Objectives : US extract is a mixture of each extract of Ulmi cortex and Smilacis rhizoma. In this study, we investigated the antioxidant, anti-inflammatory, antibacterial, and ovoprotective effects of US extract in in vitro model to identify potential candidates for improving female reproductive function. Methods : The antioxidant activity of US extract was measured using 1,1-diphenyl- 2-picrylhydrazyl free radical and superoxide anion radical scavenging assays. The anti-inflammatory effect of US extract on lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 cells were determined with a nitric oxide (NO) assay, enzyme linked immunosorbent assays, and western blots analysis. The antibacterial activity of US extract against vaginitis infection microorganisms were determined with disc diffusion and minimum inhibitory concentration assays. The ovoprotective effect of US extract on 4-vinylcyclohexene diepoxide (VCD)-induced ovotoxicity in CHO-K1 cells were evaluated with a cell viability assay. Result : US extract showed good antioxidant capacity and inhibited LPS-induced NO production as well as iNOS and COX-2 expression and secretion of pro-inflammatory cytokine IL-6 without affecting the cell viability. It showed significant clear zones for Staphylococcus aureus and Candida albicans but did not indicate the clear zones for Escherichia coli and Enterococcus faecium. VCD-induced ovotoxicity in CHO-K1 cells was significantly reduced by US extract pre-treatment. Conclusions : These results demonstrate that US extract has antioxidant activity, anti-inflammatory effects on the LPS-stimulated macrophages, antibacterial activity against vaginitis infection microorganisms, and protective effects on the ovarian cells against VCD-induced ovotoxicity. These findings suggest that the US extract can be used as new prescriptions, supplements, functional foods, and cosmetics for improving female reproductive function.
본 연구의 목적은 예측 불가능한 만성적인 스트레스가 생식기능과 황체형성호르몬 수용체의 발현에 미치는 영향을 알아보는 것이다. 9 주령 암컷 C57BL/6 마우스를 무작위로 선택하여 대조군과 스트레스군의 두 집단으로 분류하였다. 스트레스군은 35일 동안 하루에 두 번씩 12가지의 서로 다른 스트레스를 무작위로 선택하여 스트레스를 주었다. 대조군에 비하여 스트레스군에서 불안과 관련된 행동들이 유의성 있게 증가하였으며(P < 0.05), 스트레스를 받는 동안의 증체율 또한 유의성 있게 감소하였다(P < 0.01). 그리고 평균 산자수도 대조군에 비하여 스트레스 군에서 유의하게 감소함을 관찰 하였다(P < 0.01). 조직학적인 검사에서 일차, 이차 및 초기 성숙 난포의 비율이 대조군에 비해 스트레스 군에서 유의하게 감소한 반면(P < 0.05) 폐쇄 난포의 비율은 유의하게 증가하였다(P < 0.01). 면역조직화학적 검사를 통해 과립막세포와 황체세포의 황체형성호르몬 수용체 발현을 관찰한 결과, 대조군에 비해 스트레스군에서 그 발현이 감소하였고, 웨스턴 블롯을 통해 난소 내 황체형성호르몬 수용체의 단백질 양을 측정한 결과 또한 대조군에 비하여 스트레스군에서 유의하게 감소하였다(P < 0.05). 본 연구를 통해 난소의 황체형성호르몬 수용체는 예측 불가능한 스트레스에 의해 영향을 받으며, 변화된 황체형성호르몬 수용체가 난자의 난포 발육 불량과 생식기능의 이상에 영향을 미친다는 것을 실험적으로 증명하였다.
한국산 맛조개류 중 가장 다산되며, 식용되고 있는 맛조개와 붉은맛을 대상으로 생식세포형성과정, 난경조성변화, 생식년주기, 군성숙도등을 조사하였다. 1. 맛조개와 붉은맛은 자웅이체로서 난생이다. 생식소는 내장낭에서부터 족부의 근육결체섬유층 사이에 수지상 소낭 및 소엽으로 구성 분포하고 있다. 2. 분열증식중인 난원세포는 $10{mu}m$내외의 크기로 핵과 단일인이 뚜렷하고, 초기의 난모세포는 난병을 형성하여 생식상피위에 부착한 채 직접 영양을 흡수하는 한편 부분화간충직과 호산성과립세포들이 성장에 관여하고 있다. 성숙난모세포는 내강내에 유리되며 나오며 완숙난의 크기는 맛조개는 $80{\sim}85{\mu}m$정도이고 붉은맛은 $80{\sim}90{\mu}m$이다. 3. 정소소엽 상피위에는 정원세포, 정모세포, 정세포 및 변태한 정자 순으로 내강을 향하여 층상배열을 하며 성숙발달해 간다. 4. 방난, 방정을 마친 생식소는 퇴화되면서 조직이 완전 해체되어 휴지기상태를 거치고 이듬해 새로 분화된 조직이 재배치 되면서 새로운 성장을 하게된다. 5. 생식소의 발달단계는 분열증식기, 성장기, 성숙기, 방출기, 퇴화 및 휴지기등의 연속적인 연주기로 구분할 수 있었다. 6. 맛조개의 산란기는 다대포산이나 군산산 공히 환경수온이 $20^{\circ}C$ 이상으로 상승하는 6월부터 시작하여 $25^{\circ}C$ 이하인 7월까지 산란이 지속되는데 이들의 주산란기는 다대포산은 6월이고, 군산산은 7월이다. 그리고 붉은맛의 산란기는 $5{\sim}6$월이며 주산란기는 6월이다. 7. 맛조개의 경우, 다대포산이나 군산산맛조개의 군성숙도가 $50\%$를 넘는 개체는 암수 공히 각장이 $5.1{\sim}6.0cm$인 개체들이었으며, 암수 전개체가 방난, 방정하여 재생산에 $100\%$ 참여하는 개체의 크기는 각장이 $7.1{\sim}8.0cm$이상인 개체들이었다.
최근 난포에서 GnRH와 그 수용체의 발현이 확인되면서 GnRH가 국소적으로 난소의 기능을 조절하고,특 히 과립세포의 세포자연사(apoptosis)를 유도하는 것으로 보고되고 있다. 그러나 황체에서 GnRH와 그 수용체의 발현과 기능에 대해서는 잘 알려져 있지 않다. 따라서 본 연구는 임신한 흰쥐의 황체세포에서 GnRH와 그 수용체가 발현되는지를 확인하고, 또한 GnRH가 황체세포의 세포자연사를 직접적으로 유발시킬 수 있는지를 알아보고자 시행하였다. 임신된 흰쥐로부터 황체세포를 획득하여 배양한 후 면역조직화학적 염색과 Western blot 방법으로 GnRH와 그 수용체의 발현을 확인한 결과 배양된 황체세포에서 GnRH와 그 수용체가 강하게 발현되는 것을 관찰할 수 있었다. GnRH가 배양된 황체세포의 세포자연사에 미치는 영향을 조사하기 위하여, $10^{-6}$ GnRH-agonist(GnRH-Ag)를 처리한 후 3, 8, 12시간에 TUNEL 방법과 DNA 분절화 검증 방법으로 세포자연사를 조사하였다. TUNEL 결과 세포자연사를 보이는 황체세포는 처리 후 12 시간에 GnRH-Ag 처리군에서 유의하게 증가하였다(p<0.05). 또한 DNA 분절화를 조사한 결과에서도 TUNEL 결과와 유사하게 GnRH-Ag처리 후 12 시간에 DNA 분절화가 유의하게 증가하였다(p<0.05). 이러한 세포자연사의 증가가 cytochrome c 방출과 연관이 있는지를 알아보고자 미토콘드리아로부터 방출된 cytochrome c를 Western blot 방법으로 정량한 결과, GnRH-Ag 처리 후 12 시간에 cytochrome c가 미토콘드리아로부터 세포질쪽으로 방출된 것을 확인할 수 있었다. 결론적으로 임신된 흰쥐의 황체세포에서 GnRH와 그 수용체 단백질이 발현되며 GnRH-Ag가 GnRH 수용체에 결합함으로써 cytochrome c가 미토콘드리아로부터 방출되고, 이로 인해 황체세포가 세포자연사하는 것을 알 수 있었다. 이러한 결과들은 국소적으로 분비되는 GnRH가 미토콘드리아로부터 cytochrome c의 방출을 유발시켜 황체세포의 세포자연사를 유도할 수 있다는 것을 제시하고 있다.
Park, Min Hee;Jung, In Kyung;Min, Woo-Kie;Choi, Jin Ho;Kim, Gyu Man;Jin, Hee Kyung;Bae, Jae-sung
BMB Reports
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제50권8호
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pp.417-422
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2017
Cisplatin is the most effective and widely used chemotherapeutic agent for many types of cancer. Unfortunately, its clinical use is limited by its adverse effects, notably bone marrow suppression leading to abnormal hematopoiesis. We previously revealed that neuropeptide Y (NPY) is responsible for the maintenance of hematopoietic stem cell (HSC) function by protecting the sympathetic nervous system (SNS) fibers survival from chemotherapy-induced bone marrow impairment. Here, we show the NPY-mediated protective effect against bone marrow dysfunction due to cisplatin in an ovarian cancer mouse model. During chemotherapy, NPY mitigates reduction in HSC abundance and destruction of SNS fibers in the bone marrow without blocking the anticancer efficacy of cisplatin, and it results in the restoration of blood cells and amelioration of sensory neuropathy. Therefore, these results suggest that NPY can be used as a potentially effective agent to improve bone marrow dysfunction during cisplatin-based cancer therapy.
To examine local response of adenosie(purine nucleoside) on the developing mammary gland, Elvax 40P implants containing adenosine were surgically implanted into mammary fat pad of the five week old female ICR mice. Inguinal(the 4th) mammary glands of anesthetized mice were exposed andplaced the implants for 12 days. One gland was treated with an adenosine implant, while the contralateral gland received a blank implant as control. For whole-mount preparations, glands were stained with alum carmine, and for histological observation, micro-selected mammary glands were stained with hematoxylin and eosin Y. Implantation with Elvax 40P did not affect on the damage of neighboring mammary tissue. Adenosie 25 or 250$\mu\textrm{g}$ per slow-release implant stimulated local mammary end bud formation of ovariectomized mice such as end bud size and numbers of end bud per gland in a dose dependent manner(P<0.05), and lower concentration of adenosie(2.5 or 25$\mu\textrm{g}$/implant) increased numbers of end bud(P<0.05) and end bud size(P<0.1) of intact mice. Adenosine treatment and intact ovarian function had moderate interation effects on the stimulation of end bud formation at 2.5$\mu\textrm{g}$ adenosine/implant(P<0.1). In histological observation, adenosine implants increased numbers of mammary epithelial type of cells at mammary duct in the presence or absece ofovary. These results indicate that adenosine should be one of regulators in mouse mammary ductal growth.
Telomerase is a ribonucleoprotein complex whose function is to add telomeric repeats to chromosomal ends. Telomerase consists of two essential components, telomerase RNA template (hTR) and catalytic subunit (hTERT). hTERT is expressed only in cells and tissues positive for telomerase activity, i.e., tumor and fetal cells. In this report, the possibility of utilization of the hTERT promoter in targeted cancer gene therapy was tested. The hTERT promoter was cloned in the replacement of the CMV promoter, and the HSV-TK gene was subcloned to be controlled by the hTERT gene promoter in the adenovirus shuttle plasmid. Then, the recombinant adenovirus Ad-hT-TK was constructed and was infected into normal and human gynecological cancer cell lines. The selective tumor specific cell death by Ad-hT-TK was identified through these experiments, showing that Ad-hT-TK could be used for targeted cancer gene therapy.
This study was carried out to develop an immunoassay for the diagnosis of the pregnancy and ovarian function of domestic animals. Using 2E92C10 monoclonal antibody(McAb) generated against estrone-3-glucuronide(E1-3-G) and appeared a high cross-reactivity with estrone-3-sulfate(E1-3-S), chemiluminesence immunoassay (CIA) to detect E1-3-S was developed. 2E92C10 McAb cross-reacted with E1-3-S (30%) was purified from ascites fluid using protein G sepharose gel column. The purity of purified antibody fraction was monitored by SDS-PAGE and was better compared to that of crude ascite fluid. The soild and liquid phase CIA for E1-3-S were established utilizing 2E92C10 antibody and E1-3-G-ABEI conjugate used as a tracer. As the results, the titer of 2E92C10 antibody was 5g/ml in soild phase and 1:2000 in liquid phase. The sensitivity on soild and solid phase CIA were about 200 pg/ml. These results indicate that CIA for measurement of E1-3-S was successfully developed by using ant-E1-3-G McAb cross-reacted with E1-3-S and could be usefully used to research this area.
The gonadal development, the annual reproductive cycle and the first sexual maturity of surf clam, Mactra veneriformis Reeve were studied histologically. Speciemens were monthly collected at the intertidal zone of Naechodo, Chollabuk-do, Korea, for one year from March 1986 to February 1987. Sexuality of the clam is dioecious. The gonads were located between the subregion of mid-intestinal gland in the visceral cavity and the reticular connetive tissues of the foot, The ovary is composed of a number of ovarian sacs, and the testis comprise several testiculat lobules. The undifferentiated mesenchymal tissues and eosinophilic granular cells function as nutritive cells in the early stage. The ripe eggs were about 50-60${\mu}{\textrm}{m}$ in diameter, and they were wurroundedby the gelatinous membranes. The spawing period was from early June to September the main spawning occurred beetween July and August when the water temperature reached above 24$^{\circ}C$. The annual reproductive cycle of this species could be classified into five successive stages: multiplicative(January to March), growing(March to May), mature(April to August), spent(June to September), degenerative and resting(September to February). The monthly changes of fatness coefficient closely correlated with the annual reproductive cycle. Percentages of the first sexual maturity of female and male clams were over 50% among those individals ranging from 2.1 To 2.5cm, and 100% in those over 2.6cm in shell length.
Purpose: The purpose of this paper is to report the effect of Korean medicine treatments on a female and a male patient who were infertile and failed to in vitro fertilization(IVF) treatment. Methods: The patients are a 30-year-old female who had been diagnosed with the ovulation dysfunction caused by the depression of ovarian function, and a 33-year-old male who had been diagnosed with sperm defect. The female patient alone underwent Korean medicine treatment after the eighth failure in IVF treatment and the male patient received Korean medicine treatment along with his wife after he failed in the first IVF treatment. The Korean medicine applied include herb-medicine administration, acupuncture, moxibustion, Jwa-Hun, and Du-Han-Jok-Yeol treatment. Results: Through Korean medicine treatment the female patient had succeeded in the IVF treatment and she also recovered completely from allergic rhinitis. The male patient whose wife also received Korean medicine treatment with him got his wife pregnant naturally. Conclusions: This result concludes that Korean medicine treatment is effective in infertile patients. Therefore, there needs to be more of subsequent research on infertile patients that is based on Korean medicine treatment.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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