We investigated the physiological responses of the river puffer, Takifugu obscurus, the tiger puffer, T. rubripes, a hybrids of the two (river puffer${\times}$tiger puffer) and a hybrid triploids to acute changes of salinity from 30 psu to 0 psu and from 0 psu to 30 psu. The blood and plasma factors of each species were elevated for 48, 72, or 96 hrs, and thereafter decreased due to hyper-osmoregulation and hypo-osmoregulation. In hyper-osmoregulation and hypo-osmoregulation, the cortisol concentration of river puffer, hybrids, hybrid triploids and tiger puffer increased for 12 or 48 hrs, and decreased thereafter. Chloride cells in the gill filaments of each species increased with increasing salinity, and melano-macrophages in the kidney tissue of each species increased with decreasing salinity. In conclusion, the hematological and stress responses of the hybrids were between those of the river puffer and tiger puffer, and the hematological responses of the hybrid triploids were higher than those of the other groups. The stress response of the hybrids was more sensitive than that of the hybrid triploids. In all groups, the histological responses of kidney in hyper-osmoregulation were more sensitive than those in hypo-osmoregulation.
Eight-week old perennial ryegrass (Lolium perenne L. cv. Reveille) plants were exposed to different NO3-concentrations or osmotic stress with NaCI. Previously labeled "N was chased during 14 days of non-labeled'NO3 feeding in order to investigate NO3 metabolism in relation to osmoregulation. The short termmeasurement of osmotic potential showed that the extemal concentration of Nos- had not great effect on theosmotic potential, but that osmotic adjustment was observed in NaCl-treated plants. Total uptake of NO 3 - waslargely increased by increasing supply level of NO3 while it was depressed by exposing to osmotic stress.Nitrate reduction increased to more than 29% by increasing extemal NO,- concentration from 1 mM to 10mM. When osmotically stressed with NaCI, nitrate reduction was depressed to about 37% as compared to thecontrol. The decrease in translocation of reduced N into leaves was also observed in NaCl exposed plants. Inthe medium exposed to 10 mM NO,., osmotic contribution of nitrate to cumulative osmotic potential wasdecreased, and it was osmotically compensated with soluble carbohydrate. When osmotically stressed withNaC1, the contribution of chloride was much higher than that of nitrate. The present data indicate that N03-in plant tissues, factually affected by the assimilation of this ion, plays an active role in osmotic regulation incorrelation with other osmotica such carbohydrate and chloride.(Key words : Nitrate metabolism, Osmotic stress, Nitrate supply level, Osmoregulation)ate supply level, Osmoregulation)
Involvement of calcium in signal transduction of salt stress was investigated in 1.7 M NaCl adapted Dunaliella salina, extremely halotolerant, unicellular green alga. When hyperosmotic (3.4 M NaCl) or Hypoosmotic (0.8 M NaCl) stress was treated, extracellular calcium was influxed in or intracellular calcium effluxed from D. salina, respectively, and these fluxes were proportional to the degree of stress. This might indicate indirectly that the change of calcium level occurred within the cells. In addition, the change of calcium flux was ahead of glycerol synthesis which has been known as the physiological response to salt stress. Osmoregulation was affected byextracellular calcium concentration, and increase of glycerol content as an osmoticum was inhibited about 50% by treatment of TFP and W-7 known as calmodulin specific inhibitors. Furthermore, in the case of the hyperosmotic stressed cells, the amount of 21 kD and 39 kD protein appeared to be calcium binding protein were increased. Among these, the 39 kD protein was detected only in the hyperosmotic stressed cells. The results obtained in the present work suggest that the possibility of calcium as a second messenger in the transduction of salt stress signal exists in the osmoregulation system of D. salina.
본 연구에서는 광염성 송사리 Oryzias dancena 성체 및 자어의 염분도 변화에 대한 내성 및 생존 능력을 평가하고자 다양한 염분도 변화 처리를 수행하였다. 담수로부터 고 염분도 조건으로의 급격한 염분도 증가 노출 처리에 대하여 O. dancena 성체는 $40^{\circ}/_{\circ\circ}$염분도 변화 폭까지 생존의 장애 없이 빠르게 적응할 수 있는 것으로 관찰되었으며, 단계적인 순치를 통할 경우 최대 $75^{\circ}/_{\circ\circ}$의 염분도 조건까지 생존이 가능하였다. 염분도의 감소 처리에서 O. dancena 성체는 $60^{\circ}/_{\circ\circ}$ 이상의 급격한 감소 폭에서도 우수한 생존율을 나타내였다. 성체와 달리 O. dancena 자어는 급격한 염분도 증가에 대한 삼투압 조절 능력 (hyper-osmoregulation)이 유의적으로 낮아 약 $15^{\circ}/_{\circ\circ}$ 이상의 염분도 증가에서는 생존에 큰 장애를 겪는 것으로 나타났다. 그러나 초기 발달 단계에 있는 자어의 염분도 변화에 대한 내성은 최초 염분도 처리 농도에 따라 염분도 변화에 대한 내성 폭이 크게 영향을 받는 것으로 관찰되었다. 초기 발달 단계에서 O. dancena 자어는 염분도 증가 보다는 염분도 감소 시 삼투압 조정 능력 (hypo-osmoregulation)이 더 높은 것으로 나타나 $40^{\circ}/_{\circ\circ}$에서 완전 담수로의 염분도 변화에서도 우수한 생존 능력을 보였다.
Isotocin (IT)은 포유류의 oxytocin과 유사한 호르몬으로 어류의 행동 조절과 스트레스에 대한 반응, 그리고 삼투압 조절에 이르기까지 다양한 생리반응에 관여한다고 추정된다. 해수 관상어인 cinnamon clownfish의 IT 유전자 구조와 기능을 연구하기 위하여 genomic DNA와 뇌의 cDNA 주형으로부터 유전자를 확보하였다. 세 개의 exon과 156개의 아미노산을 표지하는 ORF로 이루어진 IT 전구물질 유전자는 19개 아미노산으로 이루어진 신호 부위, 9개 아미노산 호르몬 부위, 3개 아미노산의 효소 조절 부위, 그리고 125개 아미노산의 neurophysin 호르몬 부위로 구성되었다. 조직별 RT-PCR 분석결과는 IT 전구물질 유전자가 뇌와 생식소에서 발현됨을 보여준다. 해수 (34 ppt) 적응 개체의 아가미에서는 염류세포 바깥 표면에 apical crypt가 보이는데 비하여, 15 ppt로 낮춘 저염분 적응 개체의 아가미는 표면이 pavement cell로 덮여있는 평평한 구조를 보여준다. 아가미 세포의 Na+/K+-ATPase 활성은 저염분 순응 초기에 증가하다 시간이 지날수록 정상 수준을 회복하는 양상을 보여주는데, 이는 prolactin과 같이 저염분 초기순응 및 항상성 유지에 관여함을 의미한다. 하지만 저염분 순응 시 미량 증가하는 IT 전구체 mRNA는 초기 삼투조절에 미치는 역할이 미미함을 보여준다.
A halophilic bacterium was isolated from fermented seafood. The 16S rDNA sequence identity between the isolate and Halomonas subglaciescola AJ306801 was above 95%. The isolate that did not grow in the condition without NaCl or in the condition with other sodium (Na$\^$+/) or chloride ions (Cl$\^$-/) instead of NaCl was named H. subglaciescola DH-l. Two mutants capable of growing without NaCl were obtained by random mutagenesis, of which their total soluble protein profiles were compared with those of the wild type by two-dimensional electrophoresis. The external compatible solutes (betaine and choline) and cell extract of the wild type did not function as osmoprotectants, and these parameters within the mutants did not enhance their growth in the saline environment. In the proton translocation test, rapid acidification of the reactant was not detected for the wild type, but it was detected for the mutant in the condition without NaCl. From these results, we derived the hypothesis that NaCl may be absolutely required for the energy metabolism of H. subglaciescola DH-l but not for its osmoregulation, and the mutants may have another modified proton translocation system that is independent of NaCl, except for those mutants with an NaCl-dependent system.
Survival of 12.7 g (average body weight) Litopenaeus vannamei was examined at temperatures of 14, 16, 18, 28, 32, 34 and 36$^{\circ}C$ and salinities of l0, 20, 30 and 40 ppt after 7 days. Hemolymph osmolality was measured at 12 combinations of salinities (l0, 20, 30 and 40 ppt) and temperature levels (18, 28 and 34$^{\circ}C$) after 14 days. The results show that the species have their best survival between temperatures of 18 and 3$0^{\circ}C$ and salinity above 20 ppt. Hemolymph osmolality increased with increased salinity at all temperatures tested. The isosmotic point calculated from the linear relationship between hemolymph osmolality and medium osmolality and recorded as 826, 809 and 1,117 mOsm/kg which is equivalent to 29.4, 28.8 and 40.2 ppt at 18, 28 and 34$^{\circ}C$, respectively. The slopes obtained from the relationship between hemolymph osmolality and medium osmolality were 0.314, 0.276 and 0.541 for L. vannamei at 18, 28 and 34$^{\circ}C$, respectively, suggesting that the shrimp at 34$^{\circ}C$ regulated osmotic concentration much worse than those at 18 and 28$^{\circ}C$. This result also indicated that L. vannamei living at 34$^{\circ}C$, showed more fluctuation in hemolymph osmolality than those at 18 and 28$^{\circ}C$.
Saline soils comprise more than half a billion hectares worldwide. Thus, they warrant attention for their efficient, economical, and environmentally acceptable management. Halophytes are being progressively utilized for human benefits. The halophyte microbiome contributes significantly to plant performance and can provide information regarding complex ecological processes involved in the osmoregulation of halophytes. Microbial communities associated with the rhizosphere, phyllosphere, and endosphere of halophytes play an important role in plant health and productivity. Members of the plant microbiome belonging to domains Archaea, Bacteria, and kingdom Fungi are involved in the osmoregulation of halophytes. Halophilic microorganisms principally use compatible solutes, such as glycine, betaine, proline, trehalose, ectoine, and glutamic acid, to survive under salinity stress conditions. Plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR) enhance plant growth and help to elucidate tolerance to salinity. Detailed studies of the metabolic pathways of plants have shown that plant growth-promoting rhizobacteria contribute to plant tolerance by affecting the signaling network of plants. Phytohormones (indole-3-acetic acid and cytokinin), 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid deaminase biosynthesis, exopolysaccharides, halocins, and volatile organic compounds function as signaling molecules for plants to elicit salinity stress. This review focuses on the functions of plant microbiome and on understanding how the microorganisms affect halophyte health and growth.
In order to investigate the effect of salinity on growth and osmoregulation of the sweetfish, Plecoglossus altivelis, the fish (post-larva, juvenile, adult) reared in seawater were directly transferred into the experimental rearing water of the different salinities (post-larva : $0\textperthousand$, $5\textperthousand$, $10\textperthousand$, $15\textperthousand$, $20\textperthousand$, $30\textperthousand$. juvenile : $0\textperthousand$, $\10textperthousand$, $20\textperthousand$, $30\textperthousand$. adult : $0\textperthousand$, $15\textperthousand$, $35\textperthousand$, respectively). Fish samples were taken in time courses after transfer for blood and body fluid collection. The changes of sodium, potassium concentration and osmolality of the body fluid and plasma, muscle water content, gonadosomatic index (GSI) and hepatosomatic index (HSI) in the experimental fish were observed in time courses. Growth rate of the post-larva in $\5~25\textperthousand$ were faster than in $0\textperthousand$ (P<0.05). Survival rate was very low in $0\textperthousand$ (P<0.05). No fish survived more than 50 days after transferred into $0\textperthousand$. The concentration of sodium, potassium and osmolality in body fluid of the juvenile sweetfish were slightly decreased at 0.25 day after the beginning of the maintainable level of sodium, potassium and osmolality were $36.4\pm6.2 mM/\ell, 47.5\pm0.7 mM/\ell, 366.3\pm19.1 mOsm/kg, respectively. Except potassium concetration, fish in $0\textperthousand$ and $10\textperthousand$ displayed the pattern of hypoosmotic regulation. Growth rate and survival rate of juveniles of $30\textperthousand$ are significantly low than other groups (P<0.05). The concentration of sodium, potassium and osmolality in plasma of adult sweetfish were slightly decreased at 1 day after the beginning of the maintainable level of sodium, potassium and osmolality were $159.0\pm2.5 mM/\ell, 5.8\pm0.9 mM/\ell, 338.1$\pm13.3 mOsm/kg respectively. Compared with these values, fish in $0\textperthousand$ and $15\textperthousand$ displayed hypoosmotic regultion. Growth and survival rate of adult in $35\textperthousand$ are significantly low than other experimental groups. GSI was the highest in $15\textperthousand$ after 60 days. HSI was the lowest in $35\textperthousand$. With decreased salinities, oxygen consumption was found to be decreased in the other experimental groups compared to the more than $30\textperthousand$.
본 연구에서는 외인성 T3처리가 강도다리의 담수 순화시 삼투압 조절과 혈중 코티졸 변화에 어떠한 영향을 미치는지 조사하였다. 해수에서 사육 중인 강도다리에 갑상선호르몬의 일종인 T3를 5, 10 및 $15{\mu}g$/g body weight의 농도로 0.9% NaCl과 함께 주입하고 담수로 옮긴 후 3일째 혈액을 채취하였으며, 삼투압 조절 지표인 $Na^+,\;Cl^-$ 및 삼투질 농도와 스트레스 지표인 cortisol, glucose를 조사하였다. $10{\mu}g$/g의 T3를 주입한 실험구의 혈장 $Na^+$와 $Cl^-$의 농도는 호르몬 처리 없이 담수로 이동한 대조구에 비해 유의하게 높았다. 삼투질 농도는 $10{\mu}g$/g과 $15{\mu}g$/g의 농도를 주입한 실험구가 대조구보다 높았다. 그러나 $5{\mu}g$/g 농도의 T3를 주입한 실험구에서는 삼투압 조절에 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 또한 본 연구에서는 T3를 주입한 모든 실험구에서 glucose와 상관없이 cortisol의 농도가 모두 증가하는 경향을 나타내었다. 이러한 cortisol의 증가는 스트레스 반응이 아닌 삼투압 조절과 관련이 있으며, 결과적으로 강도다리의 담수 순화시 외인 성 T3는 cortisol을 증가시킴으로 어체의 고삼투압 조절 능력을 향상시키는 것으로 추정된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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