• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제50권3호
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• pp.192-199
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• 2023

Objective: This study was conducted to investigate chromosomal abnormalities and their correlations with clinical and radiological findings in females with primary amenorrhea (PA). Methods: Detailed forms were recorded for 470 females, including the construction of three-generation pedigrees. Peripheral venous blood was drawn, with informed consent, for cytogenetic analysis. Results: An abnormal karyotype was found in 16.38% of participants. The incidence of structural abnormalities (6.8%) exceeded that of numerical abnormalities (6.15%). Turner syndrome represented 45% of all numerical abnormalities. Furthermore, the Y chromosome was detected in 5% of females with PA. Among the structural chromosomal abnormalities detected (n=32) were mosaicism (25%), deletions (12.5%), isochromosomes (18.75%), fragile sites (3.12%), derivatives (3.12%), marker chromosomes (3.12%), and normal variants (29.125%). An examination of secondary sexual characteristics revealed that 29.6% of females had a complete absence of breast development, 29.78% lacked pubic hair, and 36.88% exhibited no axillary hair development. Radiological findings revealed that 51.22% of females had a hypoplastic uterus and 26.66% had a completely absent uterus. Abnormal ovarian development, such as the complete absence of both ovaries, absence of one ovary, one absent and other streak, or both streak ovaries, was observed in 69.47% of females with PA. Additionally 43.1%, 36.1%, 67.4%, and 8% of females had elevated levels of serum follicle-stimulating hormone, luteinizing hormone, thyroid-stimulating hormone, and prolactin, respectively. Conclusion: This study underscores the importance of karyotyping as a fundamental diagnostic tool for assessing PA. The cytogenetic correlation with these profiles will aid in genetic counseling and further management of the condition.

• Nutrition Research and Practice
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• 제16권sup1호
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• pp.147-159
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• 2022

BACKGROUND/OBJECTIVES: Complementary and alternative medicines can be used to alleviate climacteric symptoms that significantly affect the quality of life of postmenopausal women. Isoflavones are the most common plant-based therapies for postmenopausal changes, but the results of previous studies have been controversial. MATERIALS/METHODS: To investigate whether isoflavones would affect menopausal symptoms as well as ovarian hormones, we performed a systematic review and meta-analysis. The PubMed and EMBASE databases were used to perform the systematic search. Included studies were limited to randomized controlled trials (RCTs) assessing the impact of isoflavone supplementation on menopausal symptoms. RESULTS: Eleven studies were included for the final quantitative assessment. Isoflavone intervention was varied between 49.3 and 135 mg of isoflavones per day for 12 wk-2 yrs. The meta-analysis showed that supplementation of isoflavones significantly increased the estradiol levels (standardized mean difference [SMD] = 0.615, P = 0.035) and Kupperman index (SMD = 3.121, P = 0.003) but had no significant effect on hot flashes, follicle-stimulating hormone, and luteinizing hormone. However, both estradiol and the Kupperman index showed significant heterogeneity among studies (I² = 94.7%, P < 0.001 and I² = 98.1%, P < 0.001, respectively). CONCLUSIONS: Although the results showed a significant SMD in estradiol and the Kupperman index, the results should be interpreted with caution due to the high heterogeneity. Further validation with a larger RCT will be necessary. Overall, isoflavone supplementation has distinct effects on the climacteric symptoms and hormonal changes in postmenopausal women.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제27권4호
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• pp.185-193
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• 2023

Although increasing evidence of cause-and-effect relationship between BPA exposure and female reproductive disorders have been suggested through many studies, the precise biochemical and molecular mechanism(s) by which BPA interferes with steroidogenesis in the ovarian cells still remain unclear. Therefore, the purpose of this study was to discover the steroidogenic biomarker(s) associated with BPA treatment in human granulosa cell line, KGN. In this study, our results obtained via the analysis of steroidogenesis-related protein expression in KGN cells using quantitative polymerase chain reaction (qPCR) and western blot analyses revealed that the expression levels of steroidogenic acute regulatory (StAR) and aromatase decreased considerably and gradually after BPA treatment in a dose-dependent manner under BPA treatment. Further, remarkable decreases in their expression levels at the cellular levels were also confirmed via immunocytochemistry, and subsequent StAR and aromatase mRNA expression levels showed profiles similar to those observed for their proteins, i.e., both StAR and aromatase mRNA expression levels were significantly decreased under BPA treatment at concentrations ≥0.1 μM. We observed that follicle stimulating hormone upregulated StAR and aromatase protein expression levels; however, this effect was suppressed in the presence of BPA. Regarding the steroidogenic effects of BPA on KGN cells, controversies remain regarding the ultimate outcomes. Nevertheless, we believe that the results here presented imply that KGN cells have a good cellular and steroidogenic machinery for evaluating endocrine disruption. Therefore, StAR and aromatase could be stable and sensitive biomarkers in KGN cells for the cellular screening of the potential risk posed by exogenous and environmental chemicals to female reproductive (endocrine) function.

• 한국수정란이식학회지
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• 제16권3호
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• pp.183-191
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• 2001

본 연구는 고품질육의 DNA marker가 규떵된 한우로부터 초음파유노 난포란의 연속적 채취를 통하여 능력이 우수한 한우 수정란온 대량생산하는 방법의 확립과 이를 한우농가에 응용하고자 초음파 난자채취기를 이용하여 등지방층두께, 일당증체량, 근내지방도 및배최장근 단면적에 연관된 DNA marker를 보유하고 있는 한우 5두로부터 개체및 난포수, 채취방법, 회수한 난포란의 등급 등을 조사하였다. 한우 5두의 개체별 난포수는 6, 10, 5, 4 및 11회 관찰하여 각각 59개(9.8$\pm$4.5개), 82개(8.2$\pm$4.8개), 83개(16.6$\pm$2.6개), 50개(12.5$\pm$0.5개) 및 79개(7.2$\pm$3.1개)였으며, 모두 36회에 걸쳐 관찰하였던 바 353개(9.8$\pm$4.9개)의 난포를 확인할 수 있었다. 전체 난포수는 small(227개), medium(112개), large follicles(14개) 순으로 나타났으며, 개체별 평균 난포수는 5101번 개체가 평균 16.6$\pm$2.6개로써 가장 높았다. 개체별 난포란의 회수율은 5101번 개체가 89.3%(50/56 ; >2mm) 및 94%(47/50 ; $\leq$2mm)로써 가장 높게 나타났으며, 5두 전체 회수율은 $\leq$2mm(손가락 촉지)가 85.7%(132/154)로써 >2mm (초음파 image)의 74.2%(201/271)보다 유의적 (P<0.01)으로 높게 나타났다. >2mm의 난포에서 채취한 회수란의 등급은 각각 1.0%(G I). 5.0%(G II), 31.3%(G III) 및 62.7%(G IV)로 나타났으며, $\leq$2mm의 난포로부터 채취한 회수란을 각각 2.3%(G I), 16.7%(II),38.6%(G III) 및 42.4%(G IV)의 등급별 회수을 보였다. 1등급(G I) 난포란은 2~6mm 난포에서 1개(1.1%)였으며, 2등급(G II)은 $\leq$2mm, 2-6mm 및 $\geq$6mm 난포에서 각각 5개(3.3%), 11개(11.7%) 및 3개(33.3%)로써 $\geq$6mm 난포에서 가장 높게 나타났다. 3등급(G III) 난포란도 각각 43개(28.9%). 35개(37.2%) 및 5개(55.6%)로써 $\geq$6mm 난포에서 가장 높았으나, 4등급(GIV) 난포란은 $\geq$6mm 난포에서 1개(11.1%)로써 $\leq$2mm 및 2-6mm 난포에서의 101개(67.8%) 및 47개(50.0%) 보다 매우 낮게 나타났다. 전체 회수 난포란수도 4등급이 59.1%(149/252)로써 1, 2, 3등급의 0.4% (1/252), 7.6%(19/252) 및 32.9%(83/252)보다 높게 나타났다. 1회 평균 회수 난포란은 $\leq$2mm 난포에서 4.8$\pm$3.7개로써 2-6mm(3.0$\pm$3.4개) 및 $\geq$6mm (0.3$\pm$0.6개)보다 높았으며, 1회당 평균 8.1$\pm$5.1개의 난포란을 회수하였다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제21권4호
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• pp.315-322
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• 2006

본 연구는 한우 난소의 난포 발달에 있어서 bFF 또는 anti-inhibin serum(AI)의 생리적 역할을 검토하기 위해 수행하였다. Saline(0.95%, control), bFF 또는 AI를 경정맥 주사 처리한 9마리의 한우 암소에서 채혈하여 혈중 estradiol-17$\beta$(E2), inhibin 및 progesterone(P4) 농도를 분석하였으며, 이들 처리에 의한 난포의 발달은 초음파 진단기를 이용하여 관찰하였다. 본 연구에서 얻어진 결과는 다음과 같다. 혈중 inhibin 농도는 bFF 처리구에서 배란 후 102시 간부터 유의적으로 증가하여(p<0.05) 지속적으로 높은 수준을 유지하였다. 혈중 E2 농도는 saline 처리구의 경우 bFF 처리구와 비슷한 수준으로 배란 후부터 낮은 농도를 유지하였으나, AI 처리구는 배란 후 36시간 이후부터 108시간까지 유의적으로 높은 수준을 유지하다가(p<0.05) 점차적으로 감소되는 경향을 나타내었다. 혈중 P4 농도는 saline 처리구와 AI 처리구에서 배란 후 68시간째부터 증가하기 시작하였으나, bFF 처리구에서는 배란 후 84시간부터 180시간까지 saline 또는 AI 처리구에 비해 유의적으로 낮은 농도를 나타내었다(p<0.05). 한편, AI 또는 bFF 처리가 난포 발달에 미치는 영향을 알아보기 위하여, 초음파 진단기를 이용하여 난소의 난포 발달을 조사한 결과, bFF 처리구에 비해 AI 처리구에서 발달 난포가 많은 것을 확인할 수 있었다. 이상의 결과를 종합해 보면, 외인성 AI는 한우난소에서 분비하는 inhibin을 특이하게 억제하여, inhibin에 의해 분비가 억제되어 있던 FSH 분비를 촉진시킴으로써 난포 발달과 estrogen의 분비 증가를 유발하는 것으로 사료된다 따라서 한우에 있어서 배란 직후 새롭게 발달하는 난포에는 적어도 inhibin이 관여하고 있는 것으로 사료된다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제34권2호
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• pp.125-131
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• 2007

목 적: 난소 반응이 저하된 환자에서 GnRH agonist flare up protocol과 GnRH antagonist protocol의 효용성을 비교하고자 하였다. 연구방법: 2003년 1월부터 2005년 8월까지 체외수정시술을 받은 환자들 가운데 이전의 체외수정시술 주기에서 5개 이하의 난자가 채취되고 기저 FSH 농도가 12 mIU/ml 이상인 총 144명 가운데 73명은 GnRH agonist flare up요법을 사용하였고 71명은 GnRH antagonist 요법을 사용하였다. 양군간에 주기의 취소율, 채취된 난자수, 양질의 수정란의 수, 착상율, 임신율, 출산율을 비교하였다. 결 과: 각 군간에 나이는 평균 37.4세와 38.1세로 antagonist group에서 높았으나 통계학적 유의성은 없었다. 그 외에 기저 FSH 농도와 이전 주기의 취소율도 통계학적 유의성은 없었다. GnRH agonist flare up 주기와 GnRH antagonist 주기에서 취소율은 각각 30.1%, 53.5%로 GnRH antagonist protocol에서 유의 있게 높게 나타났다. 채취된 난자수도 각각 4.18개와 2.16개로 차이를 보였으며 난소 과자극 기간은 각각 10.5일과 9.2일로 antagonist protocol에서 약간 낮은 모습을 보였다. 최고 혈중 E$_2$의 농도와 good embryo 개수도 GnRH agonist flare up요법에서 유의 있게 높게 나타났다. 각 군에서의 착상율, 이식 주기당 임신율, 이식 주기당 출생율은 GnRH agonist flare up요법에서 약간 높은 경향을 보이기는 하였으나 통계학적인 유의성은 없었다. 결 론: 두 군간의 비교에서 GnRH agonist flare up 요법이 시작 주기당 임신율, 출산율에서 높은 경향을 보였으나 통계학적 의의는 없었다. 하지만 난소기능이 저하된 환자에서 난자의 채취 개수는 GnRH agonist flare up 요법이 GnRH antagonist를 사용한 주기보다 의의있게 높게 나타났다. 이러한 연구 결과로 볼 때 저 반응군에 있어서 GnRH antagonist flare up요법이 저 반응군에 있어 향상된 난소 반응을 기대할 가능성이 높을 것으로 생각된다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제34권1호
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• pp.49-56
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• 2007

목 적: 성선자극호르몬과 GnRH agonist (GnRH)를 동시에 중단하는 1$\sim$2 일간의 단기 coasting이 임신율을 포함한 난소과자극증후군 예방에 미치는 효과를 조사하고자 한다. 연구방법: 체외수정시술을 위한 과배란유도 시 15 mm 이상의 난포가 20 개 이상이고 혈중 E$_2$ 농도가 4,000 pg/ml 이상일 때 coasting을 시도한 37 명의 여성들을 대상으로 하였다. Coasting은 성선자극호르몬과 GnRH agonist를 동시에 중단하였으며, 초음파상 난포의 상태와 혈중 E$_2$ 농도 에 따라 1일 또는 2일 동안 시행하였다. 혈중 E$_2$ 농도, 채취된 난자 수, 수정율, 임신율 등을 후향적으로 비교 분석하였다. 결 과: 평균 혈중 E$_2$ 농도는 coasting 시작 당일 6,993 pg/ml 에서 hCG 투여일에 3,396 pg/ml로 감소하였다. 평균 채취 난자 수와 수정율은 15.7개와 70%였다. 15명 (40.6%)이 임신을 하였고 착상율은 15.2%였다. 26명 (70.3%)이 1일, 11명 (29.7%)이 2일 동안 coasting 하였다. 평균 혈중 농도의 감소율은 1일 coasting한 군에서 43%, 2일 costing한 군은 15% (첫날)와 81% (둘째날)이었다. 임신율은 두 군간 유사하였고, 중증도 이상의 OHSS는 발생하지 않았으며 3명 (8.1%)에서 경미한 OHSS가 나타났다. 결 론: 성선자극호르몬과 GnRH agonist의 통시 중단에 의한 1$\sim$2 일의 단기 coasting은 체외수정의 결과에 영향을 주지않고 OHSS 를 예방하는데 성공적으로 적용될 수 있을 것으로 사료된다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제23권3호
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• pp.292-301
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• 2010

Follicle-stimulating hormone (FSH) is a pituitary glycoprotein hormone that is encoded by separate alpha- and betasubunit genes. It plays a key role in stimulating and regulating ovarian follicular development and egg production in chicken. FSH signal transduction is mediated by the FSH receptor (FSHR) that exclusively interacts with the beta-subunit of FSH, but characterization of prokaryotic expression of the FSHb gene and its effect on the expression of the FSHR gene in local chickens have received very little attention. In the current study, the cDNA fragment of the FSHb gene from Dagu chicken was amplified using reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR), and inserted into the pET-28a (+) vector to construct the pET-28a-FSHb plasmid. After expression of the plasmid in E. coli BL21 (DE3) under inducing conditions, the recombination protein, $FSH{\beta}$ subunit, was purified and injected into the experimental hens and the effect on the mRNA expression levels of the FSHR gene was investigated. Sequence comparison showed that the coding region of the FSHb gene in the local chicken shared 99%-100% homology to published nucleotides in chickens; only one synonymous nucleotide substitution was detected in the region. The encoded amino acids were completely identical with the reported sequence, which confirmed that the sequences of the chicken FSHb gene and the peptides of the $FSH{\beta}$ subunit are highly conserved. This may be due to the critical role of the normal function of the FSHb gene in hormonal specificity and regulation of reproduction. The results of gene expression revealed that a recombinant protein with a molecular weight of about 19 kDa was efficiently expressed and it was identified by Western blotting analysis. After administration of the purified $FSH{\beta}$ protein, significantly higher expression levels were demonstrated in uterus, ovary and oviduct samples (p<0.05). These observations suggested that the expressed $FSH{\beta}$ protein possesses biological activity, and has a potential role in regulation of reproductive physiology in chickens.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제23권1호
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• pp.103-108
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• 1996

Through the previous studies(I,II), it was observed that human follicular fluid(HFF) was more effective than human fetal cord serum(HFCS) on promoting meiotic resumption of oocytes and improving embryonic development of mouse in vitro. On the basis of these results, we have gradually exchanged HFCS with HFF as protein supplement in human ART. This study was performed to investigate the efficiency of HFF on improving the pregnancy rate in ART. Oocytes were retrieved transvaginally from patients treated with pituitary suppression with GnRH-agonist and ovarian stimulation with human menopausal gonadotro-pin(HMG) and pure follicle stimulating hormone(FSH). Aspirated oocytes were rinsed and cultured in TCM-199 containing HFF, and the concentrations of HFF were adjusted to 10, 20, and 30% according to the use for insemination, embryo growth and embryo transfer, respectively. As possible as, we tried to do embryo transfer into fallopian tube to mimic the coincidence of the cell stage with the place of sojourn in vivo, so we performed various ART programs(IVF & ET; in vitro fertilization, ZIFT; zygote intra fallopian-tube transfer, ZIFT & ET) according to the tubal conditions of patients. On the while, intra cytoplasmic sperm injection(ICSI) was used to assist IVF of the patients who had shown poor standard IVF results by immunological or severe male factor. Of the 255 cycles of ART programs using HFF as protein supplement, 118 cycles were turn out to be succeeded in pregnancy(46.2%, per cycle, p<0.05), while 21 pregnancies were achieved in the 69 cycles using HFCS(30.4%). The 255 cycles using HFF were subdivided into cycles with the type of ART programs, and each pregnancy rate of the ART programs were 44.7% (IVF & ET, 76/170 cycles), 53.4%(ZIFT, 31/58 cycles) and 40.7% (ZIFT & ET, 11/27 cycles), respectively. In the 61 ICSI cycles using HFF, 28 cycles succeed in pregnancy(45.9%), while 7 pregnancies were obtained in the 17 ICSI cycles using HFCS. Also the ongoing pregnancy rate in the group using HFF(78.8%, 93/118 cycles) was higher than that in the group using HFCS(61.9%). Therefore, we found that the use of HFF as protein supplement was more suitable and effective than the use of HFCS to improve the pregnancy rate in ART.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제8권1호
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• pp.27-33
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• 2004

생쥐 신생자 시기에 생식 세포의 사멸 기전을 알아보기 위하여 세포 사멸을 보이는 생식 세포에서 세포 사멸 관련 단백질인 caspase-3, caspase-activated DNase(CAD), Bax 및 Fasnas ligand의 발현을 조사하였다. 활성화된 caspase-3와 CAD의 면역화학적 염색 결과 일차 및 이차 난포내 TUNEL 양성을 보이는 세포 사멸 난자에서 발현되는 것을 관찰하였다. CAD 또한 TUNEL 양성을 보이는 세포 사멸 난자에서 염색되었다. 활성화된 caspase-3와 CAB에 양성을 보이는 대부분의 난자들은 폐쇄의 형태학적 특징이라고 할 수 있는 세포질 내 공포가 관찰되었다. Bax는 세포질 내 공포가 존재하는 세포 사멸된 난자에서 염색되었다. Fas ligand 또한 TUNEL 양성을 보이는 난자에서 염색되었다. 이러한 TUNEL 양성을 보이는 생식 세포에서 활성화된 caspase-3와 CAD가 염색된 결과는 생쥐 난포 발달 초기 단계에 caspase-3와 CAD가 생식 세포의 세포사멸에 중요한 역할을 할 수 있다는 것을 보여주고 있다. 또한 TUNEL 양성을 보이는 난자에서 Bax와 Fas ligand가 발현된 결과는 이러한 단백질이 난자의 세포 사멸을 조절하는 요소로 작용할 수 있을 것으로 사료된다.