• 한국양식학회지
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• 제10권1호
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• pp.33-37
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• 1997

미꾸라지를 대상으로 어류 유전자 이식을 위한 유용 model system으로 개발하기 위한 연구의 일환으로 잉어의$\beta$-actin 유전자의 promoter와 CAT 유전자가 융합되어 있는 외래 유전자 (pFV4CAT)를 미꾸라지에 이식, transgenic founder 미꾸라지를 생산하였다. PCR 분석결과, 이식된 외래 유전자는 부화 후 9개월된 성어에서 7.4-37.0%의 빈도로 존재하였으며 Southern blot 분석에 의해서 염색체 상의 삽입 가능성을 나타내었다. In situ immunohistochemical analysis 결과 이식된 외래 유전자는 미꾸라지 세포내에서 비교적 높은 빈도로 발현하였으며 그 발현 양상은 개체마다 다양하게 나타났다.

• 한국양식학회지
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• 제10권4호
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• pp.409-415
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• 1997

The carp $\beta$-actin regulatory sequences and RSV/LTR promoter were tested whether they are functinal to express linked structure gene (chloramphenicol acetyltransferas, CAT) in olive flounder (Paralichthys olivaceus) by determining the patterns of gene expression following intramuscular in vivo direct injection. The injection experiments with various concentrations of both pRSVCAT and pFV4CAT clearly revealed the effectiveness of DNA dosage on expression of CAT. The increase of CAT activity was linear in both plasmids, and maximal CAT activity was obtained with 100 ug of pFV4CAT injection. The amounts of CAT expression with pFV4CAT-injected fist were higher than those with pRSVCAT-injected fish. CAT activity was readily detectable as early as one day after injection, slightly increased at day 2, and declined over time. Most amount of DNA intramuscularly injected into olive flounder muscles persisted extrachromosomally without showing any integrated or replicated form in vivo.

• 한국어류학회지
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• 제9권1호
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• pp.91-98
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• 1997

외래유전자, pFV4CAT이 이식된 transgenic 미꾸라지 계통 F1 및 F2를 대상으로 조직별 외래 유전자의 발현을 조사하였다. Transgenic F1에서 pFV4CAT의 mRNA 합성 여부를 조사하기 위해 정소(testis), 간(liver), 근육(muscle), 비장(spleen) 및 심장(heart) 조직을 RT-PCR로 분석한 결과, 조직별 mRNA 존재 여부는 F1 계통간 큰 차이를 나타내었으며, 다른 조직들에 비해 간(liver)과 비장(spleen)에서 보다 빈번히 발현하는 경향을 나타내었다. 외래 유전자에 의해 합성된 CAT 단백질을 ELISA로 정량화한 결과, 조직별 및 transgenic 계통별 다양한 차이가 있었으며, 다른 조직에 비해 근육과 심장에서 가장 높은 수준으로 발현하는 것으로 나타나 F1 한 계통의 근육에서, 대조군 수치의 최고 68배에 해당하는 CAT 발현이 관찰되였다. 반면 정소에서 가장 낮은 외래 유전자의 발현이 모든 transgenic line에서 관찰되었다.