젖소 난소 황체에 있어서 중심강의 유무에 따른 황체 조직 중의 total protein, DNA 및 RNA 함량을 조사하여 중심강이 있는 황체와 중심강이 없는 황체간의 기능성을 구명하고자 수행한 시험에서 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 중심강이 없는 황체의 total, supernatant 및 Pellt protein의 함량은 각각 32.83, 16.87 및 15.96 mg/g wet tissue이었고, 중심강이 있는 황체의 그것들은 각각 29.62, 16.10 및 13.52 mg/g wet tissue으로서 중심강이 없는 황체와 중심강이 있는 황체간에 유의적인 차이를 나타내지 않았다(p〉0.05). 2. DNA 함량은 중심강이 없는 황체가 1.99mg/g wet tissue이었고 중심 강이 있는 황체가 1.32mg/g wet tissue으로 중심강이 없는 황체와 있는 황체간에 유의적인 차이(p<0.05)를 나타내었다. Protein : DNA ratios에 있어서도 중심강이 없는 황체가 16.63mg/g wet tissue이었고 중심강이 있는 황체가 22.99mg/g wet tissue으로 중심강이 없는 황체와 중심강이 있는 황체간에 유의적인 차이(p<0.05)를 나타내었다. 3. 중심강이 없는 황체의 RNA함량, Protein: RNA 및 RNA:DNA ratios는 각각 2.87, 12.24및 1.43mg/g wet tissue이었고, 중심강이 있는 황체의 그것들은 각각 2.47, 13.73 및 1.89mg/g wet tissue으로서 중심강이 없는 황체와 중심강이 있는 황체간에 유의적인 차이를 나타내지 않았다(p〉0.05).
Park Sang Joong;Ryu Kang;Suh Chang Woo;Chai Young Gyu;Kwon Oh Byung;Park Seung Kook;Lee Eun Kyu
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제7권1호
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pp.1-5
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2002
A fusion protein, consisting of a human epidermal growth factor (hEGF) as the recognition domain and human angiogenin as the toxin domain, can be used as a targeted therapeutic against breast cancer cells among others. The fusion protein was expressed as inclusion body in recombinant E. coli, and when the conventional, solution-phase refolding process was used the refolding yield was very low due to severe aggregation. It was probably because of the opposite electric charge at a neutral pH resulting from the vastly different pI values of each domain. The solid-phase refolding process that exploited the ionic interactions between ionic exchanger surface and the fusion protein was tried, but the adsorption yield was also very low, below $ 30\%$, regardless of the resins and pH conditions used. Therefore, to provide a higher ionic affinity toward the solid matrix, six lysine residues were tagged to the N-terminus of the hEGF domain. When heparin-Sepharose was used as the matrix, the adsorption capacity increased 2.5-3 times to about $88\%$. Besides the intrinsic affinity of angiogenin to heparin, the poly-lysine tag provided additional ionic affinity. And the subsequent refolding yield increased nearly 13-fold, from ca. $4.8\%$ in the conventional refolding of the untagged fusion protein to $63.6\%$. The process was highly reproducible. The refolded protein in the column eluate retained RNase bioactivity of angiogenin.
Terramoccia, S.;Bartocci, A.;Giovanni, S. Di;Bartocci, S.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제25권3호
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pp.335-340
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2012
The data used came from two trials undertaken under the same climatic conditions (spring-summer). In both trials pluriparious buffaloes were utilized similar in weight, body condition score, and milk production from the previous year. From the first trial the data used was from the sub-period 23-88 DIM provided by seven animals fed ad libitum with diet A (6.69 MJ/kg DM; 158.30 g/kg of crude protein) with a forage/concentrate ratio of 48/52. From the second trial the data used was from the sub-period 33-90 DIM provided by seven animals fed ad libitum with diet B (6.63 MJ/kg DM; 179.50 g/kg of crude protein) and by seven animals fed ad libitum with diet C (5.99 MJ/kg DM; 155.40 g/kg of crude protein), each of the diets had the same forage/concentrate ratio (53/47). A significant difference was found in milk production between group B and C (13.08 vs. 11.56 kg/d, p<0.05), an intermediate production (12.10 kg/d) was noted in group A. A significant difference was found between fat (76.58 vs. 69.24 g/kg, p<0.05), protein (46.14 vs. 43.16 g/kg, p<0.05) and casein (39.94 vs. 34.98 g/kg, p<0.05) of the milk of group B with respect to group A. The milk of group C gave fat values (71.80 g/kg), protein (45.52 g/kg) and casein (39.06 g/kg) statistically equal to those of group B. The milk of groups B and C, in respect to the milk of group A, gave values of $K_{20}$ (1.77, 1.82 vs. 3.68 min, p<0.05), statistically lower and values of $A_{30}$ (48.28, 47.27 vs. 40.64 mm, p<0.05) statistically higher. Two simple linear regressions were calculated where the independent variable (x) was the daily standardized milk production, the dependent variable (y) or the daily intake of net energy or crude protein. Equation 1) NE (MJ/d) = 74.4049+2.8308${\times}$kg of normalized milk; equation 2) CP (kg/d) = 1.4507+0.1085${\times}$kg of normalized milk, both the equations were significant (p<0.05) with determination coefficients of 0.58 and 0.50 respectively. For a production of normalized milk that varies from 9 to 13 kg, the respective energy-protein concentrations fluctuate from 6.09 to 6.78 MJ/kg DM and from 148.00 to 174.46 g/kg DM.
The alkaline invertase ($\beta$-D-fructofuranoside fructohydrolase, EC 3.2.1.26) was isolated and characterized from the hypocotyls of mung bean (Phaseolus radiatus L.). The enzyme was purified by consecutive step using diethylaminoethyl (DEAE)-cellulose anion exchange, 1st Sephadex G-200, DEAE-Sephadex A50 and 2nd Sephadex G-200 chromatography. The overall purification was about 77-fold with a yield of about 6%. The finally purified enzyme exhibited a specific activity of about 48 $\mu$mol of glucose produced mg-1 protein min-1 at pH 7.0 and appeared to be a single protein by nondenaturing polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE). The enzyme had the native molecular weight of 450 kD and subunits molecular weight of 63 kD and 38 kD as estimated by Sephadex G-200 chromatography and SDS-PAGE, respectively, suggesting that the enzyme is a heteromultimeric protein composed of two types of subunits. On the other hand, the enzyme appeared to be not a glycoprotein according to the results of Con A chromatography and glycoprotein staining. The enzyme had a Km for sucrose of 19.7 mM at pH 7.0 and maximum activity around pH 7.5. The enzyme was most active with sucrose as substrate, compared to raffinose, cellobiose, maltose and lactose. These results indicate the alkaline invertase is a $\beta$-fructofuranosidase.
This study investigated the influence of anthropometric data and nutrient intake on bone mineral density(BMD) and biochemical markers of bone metabolism The mean age of 21 premenopausal women were 47.0 years and that of 41 postmenopausal women whose menopausal age was 49.46 years were 60.56 years. The waist and WHR of postmenopausal women were significantly higher than those of premenopausal ones. The animal protein intake of premenopausal and postmenopausal women were 38.5 and 21.03 g which comprised 54.35 and $31.84\%$ of total protein intake, respectively. The calcium intake of premenopausal and postmenopausal women were 446.45 and 546.97mg which was 63.78 and $78.14\%$ of Korean RDA, respectively. The ALP(Alkaline phosphatase) of premenopausal women was 65.81 U/L, which was significantly lower than that(90.24 U/L) of postmenopausal women (p<0.01). BMD of lumbar spine of premenopausal women was correlated significantly with body weight(r=0.690, p<0.01), waist(r=0.682, p<0.01), WHR(r=0.672, p<0.01), BMI(r=0.559, p<0.01), and body fat(r=0.457, p<0.01). Urinary Ca/creatinine ratio of the premenopausal women was negatively correlated with plant protein(r=-0.529, p<0.05) and plant calcium(r=-0.579, p<0.05). BMD of lumbar spine of postmenopausal women showed positive correlation with lean body mass(r=0.469, p<0.01) and body weight(r=0.383, p<0.05). Urinary Ca/creatinine ratio for the postmenopausal women was positively correlated with ALP(r=0.404, p<0.01) and urinary Na/creatinine ratio(r=0.389, p<0.05). In conclusion, it is necessary to maintain adequate body weight and to increase calcium intake for the premenopausal women. It is also important to increase muscle mass and reduce salt intake for the postmenopausal women.
Heidari Aliehsan;Keshavarz Hossein;Rokni Mohammad B.;Jelinek Tomas
Parasites, Hosts and Diseases
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제45권1호
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pp.59-63
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2007
Merozoite surface protein-1(MSP-1) and merozoite surface protein-2(MSP-2) were used to develop vaccines and to investigate the genetic diversity in Plasmodium falciparum malaria in Iran. Nested polymerase chain reaction amplification was used to determine polymorph isms of block 2 of the MSP-1 and the central domain of MSP-2 genes. A total of 67 microscopically positive P. falciparum infected individuals from a major endemic region, southeast Iran, were included in this trial. Nine alleles of MSP-1 and 11 alleles of MSP-2 were identified. The results showed that amplified product from these surface antigen genes varied in size and there was specific pattern for each isolate. Besides, regarding this pattern, 23 multiple infections with at least 2 alleles were observed. While the endemic regions of malaria in Iran is classified in low to moderate group, but extensive polymorphism was observed for each marker and the MSP-2 central repeat was the most diverse that could be considered in designing malaria vaccine.
In the present study, whispovirus immediate early 1 promoter (ie-1) was used to initiate surface expression of the hemagglutinin (HA) protein of Egyptian H5N1 avian influenza virus (AIV) by using the baculovirus expression vector system. The HA gene and whispovirus ie-1 promoter sequence were synthesized as a fused expression cassette (ie1-HA) and successfully cloned into the pFastBac-1 transfer vector. The recombinant vector was transformed into DH10Bac competent cells, and the recombinant bacmid was generated via site-specific transposition. The recombinant bacmid was used for transfection of Spodoptera frugiperda (Sf-9) insect cells to construct the recombinant baculovirus and to induce expression of the HA protein of H5N1 AIV. The recombinant glycoprotein expressed in Sf-9 cells showed hemadsorption activity. Hemagglutination activity was also detected in both extra- and intracellular recombinant HAs. Both the HA and hemadsorption activities were inhibited by reference polyclonal anti-H5 sera. Significant expression of the recombinant protein was observed on the surface of infected insect cells by using immunofluorescence. SDS-PAGE analysis of the expressed protein revealed the presence of a visually distinguishable band of ~63 kDa in size, which was absent in the non-infected cell control. Western blot analysis confirmed that the distinct 63 kDa band corresponded to the recombinant HA glycoprotein of H5N1 AIV. This study reports the successful expression of the HA protein of H5N1 AIV. The expressed protein was displayed on the plasma membrane of infected insect cells under the control of whispovirus ie-1 promoter by using the baculovirus expression vector system.
본 연구는 피혁 폐기물로부터 크롬 이온을 분리한 상태로 Collagen을 추출할 수 있는 최적 조건에 관한 것이다. Collagen 추출에 있어 온도, pH, 그리고 알칼리 용액 농도의 영향을 실험했다. 실험결과 점도측정에 의해 초기 변성온도는 $25^{\circ}C$, 완전 변성온도는 $31.5^{\circ}C$였다. Collagen 추출의 최적조건은 가용화 온도 $15^{\circ}C{\sim}20^{\circ}C$, pH 1.5, 알칼리 용액 3%였다. PH 1.5에서 크롬 이온이 거의 분리되었다. 탄닌 폐기물로부터 크롬 이온의 분리효율은 99.5% 이상이었다. 피혁 폐기물로부터 조단백질의 추출율은 89.%이었다. 추출된 조단백질내에 hydroxyprolne과 collagen의 함량은 각각 8.53%, 63.62%였다.
Lee, K.U.;Boyd, R.D.;Austic, R.E.;Ross, D.A.;Han, In K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제11권6호
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pp.725-731
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1998
Nine crossbred female pigs fitted with the bladder catheters were used to investigate the effects of dietary protein form on the efficiency of absorbed nitrogen for nitrogen retention in growing pigs. Combinations of the main protein sources were corn-soybean meal (CSM; slow + slow absorption rate form), corn-hydrolyzed casein (CAS; slow + rapid absorption rate form) and corn-porcine plasma (CPL; slow + intermediate absorption rate form). All experimental diets were formulated to be isonitrogenous (CP 11%) and isocaloric (3.5 Mcal/kg) and synthetic amino acids were added to the diet as required to maintain an equivalent amino acid profile among diets. Fecal digestibility of nitrogen was not different among treatments (p > 0.10). Ingested nitrogen was absorbed with an apparent efficiency of 82% to 84%. Mean nitrogen retention in pigs fed the CSM diet was as high as for pigs fed the CPL diet (0.74 g N/kg $BW^{0.75}$ per d), which was higher than the N retention rate in pigs fed CAS diet (0.68 g/kg $BW^{0.75}$ per d; P < 0.05). Apparent biological values (ABV = 100 ${\times}$ N retention/absorbed nitrogen) were 63.3%, 58.0% and 61.6% for CSM, CAS, and CPL groups, respectively (p < 0.05). There was no difference in mean energy digestibility among treatments. The efficiency of absorbed lysine utilization was significantly different among treatments (p < 0.05). Pigs fed the CAS diet were inferior to counterparts on the other diets in utilizing absorbed lysine. The ratios of free (and small peptide-bound) to protein-bound amino acids in CSM diet differed considerably from the CAS diet. This may affect the efficiency of amino acids utilization for nitrogen retention if hydrolyzed and intact amino acid pools reach the blood at different times.
탈지 갈색거저리 유충과 번데기 분말을 A. oryzae 및 B. subtilis 균주를 이용하여 발효추출물을 제조하였다. 그 결과 발효추출물의 단백질 함량은 69.67-86.06% (p<0.001)이며, 액상발효물의 고형분 수율은 37.76-46.88% (p<0.001)로 나타났다. 단백질 분해율은 대두발효물(esS) 58.90%, 갈색거저리유충(esT; 52.62%), 누에번데기(esP; 50.13%) 순으로 나타났으며(p<0.001), 단백질 수율의 경우 47.47-63.02% 이였다(p<0.001). 또한 SDS-PAGE 결과, 발효과정을 거치지 않은 각각의 탈지원물과 비교 시 액상발효물들의 단백질이 저분자로 분해됨을 확인하였다. 액상발효물의 in vitro 소화율을 측정한 결과, 탈지원물(59.60-76.03%)에 비해 발효추출물의 단백질 소화율이 91.02-95.86%로 1.26-1.53배 증가하였다(p<0.001). 액상발효물의 단백질 용해도, 거품형성능, 거품안정성 모두 발효과정을 통해 수치가 증가하는 경향성을 나타났다. 이를 바탕으로 발효공정을 통한 단백질 추출물 공정의 가능성을 확인하였으며, 추후 추출물의 이화학적 특성 및 기능성을 기반으로 새로운 기능성 식품 소재 개발에 기여할 수 있을 것으로 보인다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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