• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제18권5호
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• pp.997-1003
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• 2008

Viral safety is a prerequisite for manufacturing clinical antihemophilic factor VIII concentrates from human plasma. With particular regard to the hepatitis A virus (HAV), a terminal dry-heat treatment ($100^{\circ}C$ for 30 min) process, following lyophilization, was developed to improve the virus safety of a solvent/detergent-treated antihemophilic factor VIII concentrate. The loss of factor VIII activity during dry-heat treatment was of about 5%. No substantial changes were observed in the physical and biochemical characteristics of the dry-heat-treated factor VIII compared with those of the factor VIII before dry-heat treatment. The dry-heat-treated factor VIII was stable for up to 24 months at $4^{\circ}C$. The dry-heat treatment after lyophilization was an effective process for inactivating viruses. The HAV, murine encephalomyocarditis virus (EMCV), and human immunodeficiency virus (HIV) were completely inactivated to below detectable levels within 10 min of the dry-heat treatment. Bovine herpes virus (BHV) and bovine viral diarrhea virus (BVDV) were potentially sensitive to the treatment. However porcine parvovirus (PPV) was slightly resistant to the treatment. The log reduction factors achieved during lyophilization and dry-heat treatment were ${\geq}5.55$ for HAV, ${\geq}5.87$ for EMCV, ${\geq}5.15$ for HIV, 6.13 for BHV, 4.46 for BVDV, and 1.90 for PPV. These results indicate that dry-heat treatment improves the virus safety of factor VIII concentrates, without destroying the activity. Moreover, the treatment represents an effective measure for the inactivation of non-lipid-enveloped viruses, in particular HAV, which is resistant to solvent/detergent treatment.

• 한국임상수의학회지
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• 제25권6호
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• pp.435-439
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• 2008

We evaluated the patterns of serology and fecal viral shedding for any differences by hemagglutination inhibition (HI) and real-time PCR on Korean CPV-2 isolates (CPV-2a-I, CPV-2a-V and CPV-2b). We successfully detected fecal viral shedding from samples extracted 2-3 d.p.i., regardless of the onset of clinical signs. In addition, the pattern of viral shedding differed depending on the CPV-2 isolates used for inoculation. We also observed differences in the serological pattern that was also depended on the CPV-2 isolates inoculated. The onset and amount of fecal viral shedding were not correlated with the level of antibody titers in this study. Our study is a valuable resource for understanding the different pathobiology of the CPV-2 isolates and the correlation between the patterns of serum antibody titer and fecal viral shedding.

• Journal of Veterinary Science
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• 제23권4호
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• pp.52.1-52.7
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• 2022

This paper reports a presumptive severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) infection in a cat. A cat with respiratory disease living with three individuals with coronavirus disease 2019 showed bilateral ground-glass opacities in the lung on X-ray and computed tomography. The clinical swabs were negative for SARS-CoV-2 RNA, but the serum was positive for SARS-CoV-2 antibodies. Interstitial pneumonia and prominent type 2 pneumocyte hyperplasia were noted on histopathology. Respiratory tissues were negative for SARS-CoV-2 RNA or antigen, but the cat was positive for feline parvovirus DNA. In conclusion, the respiratory disease and associated pathology in this cat could have been due to exposure to SARS-CoV-2.

• Journal of Veterinary Science
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• 제21권2호
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• pp.22.1-22.9
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• 2020

Rabid raccoon dogs (Nyctereutes procyonoides koreensis) have been responsible for animal rabies in South Korea since the 1990s. A recombinant rabies vaccine strain, designated as ERAGS, was constructed for use as a bait vaccine. Therefore, new means of differentiating ERAGS from other rabies virus (RABV) strains will be required in biological manufacturing and diagnostic service centers. In this study, we designed two specific primer sets for differentiation between ERAGS and other RABVs based on mutation in the RABV glycoprotein gene. Polymerase chain reaction analysis of the glycoprotein gene revealed two DNA bands of 383 bp and 583 bp in the ERAGS strain but a single DNA band of 383 bp in the field strains. The detection limits of multiplex reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) were 80 and 8 FAID₅₀/reaction for the ERAGS and Evelyn-Rokitnicki-Abelseth strains, respectively. No cross-reactions were detected in the non-RABV reference viruses, including canine distemper virus, parvovirus, canine adenovirus type 1 and 2, and parainfluenza virus. The results of multiplex RT-PCR were 100% consistent with those of the fluorescent antibody test. Therefore, one-step multiplex RT-PCR is likely useful for differentiation between RABVs with and those without mutation at position 333 of the RABV glycoprotein gene.

• 한국수산과학회지
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• 제56권1호
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• pp.133-139
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• 2023

The advantage of biofloc technology (BFT) in aquaculture is in the prevention of pathogenic transmission. In this study, we performed an investigation on viral, bacterial, and microsporidian parasite infections targeting a total of 194 whiteleg shrimp Litopenaeus vannamei reared in seven BFT-farms on the west coast of Korea in 2021. Hepatopancreatic and cuticular epithelium and pereiopods tissues of shrimp were tested for the four pathogens, Enterocytozoon hepatopenaei (EHP), Vibrio parahaemolyticus causing Acute Hepatopancreatic necrosis disease (VP_AHPND), white spot syndrome virus (WSSV), and hepatopancreatic parvovirus (HPV). The microsporidian parasite EHP was detected in the hepatopancreatic tissue of BFT whiteleg shrimp in the Ganghwa region, whereas no other pathogenic bacteria or virus was detected on the shrimp in the seven BFT-farms. As a result of bacterial flora in the rearing water of BFT whiteleg shrimp using DNA microbiome technology, V. chemaguriensis and V. alfacsensis were contained at 0.05% and 0.01%, respectively, but no VP_AHPND was detected. These findings will serve as a basis for supporting safe BFT-aquaculture of whiteleg shrimp.

• 미생물학회지
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• 제48권4호
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• pp.314-318
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• 2012

세포치료제 또는 조직공학제제에 사용되는 동물 유래 콜라겐은 원료물질 유래 바이러스가 오염될 가능성이 있기 때문에 생산과정 중 바이러스가 오염되지 않도록 하여야 한다. 이를 위해 콜라겐 생산공정은 오염될 가능성이 있는 바이러스들을 불활화 하거나 제거하는 과정을 포함하여야 하며, 바이러스 불활화/제거 능력은 제품의 안전성을 보증하는 중요한 지표로 사용된다. 본 연구의 목적은 소 가죽을 원료로 하여 type I 콜라겐을 생산하는 공정에서 소 유래 바이러스들의 불활화/제거 효능을 평가하는 데 있다. 이를 위해 70% 에탄올 처리 공정과 펩신 처리 공정(pH 2)에서 바이러스 불활화 효과를 평가하였다. 바이러스 불활화 효과 평가를 위해 bovine herpes virus (BHV), bovine viral diarrhoea virus (BVDV), bovine parainfluenza 3 virus (BPIV-3), bovine parvovirus (BPV)를 모델 바이러스로 선정하였다. 바이러스 불활화를 위해 24시간 동안 70% 에탄올을 처리하는 공정에서 BHV, BVDV, BPIV-3, BPV 모두 처리 1시간 안에 검출 한계 이하로 불활화되었으며, 바이러스 로그 감소 값은 각각 ${\geq}5.58$, ${\geq}5.32$, ${\geq}5.11$, ${\geq}3.42$이었다. 또한 소 조직으로부터 콜라겐을 추출하기 위한 14일간의 펩신 처리 공정에서 BHV, BVDV, BPIV-3, BPV 모두 처리 5일 안에 검출한계 이하로 불활화되었으며, 바이러스 로그 감소 값은 각각 ${\geq}7.08$, ${\geq}6.60$, ${\geq}5.60$, ${\geq}3.59$이었다. 두 공정에서 BHV, BVDV, BPIV-3, BPV의 누적 바이러스 로그 감소 값은 각각 ${\geq}12.66$, ${\geq}11.92$, ${\geq}10.71$, ${\geq}7.01$이었다. 이상의 결과에 의하면, 소 가죽 유래 type I 콜라겐제조공정은 바이러스 안전성 보증을 위한 충분한 바이러스 불활화 능력을 가지고 있는 것으로 판단된다.

• 미생물학회지
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• 제52권2호
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• pp.140-147
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• 2016

동물유래성분을 원재료로 사용하는 의료기기는 원료물질 유래 바이러스가 오염될 가능성이 있기 때문에 생산과정 중 바이러스가 오염되지 않도록 하여야 한다. 또한 생산공정은 오염될 가능성이 있는 바이러스들을 불활화하거나 제거하는 공정을 포함하여야 한다. 본 연구를 통해 돼지유래 이종골을 원재료로 사용한 바이러스 안전성이 보증된 치과용 골이식재(THE Graft$^{(R)}$) 제조공정을 개발하였다. THE Graft$^{(R)}$ 제조공정은 30% 과산화수소수와 80% 에탄올을 각각 처리하여 지방을 제거하는 공정과 $1,300^{\circ}C$ 열처리 공정을 통해 콜라겐과 유기물을 제거하는 공정을 포함한다. 또한 최종적으로 생산된 hydroxyapatite 성분의 골이식재에 25 kGy의 감마선을 조사하여 감염성 위해인자를 불활화하는 공정을 포함한다. THE Graft$^{(R)}$의 형태학적 특성을 소유래 hydroxyapatite 성분의 골이식재인 Bio-Oss와 SEM과 TEM을 이용하여 비교한 결과 구조적 특성이 유사함을 확인하였다. $1,300^{\circ}C$ 열처리 공정과 25 kGy 감마선 조사 공정의 바이러스 불활화 효과를 평가하기 위해 transmissible gastroenteritis virus (TGEV), pseudorabies virus (PRV), porcine rotavirus (PRoV), porcine parvovirus (PPV)를 모델 바이러스로 선정하였다. $1,300^{\circ}C$ 열처리 공정에서 TGEV, PRV, PRoV, PPV 모두 검출한계 이하로 불활화되었으며, 바이러스 로그 감소 값은 각각 ${\geq}4.65$, ${\geq}5.81$, ${\geq}6.28$, ${\geq}5.21$이었다. 또한 감마선 조사 공정에서도 TGEV, PRV, PRoV, PPV 모두 검출한계 이하로 불활화되었으며, 바이러스 로그 감소 값은 각각 ${\geq}4.65$, ${\geq}5.87$, ${\geq}6.05$, ${\geq}4.89$이었다. 두 공정에서 TGEV, PRV, PRoV, PPV의 누적 바이러스 로그 감소 값은 각각 ${\geq}9.30$, ${\geq}11.68$, ${\geq}12.33$, ${\geq}10.10$이었다. 이상의 결과에 의하면, THE Graft$^{(R)}$ 제조공정은 바이러스 안전성 보증을 위한 충분한 바이러스 불활화 능력을 가지고 있는 것으로 판단된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제38권2호
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• pp.168-176
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• 2010

사체 피부에서 면역반응을 일으킬 수 있는 세포들을 제거한 무세포 진피는 다양한 의료용 소재로 사용되고 있다. Trin-butyl phospahate(TnBP)와 deoxycholic acids를 세포제거 용액으로 사용하여 피부조직 내 진피층의 3차원적 구조를 손상시키지 않고 다양한 구조 단백질 및 성분들을 유지한 상태에서 면역반응의 대상인 세포성 항원만을 선별적으로 제거한 이식용 동종 무세포 진피인 $SureDerm^{TM}$을 개발하였다. $SureDerm^{TM}$ 제조공정은 감염성 위해인자 불활화 공정으로 70% 에탄올 처리와 산화에틸렌 가스 처리 공정을 포함하고 있다. 본 연구에서는 SureDermTM 제조공정 중 70% 에탄올 소독 공정, 세포제거용액(0.1% TnBP와 2% deoxycholic acids) 처리 공정, 산화에틸렌 가스 멸균의 바이러스 불활화 효과를 검증하기 위해 국제적 가이드에 따라 5종의 바이러스 [human immunodeficiency virus type 1(HIV-1), bovine herpes virus(BHV), Bovine viral diarrhoea virus(BVDV), hepatitis A virus(HAV), porcine parvovirus(PPV)]를 생물학적 지표로 사용하였다. 피부조직에 각 생물학적 지표를 첨가한 후 불활화 공정을 실시한 다음 각 바이러스를 회수하여 정량한 후 불활화 정도를 비교하였다. 70% 에탄올 20분처리 공정에서 HIV-1, BHV, BVDV 같은 외피 바이러스는 처리 시간 2.5분 안에 불활화되었지만, HAV와 PPV 같은 비-외피 바이러스는 에탄올에 저항성을 나타내어 20분 처리 후 log 바이러스 감소인수가 각각 1.85와 1.15였다. 세포제거용액 처리 공정에서 HIV-1, BHV, BVDV는 각각 5분, 30분, 5분 안에 검출한계 이하로 불활화되었다. 산화에틸렌 가스처리에 의해 본 연구에 사용한 모든 바이러스가 검출한계 이하로 불활화되었다. 3가지 공정에서 HIV-1, BHV, BVDV, HAV, PPV에 대한 log 바이러스 감소인수 합은 각각 $\geq12.71$, $\geq18.08$, $\geq14.92$, $\geq6.57$, $\geq7.18$이었다. 이와 같은 결과에서 $SureDerm^{TM}$ 제조공정은 바이러스 안전성을 보증할 수 있는 충분한 바이러스 불활화 능력을 갖고 있는 것으로 판단된다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제11권4호
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• pp.619-627
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• 2001

n order to increase the virus safety of a human intravenous immunoglobulin (IVIg) that was manufactured by a successive process of cold ethanol fractionation, polyethylene glycol precipitation, and pasteurization ($60^{\circ}C$ heat treatment for 10h), a low pH incubation process (pH 3.9 at $25{\circ}C$ for 14 days) was employed as the final step. The efficacy and mechanism of the fraction III cold ethanol fractionation, pasteurization, and low pH treatment steps in the removal and/or inactivation of blood-borne viruses were closely examined. A variety of experimental model viruses for human pathogenic viruses, including the Bovine herpes virus (BHV), Bovine viral diarrhoea virus (BVDV), Murine encephalomyocarditis virus (EMCV), and Porcine parvovirus (PPV), were selected for this study. The mechanism of reduction for the enveloped viruses (BHV and BVDV) during fraction III fractionation was both inactivation and partitioning, however, it was partitioning in the case of the nonenveloped viruses (EMCV and PPV). The log reduction factors achieved during fraction III fractionation were ${\geqq}$6.7 for BHV, ${\geqq}4.7$ for BVDV, 4.5 for EMCV, and 4.4 for PPV. Pasteurization was found to be a robust and effective step in inactivating all the viruses tested. The log reduction factors achieved during the pasteurization process were ${\geqq}7.5$ for BHV, ${\geqq}4.8$ for BVDV, 3.0 for EMCV, and 3.3 for PPV. A low pH incubation was very effective in inactivating the enveloped viruses as well as EMCV. The log reduction factors achieved during low pH incubation were ${\geqq}7.4$ for BHV, ${\geqq}3.9$ for BVDV, 5.2 for EMCV, and 2.0 for PPV. These results indicate that the low pH treatment successfully improved the viral safety of the final products.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제18권4호
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• pp.183-188
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• 2003

식중독 원인균인 S. aureus, E. coli O157:H7, S. typhimurium, S. enteritidis, L. monocytogenes, 장티프스 원인균 S. typhi, 패혈증 원인균 V. parahaemolyticus, 세균성 이질 원인균 S. sonnei를 $20^{\circ}C$에서 30분간 $그리존^{TM}$과 접촉시킨 결과 최소 3배 희석액부터 최대 24배 희석액에서 최대 24배 희석액에서 균에 대한 살멸 효과를 나타내었다. $그리존^{TM}$ 3배 희석액을 이용하여 30초, 1분, 5분간 균과 접촉시킨 결과 S. aureus만 제외하고 모두 30초에 100% 살멸하는 효과를 나타내었다. $그리존^{TM}$을 이용하여 사스의 원인체와 동일한 바이러스인 코로나 바이러스에 대한 살바이러스 효과를 본 결과 제품의ㅣ 5배 희석액까지 유효간 살바이러스 효과를 보였다. 사람과 접촉이 많은 애완견 바이러스인 파보바이러스 (CPV), 디스템퍼바이러스 (CDV)에 대하여 시험한 결과 유기물과 경수 등의 악조건에서도 바이러스를 살멸하는 효과를 나타내었다. $그리존^{TM}$을 이용한 회와 냉장육 등에서의 적용 시험결과 미생물 생육이 현저히 저해됨을 알 수 있었다. 체소내의 미생물에 대한 살멸효과 시험에서도 미생물의 수가 현저하게 감소하였고, 특히 대장균의 수가 현저하게 감소하였다. $그리존^{TM}$은 세균, 바이러스의 살멸에 탁원한 효과를 보이며, 음식물에 직접 처리할 시에도 그 안전성과 효능이 입증되었다.