Park, Jong-Il;Jeong, Taw-Cheon;Cha, Shin-Woo;Shin, Ho-Chul;Jeong, Hoon;Kim, Su-Ung;Han, Sang-Seop
Biomolecules & Therapeutics
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v.4
no.1
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pp.1-6
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1996
In the present study, the antigenic potential of G009, a polysaccharide isolated from Ganoderma lucidum IY009, was determined in BALB/C mice and Hartley guinea pigs. Antigenicity tests, including passive cutaneous anaphylaxis (PCA), active systemic anaphylaxis (ASA) and indirect hemagglutination test (IHA) were performed according to the established guidelines of National Institute of Safety Research. The results were as follows: 1. Mice showed no production of antibodies against G009 sensitized with an adjuvant, aluminum hydroxide gel (alum), when judged by the heterologous PCA test in rats. Meanwhile, antibodies against ovalbumin (OVA) sensitized with alum were clearly detected. 2. In the studies with guinea pigs, both the sensitization of G009 alone and of G009 with complete Freund's adjutant (CFA) did not produce positive reactions in homologous PCA. In the case of ASA, however, G009 alone and G009 with CFA produced positive reactions. 3. No G009 specific reaction was observed in an IHA assay using sera isolated from G009 sensitized mice. These findings suggest that G009 have no antigenicity potential in mice but may have weak antigenicity in guinea pjgs.
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.15
no.2
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pp.33-52
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2002
The effects of Arctii fructus extract on allegenic inflammation were investigated using in vivo and in vitro test models. Firstly, the cytotoxicity of Arctii fructus extract was validated using MTT assay. As a result, Arctii fructus extract showed no cytotoxic potential, while SDS, a positive control, revealed strong cytotoxic effect. In LLNA assay, Arctii fructus extract showed no skin allergenicity. Next, the anti-allergic actions of Arctii fructus extract were evaluated using rodent experimental models. The oral, intraperitoneal and intradermal administration of Arctii fructus extract significantly inhibited the compound 48/80-induced vascular permeability documented by Evans blue extravasation. In addition, Arctii fructus extract showed potent inhibitory effect on passive cutaneous anaphylaxis activated by anti-dinitrophenyl (DNP) IgE when orally administered. In an in vitro study, Arctii fructus extract revealed to possess inhibitory potential on the compound 48/80-induced histamine release from rat peritoneal mast cells. Moreover, Arctii fructus extract inhibited the IL-4 and TNF-${\alpha}$ mRNA induction by PMA and A23187 in human leukemia mast cells, HMC-1. Finally, it revealed that Arctii fructus extract significantly suppressed histamin-provoked antigenic inflammation reactions in human prick test. Taken together, these results suggest that anti-allergic action of Arctii fructus extract may be due to the inhibition of histamine release and cytokine gene expression in the mast cells.
Park, Soo-Jin;Jeong, Mi-Hye;Chang, Hee-Seop;O, Jin-Cheol;Park, Kyung-Hun;Park, Jae-Yup
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.15
no.3
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pp.289-297
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2011
As part of safety evaluation of 2A (amono acid), PAT (phosphinotricin Acetyl-transferase), CtrI (Carotene desaturase) and PSY (phytoene synthase), the expressed proteins inserted to ${\beta}$-carotene Biofortified rice were tested for antigencity test. As a result, the group of administering high-concentration PAT, the expressed protein, showed a great content of total WBC; however, other expressed proteins did not show much difference. Against ASA (Active Systemic Anaphylaxis) test, the group of administering high-concentration PAT, the expressed protein, showed mild or medium degree of symptoms, but there was no dead entity. According to the result of the PCA (Passive Cutaneous Anaphylaxis test), the group of administering high-concentration PAT, 2A, PSY, and mixture of expressed proteins indicated positive response in low anti-serum concentration, and the group of administering the clinical concentration of mixture indicated mild positive response. However, because the group of administering the clinical concentration of expressed proteins, PAT, 2A, PSY, and CtrI, did not show positive response, it is thought that IgE is not generated. Further studies are needed to verify the safety of ${\beta}$-carotene Biofortified rice.
Non-biting midges are known to contain potent inhalant allergens. IgE antibody responses to the crude extract of Chironomus kiiensis adults, a dominant chironomid species in Korea, were examined. With the IgE-ELISA or passive cutaneous anaphylaxis reactions, increased levels of chironomid-specific IgE were detected in the skin test positived human sera, or immunized BALB/c mouse sera with the crude extract adsorbed to alum. IgE-immunoblot analysis showed mafor IgE-reacting protein band patterns, which reacted with more than 50% of the skin test positive human sera, at 110, 80, 46, 40, 37, 34 and 31 kDa. The reactive band patterns were larely similar between skin test positive humans and immune BALB/c mice. However, the bands of 55, 31, 27, 26, 24 and 23 kDa were found only in sensitized humans, but not in immunized mice.
Egg is an important foods containing many good proteins. But it is well known that egg protein has a lot of allergenicity. The purpose of this study is to develop the methods to reduce the allergenicity of egg. I tried various experimental methods ; For example, heat treatment, irradiation with ultraviolet and microwaves, treatment with polyphosphate, enzyme hydrolysis and PCA inhibition test using guinea pigs and degrees of hydrolysis. The results obtained were as follows ; 1. Heat treatment reduced allergenicity of egg protein. The longer the heat time, the better the effect. 2. Irradiating with ultraviolet and microwave increased both the degree of protein hydrolysis and PCA inhibition reduced the allergenicity. Ultraviolet was more effective than microwaves on egg protein. Fertilized eggs did not reduce allergenicity. 3. Enzyme treatment increased the degree of hydrolysis and PCA inhibition, and reduced allergenicity considerably. Alcalase was more effective than neutrase. 4. Adding polyphosphate did not induced protein hydrolysis, but increased PCA inhibition and reduced allergenicity. 5. The picture of various treatments of egg gel by SEM showed a light surface which indicated that protein was desolved. Neutrase was lighter than alcalase, and the longer the heating time, the lighter the surface became. 6. Measurements of the hardness of egg gel by Instron showed that the longer the reaction time with enzyme, the softer it became.
Kunitz-type soybean trypsin inhibitor (SBTI) and chondroitin sulfate (A, and C type) were conjugated using sodium periodate method. And the physicochemical, pharmacokinetic properties and immunogenecity of the conjugates (Chon-A-SBTI or Chon-C-SBTI) were characterized. We expected the conjugation using chondroitin sulfate to reduce the immunogenecity and to improve the pharmacological effect. As the results, the mean molecular weight of the conjugate highly increased. After I.V. injection of the radiolabeled conjugates or native SBTI into mice, it was found that native SBTI showed rapid elimination from plasma, whereas Chon-A-SBTI and Chon-C-SBTI were slowly eliminated. Organ distribution of the two agents at 30 min after I.V. injection was different : Chon-A-SBTI or Chon-C-SBTI accumulated to a large extent in the liver (13% in Chon-A-SBTI and 16% in Chon-C-SBTI), whereas native SBTI was taken up more rapidly by the kidney (107% dose/g of tissue) and excreated into the urine (26%). In addition we evaluated the therapeutic value of the conjugates by using the sublethal septic shock model caused by pseudomonal elastase and tested the immunogenecity by passive cutaneous anaphylaxis shock (PCA). The conjugates were more effective than native SBTI against pseudomonal elastase induced septic shock in guinea pig. In case of the conjugates, the pharmacological and therapeutic effect lasted over 3 hours long. In immunogenecity test, both of the conjugates showed the reduction of their immunogenecity, especially Chon-A-SBTI looked most effective.
Bamboo salt has been used for the purpose of prevention and treatment of various diseases in Korea. Present study was carried out to ascertain the effects of purple bamboo salt upon anti-allergic effect, anti-inflammatory activity and immune-enhance effect as well. Purple bamboo salt significantly inhibited the ear swelling response and histamine release induced by compound 48/80 in mice and rat peritoneal mast cells. Purple bamboo salt (0.01 ∼ lg/kg) also dose-dependently inhibited the passive cutaneous anaphylaxis by oral administration. Purple bamboo salt (1 mg/mL) in hibited phorbol 12-myristate 13-acetate plus calcium ionophore A23187-stimulated tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, interleukin (IL)-1${\beta}$ and IL-6 secretion, by 67.04${\pm}$0.08%, 68.01${\pm}$1.85%, 69.48${\pm}$0.54%, respectively. In addition, purple bamboo salt inhibited the expression of TNF-${\alpha}$ mRNA in HMC-1 cells. Finally, we investigated the effect of purple bamboo salt in the forced swimming test (FST) and the change of purple bamboo salt-mediated cytokine production from MOLT-4 cells. At the 7th, immobility time was significantly decreased in the purple bamboo salt-administration group (35.4 ${\pm}$5.9 s for 1 g/kg) in comparison with the control group (93.2 ${\pm}$ 15.45). After FST, the content of glucose in the blood serum was increased and the levels of blood urea nitrogen, lactic dehydrogenase was decreased in purple bamboo salt-administration group. However, it had no effect on the elevation of CK and TP level. Purple bamboo salt (1 mg/mL) significantly increased the interferon (IFN)-${\gamma}$ and IL-2 level compared with media control (about 3.7-fold for IFN-${\gamma}$, about 3.5-fold for IL-2, p〈0.05) but did not affect the IL-4.
Non-biting midges fchironomidae, Dipteral are one of the largest insect families, which are distributed worldwidely and are found in nearly all types of inland waters. They are known to be aggressive inhalant allergens which cause allergenic diseases. In this study, the crude antigens of Chironomus SavipLumn adults which are most widely distributed in Korea were extracted. and their allergens were analysed with the sera from experimentally sensitized mice. The mice were immunized with $1{\;}\mu\textrm{g}{\;}or{\;}10{\;}\mu\textrm{g}$ of the crude antigens, respectively, and the specific serum IgE levels were measured by both ELISA and passive cutaneous anaphylaxis (PCA) techniques. The highest levels of both total IgE and chironomid-specific IgE were found in the mouse sera obtained after 9 weeks of the first infection with $1{\;}\mu\textrm{g}$ crude antigen. The crude antigen was separated into 16-18 protein bands on gel by SDS-PAGE. The crude extract was assessed by SDS-PAGE/immunoblot analysis. One IgE-binding band (65 kDa) was detected by developing with colorimetric substrate, and 4 IgE-binding bands (65, 52, 35 and 25 kDa) by developing with CSPD chemiluminescent substrate. The SDS-PAGE gel of the crude extract of chironomid adults was equally cut into 30 pieces and each of them was eluted to isolate proteins by molecular weight, and the allergenicity of each eluate was assessed by applying P-K test on rats. Proteins of 65, 35 and 15 KDa showed the highest P-K titer (${\times}512$) which was 16 times higher than that of the crude extract (${\times32}$). The P-K titer of 52 kDa protein was also 4 times higher ($128{\times}$) than that of the crude extract, whereas the 25 kDa protein poorly responded, which seemed not antigenic. In conclusion, the present result in mice demonstrated that adults of Chironomus fcuiplumus, a predominent species in Korea, cause allergenic diseases and the main allergens are 65, 52, 35 and 15 kDa proteins, of which 65 kDa protein seems to be a main allergen.
It is extremely important to destroy the antigenicity of milk proteins for dietetic treatment of infants with milk allergy. Enzymatic digestion of milk protein is not only effective for destroying antigenicity, but it also is less liable to alter the nutritive value. Bovine casein was hydrolyzed with eight different commercial proteases derived from bacterias or fungi, either individually or in combination to eliminate protein allergenicity. The average molecular weight of casein hyrdolysates determined by size exclusion chromatography is about 550${\sim}$2,300 dalton range. Antigenicity of the casein hyrdolysates was not detected by heterologous passive cutaneous anaphylaxis in guinea pig-rabbit antiserum system. The inhibition test on the enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) showed that the antigenicity of casein hydrolysates is lowed up to 1/8,000 than that of intact bovine casein. As the enzyme reaction was carried out by the combination of bacterial and fungal protease, casein hydrolysates showed much lower bitterness and antigenicity. It suggests that these hydrolysates will be applied to many kinds of foods including the development of hypo-allergenic infant formula.
In order to investigate the lowering effects of in vitro enzymatic hydrolysis by the treatment of chymotrypsin, trypsin, pancreatin, or protease from Aspergillus oryzae on the antigenicity of whey protein(WPI) against rabbit anti ${\beta}-LG$ antiserum, competitive inhibition ELISA(cELISA) and passive cutaneous anaphylaxis(PCA) test using guinea pig were performed. The results of cELISA showed that the monovalent antigenicity of the whey protein hydrolysates(WPH) to the antiserum was decreased to $10^{-1.7}{\sim}10^{-4.1}$ and less by the hydrolysis. Especially, the antigenicity of OUP(hydrolysate by protease from Asp. oryzae with preteatment of pepsin) was found almost to be removed. By the heterologous PCA the polyvalent antigenicity of the WPH was decreased to $1/2{\sim}1/128$ and less. Especially, the polyvalent antigenicity of OUN(hydrolysate by protease from Asp. oryzae without preteatments) was found almost to be removed, although OUN did not have so high degree of hydrolysis(DH) or so low monovalent antigenicity (reduced to $10^{-3.2}$). Therefore, this result was assumed to come from effective destruction of antigenic determinants on ${\beta}-LG$ in WPI, not to produce polyvalent antigenic peptides that are closely associated with induction of allergy. This finding suggested that WPH prepared by the treatment of microorganic protease from Asp. oryzae would be a material for hypoallergenic infant formula due to the removal of the polyvalent antigenicity of ${\beta}-LG$, the major milk allergen in WPI.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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