CK and vimentin were not suitable for distinguishing between reactive mesothelial cells and carcinoma cells.
형질전환 가금의 생산은 생체반응기(Bioreactor)가금에 의한 고부가가치의 생의약 물질을 저비용, 고효율로 생산할 수 있으며, 배 발달과정 및 유전자 조절기작 규명을 통한 학문적 이용성 등 다양한 분야에 응용될 수 있다. 형질전환 가금을 생산하기 위한 방법 중 닭의 배 발생 초기에 발생하는 성세포(정자 혹은 난자)의 전구세포인 원시생식세포를 이용한 연구가 활발하게 진행되고 있다. 그러나 이를 검증할 원시생식세포 특이적 마커의 부재로 많은 어려움을 겪고 있다. 따라서 본 연구는 원시생식세포의 특성 분석을 위해 PAS(Periodic acid-Schiff) 염색 및 특이항체 (SSEA-1,3,4 & Integrins $\alpha$6, $\beta$l) 그리고 lectins (STA, DBA, ConA, WGA)를 이용하였다. 이번 연구결과를 통한 닭 원시생식세포의 특이적 마커의 개발은 원시생식세포를 이용한 가금의 형질전환 연구에 기여할 것이다.
The pathological mechanism of impaired spermatogenesis after vasectomy has not been completely investigated. In this study, we examined pathological changes of the testis and the Fas-Fas ligand (FasL) mediated signaling pathway in apoptotic germ cell death after vasectomy in rats. Ten-weeks old Sprague-Dawley rats were underwent bilateral vasectomy and sacrificed after 1 day, 2 days, 3 days, 5 days, 1 week, 2 weeks, and 4 weeks of surgery and the testes were removed. Histopathological evaluation of spermatogenesis was performed by hematoxylin-eosin and periodic acid-Schiff-hematoxylin staining. To elucidate the pathophysiology of seminiferous tubule damage, terminal dUTP nick end labeling staining, electrophoresis assay of DNA fragmentation, and Western blotting analysis for Fas-FasL were performed. Relative weights of testes were decreased from 5 days after vasectomy. Germ cell degeneration were first found in the spermatogonia and spermatocytes at stages I-VI, and XII-XIV seminiferous tubules. Mean incidence of apoptotic germ cells after vasectomy progressively increased to peak in 5 days, and then gradually decreased to the control levels in 2 weeks after vasectomy. The expression of Fas-FasL reached maximum level at 5 days after vasectomy and then declined. In conclusion, impaired spermatogenesis after vasectomy associated with an increase in germ cell apoptasis, which is partly mediated by the activation of Fas-FasL.
In the present study, in order to make an in vitro model of gastric mucosa for physiological and pharmacological studies, we established two immortalized gastric surface mucous cell lines (GSM06 and GSM10), which produce periodic acid-Schiff (PAS)-and concanavalin A (Con A)-positive glycoproteins, from a primary culture of gastric fundic mucosal cells of adult transgenic mice harboring a temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen gene 〔1]. Gastric fundic mucosal cells were isolated as a modification of a previously described method for rats by Schepp et al. (2). The isolated gastric fundic mucosal cells were cultured in DME/F12 medium supplemented with 2% fetal bovine serum (FBS), 1% ITES (consisting of 2 mg/1 insulin, 2 mgg/1 transferrin, 0.122 mg/1 ethanolamine and 0.00914 mg/1 sodium selenite) and 10 ng/ml recombinant epidermal growth factor (EGF) in a collagen-coated culture dish. To remove fibroblastic cells from the culture, gastric mucosal cells were incubated in the culture medium containing dispase (25 U/ml) for 24 h. The cells, uncontaminated with fibroblastic cells, were then cloned by colony formation. In our series of three attempts, two cell lines (GSM06 and GSM10) have been established at last. The cells proliferated, attached to the dish ana grew until confluent monolayers were formed, and maintained tight contact with neighboring cells. Both GSM06 and GSM10 cells have now been in culture for more than 9 months with regular passaging. The either cell produced
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[게시일 2004년 10월 1일]
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