• 미생물학회지
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• 제31권1호
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• pp.44-47
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• 1993

A replication initiation gene was identified and its nucleotide sequence has been determined from a 3.8 kb, chloramphenicol acethyltransferase conferring R-plasmid pSBK203 of Staphylococcus aures. Location of the replication related region of pSBK 203 was determined by interuption with pUC 119 at XBaI and MspI sites which resulted in inactivation of replication in Bacilius subtilis. Base sequence of this region revealed on open reading frame of 942 base pairs, which encoded a 314 amino acid protein. Base sequence homology with other rep of pT181 family plasmids such as pT181, pC221, pC223, pS194, pU112, and pCW7 was ranged from 78% to 97% and the predicted amino acid sequence homology was from 72% to 95%.

• 미생물학회지
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• 제25권4호
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• pp.262-273
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• 1987

pBR 322와 pBD9을 이용하여 Staphylococcus aureus에서 분리된 chloramphenicol 저항성(Cmr) plasmid인 pSBK 203상의 ori 부위를 cloning하였다. 또한 E. coli 내에서도 발현하는 pSBK 203상의 Cm 저항성 부위 및 cloning 된 ori 부위를 pBR 322에 재조합시켜 E. coli와 그람양성균인 Bacillus subtilis 양쪽 모두에서 복제되고 또 항생물질에 대한 저항성도 각각 발현되는 shuttle vector 구성을 시도하였다.

• 미생물학회지
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• 제32권3호
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• pp.186-191
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• 1994

Staphylococcus aureus로부터 분리한 R-plasmid pSBK203의 복제개시 단백질인 Rep의 작용부위인 ori 및 dsDNA로의 전환을 위해 요구되는 minus origin부위를 밝히고자 시도하였다. Escherichia coli vecotr를 이용하여 pSBK203의 복제관련 부위를 최소한도로 포함하는 재조합 E.coli-Bacillus subtilis shuttle vector를 구성, 분리하고 여기에 포함된 pSBK203부위의 염기 서열을 분석함으로써 ori를 확인하였다. pSBK203의 복제개시 부위 ori는 rep의 구조 유전자 ORF내에서 약 50bp의 크기로 발견되었으며 지금까지 알려진 staphylococcal plasmid들중에서 pT181족 plasmid들의 ori와 높은 상동성을 갖는 것으로 분석되었다. 복제 과정에서 ssDNA로 먼저 만들어진 (+)쇄가 dsDNA로 전환되기 위해 필요한 신호로 작용하는 것으로 알려저 있는 minus origin (M-O)인 긴 palindrome 구조, 즉 pal 부위가 rep 우전자의 상류에서 2개 연이어 존재하는 것이 발견되었다. 이중에서 pOX6, pC194, 및 pE194 등과 같은 다른 staphylococcal plasmid들의 pal 부위와 비교적 높은 상동성을 갖는 paLA 는 plasmid 유지에 별 영향을 미치지 못하는 반면 다른 plasmid에서 유사 서열이 보고되지 않은 palA는 plasmid 유지에 필수적이라는 사실이 밝혀졌다.

• 미생물학회지
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• 제27권3호
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• pp.194-200
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• 1989

S. aureus에서 분리된 plasmid pSBK203 상의 CAT 유전자 염기서열을 결정하였으며 유발성 발현현상이 확인되었다. 염기서열 결과에 의해 예측된 단백질의 아미노산 서열 분석결고 pC221-CAT 와는 78%의 가장 높은 상동성을 나타냈으며 pC194-CAT와는 55%, 그람음성균 유래의 CAT 중 하나인 Tn9-CATdhkss 38%의 상동성을 각각 보여주고 있었다.

• 미생물학회지
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• 제32권2호
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• pp.115-119
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• 1994

Staphylococcus aureus DH1에서 분리된 R-plasmid pSBK203상의 복제개시 인자인 rep 유전자산물의 발현이 어떻게 조절되는가를 밝히기 위해 관련 부위를 확인하고 cloning한 후 그 염기서열을 결정하였으며 이를 같은 계열에 속하는 pT181족 plasmid들의 서열과 그 상동성을 비교 분석하였다. 복제 조절 관련 부위에 염기 삽입 및 염기 결손을 유도함으로써 얻어진 변이체들의 copy수를 측정하여 그 복제 조절 기능에 초래된 변화를 확인하였다.

• 미생물학회지
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• 제23권4호
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• pp.282-290
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• 1985

Small size antibiotic resistance plasmids having molecular weights less than 10 Mdal were isolated and characterized from ten clinically isolated multiple resistant Staphylococcus aureus. Agarose gel electrophoresis profiles and antibiotic resistance patterns divided these strains into four groups. Strain 2-23-6, the representative strain of a group of five strains conferred two plasmids of molecular weights $1.6{\times}10^6\;dal\;and\;2.0{\times}10^6$ dal. The small plasmid (pSBK 112) specified macrolides, lincosamides and streptogramin type B (MLS) resistance gene which are expressed constitutively. Lage plasmid (pSBK 125) specified chloramphenicol resistance gene which is inducible. Strain 10-5 conferred a $3.0{\times}10^6$ dal plasmid (pSBK 141) which carry an inducible ampicillin resistance gene and strain P-H-2 conferred and $1.6{\times}10^6$ dal plasmid (pSBK 190) which carry a constitutive MLS resistance gene. Strain D-H-1 conferred four plasmids of molecular weights $0.8{\times}10^6$ dal (pSBK 201), $1.6{\times}10^6$ dal (pSBK 202), $2.5{\times}10^6$ dal (pSBK 203), and $1.2{\times}10^7$ dal (pDBK 204), respectively. Among those four plasmids, only pSBK 203 specified chloramphenicol resistance gene. Curing of constitutive MLS resistance using acriding orange or ethidium bromide in 2-23-6 and P-H-2 strains produced 'inducible' MLS resistance strains which are less resistant to MLS than the wild type strains, suggesting that there are two resistance genes in both strains; one is constitutive and the other is inducible.

• 미생물학회지
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• 제24권4호
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• pp.341-351
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• 1986

항생제에 대하여 다중 저항성을 갖는 Shaphylococcus aµreus D-H-1으로부터 chloram phenicol(Cm) 저항성 유전자를 가진것으로 확인된 R-plasmid(pSBK203, 2.5MdaJ.)를 분리하여 Bacillus subtilis BD 170 내에셔 발현시켰으며 이 Cm 저항성 유전자를 cloning하기 위하여 pSBK203상의 제한효소 인식부위를 결정하였다. pSBK203 상의 TaqI 부분 절편 0.3 kb을 pBD9 CZaI 인식부위내에 삽입하여 얻은 재조합 plasmid(pTQ16)와 TaqI부 분절편과 O.lkb 엇갈럼이 있는 RsaI 단일절떤(1. 3 kb} pBR322의 Seal 인식부위에 삽입하여 얻은 재조합 p plasmid(pHW20)에서 Cm 저항성이 획득되었다. pBD9 및 pBR322 상에 삽입된 두 절펀내에 Hinf, Taq I 빛 BglII의 제한효소 인식부위가 존재하였으며 이들 중 행III 인식부위에 의하여 Cm 저항성이 불활성 되었다.

• 한국동물학회:학술대회논문집
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• 한국동물학회 1996년도 한국생물과학협회 국제학술대회
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• pp.234.2-234
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• 1996

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• 한국동물학회:학술대회논문집
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• 한국동물학회 1998년도 한국생물과학협회 학술발표대회
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• pp.336.2-336
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• 1998

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