An aqueous/organic two-phase reaction system was applied to the production of catechol using immobilized resting cells of Pseudomonas putida CY 400. Water/ethyl ether system was used because of high partition coefficient of catechol and thus to reduce the product inhibition and degradation. Among the tested immobilization carriers, polyacrylamide gel gave the highest catechol productivity. The immobilization seemed to protect the cells against solvent toxicity. From the simulation of reaction conditions based on two-phase models, it was found that there was an optimum acetate concentration at fixed benzoate and cell concentrations for the catechol productivity. A lower phase volume ratio (lower fraction of organic phase) gave a higher productivity. However, the substrate conversion was low at low phase volume ratio.
유기용매 이상계에서의 thermolysin을 사용하여 아스파탐 전구체 합성시 pH, 온도, 기질농도, 그리고 유기용매상에 대한 수용액상의 부비피 ($\alpha$)등의 변화에 따른 기질의 분해 반응, 효소의 안정성, 그리고 Z-APM 합성에 미치는 복합적인 영향을 조사함으로써 반응조건의 최적화를 도모하였다. 유기용매 이상계에서의 L-PM.HCL의 자연분해는 수용액에서보다 훨씬 느리게 일어나며, 또한 $\alpha$가 증가할 수록 분해속도가 감소하는 것을 알 수 있었다.
Resident time of the centrifugal extractor for organic phase extraction using a height controlled separator weir and a divert plate is the important factor that affects significantly the chemical material extraction and the productivity in the chemical and mechanical processes. In this paper, it describes the design of the device for extraction of an organic phase from radioactive wastes, and considers phase separating weir and divert disk, both being designed to be adjustable in their positions, for effectively separating an organic phase. A height-adjustable separating weir unit used for separating the organic phase from the aqueous phase using a phase separating weir and designed to control the height of the separating weir as desired so as to allow the weir to be positioned at a boundary layer between two separated phases. The centrifugal extractor controls satisfactorily the mixed reaction time of two phases within the separator regardless of the variations of the mixing ratio of the two phases and the rotating speed of the extractor, is designed to be adjustable in its position in the vertical direction, thus allowing the user to appropriately select the mixed reaction time of the two phases within the extractor as desired. From development of a centrifugal extractor, it can effectively recover such usable elements, and preferably reducing the output quantity of radioactive wastes.
효소를 이용한 생리활성 펩티드의 합성 연구에 관한 기초자료를 얻기 위하여, Kyotorphin(진통작용을 가진 펩티드) 유도체가 $\alpha-chymotrysin$를 이용한 이상계(two phase system;유기상과 수용액상)조건하에서 Ac-Tyr-OH 와 $Arg-NH_2$로부터 합성되었다. Ac-Tyr-OH(10 mM)과 $Arg-NH_2$ (20 mM)와의 Kyotorphin 유도체 합성에 대한 유기용매의 효과에서 ethyl acetate계에서의 합성 수율이 다른 유기용매(dichloromethane, n-butanol, n-hexane, chloroform)에서 보다도 더 높았다. Kyotorphin 유도체의 합성에 미치는 최적조건을 보면, 효소 농도는 10 ${\mu}M$, 온도 및 pH는 각각 $35^{\circ}C$ 및 7.0이었으며, 유기상/수용액상의 비$(\alpha)$는 15였다. Kyotorphin 유도체 합성의 최적 반응조건하에서 수율은 70.2%였으며, 이때의 반응은 24시간 후에 평형에 도달하였다.
Tryptophanase를 이용하여 트립토판 합성시 인돌의 효소활성 저해를 억제하기 위하여 유가식 조업, 유기용매 이상계의 사용, 그리고 cyclodextrin의 첨가등에 대하여 연구하였다. 효소 농도가 0.5mg/ml일때 인돌 농도 0.4mM 부근에서 트립토판 생성이 가장 빨랐으며 그 이상에서는 효소활성이 심한 저해를 받았다. 초기 인돌 농도가 20mM일 때는 27시간 반응후 인돌의 전환율이 20인데 비하여 반응기내 인돌 농도를 5mM 이하로 유가식 조업을 하였을 때 전환율이 80%로 향상되었다.
A hydrophobic substrate triolein was hydrolyzed by lipase in a mono-phase reaction system containing cyclodextrin(CD) as emulsifier. The triolein was transformation to an emulsion-like state in the CD containing reaction system in contrast to the oil-droplet like state without CD due to the formation of an inclusion complex between the lipids and CDs. The hydyrolysis reaction increased substantially in the CD containing reaction system, and the optimum reaction conditions including the amount of lipase, ${\beta}$-CD concentration, and mixing ratio of triolein and ${\beta}$-CD, were determined. The performance of the enzyme reaction in a mono-phase reaction system was compared with that of a two-phase reaction system which used water immiscible hexane as the organic solvent. The role of a CD in the mono-phase reaction system was elucidated by comparing the degree of the inclusion complex formation with triolein and oleic acid, Km and Vmax values, and product inhibition by oleic aicd in aqueous and CD containing reaction systems. The resulting enhanced reaction seems to be caused by two phenomena; the increased accessibility of lipase to triolein and reduced product inhibition by oleic acid through the formation of an inclusion complex.
Large-scale resolution of epoxides by the yeast Rhodotorula glutinis was demonstrated in an aqueous/organic two-phase cascade membrane bioreactor. Due to the chemical instability and low solubility of epoxides in aqueous phases, an organic solvent was introduced into the reaction mixture in order to enhance resolution of epoxide. A cascade hollow-fiber membrane bioreactor was used (i) to minimize the toxicity of organic solvents towards the epoxide hydrolase of Rhodotorula glutinis, and (ii) to remove inhibitory amounts of formed diol from the yeast cell containing aqueous phase. Dodecane was selected as a suitable solvent and 1,2-epoxyhexane as a model substrate. By use of this membrane bioreactor, highly concentrated (0.9 M in dodecane) enantiopure (>98% ee) (S)-1,2-epoxyhexane (6.5 g, 30% yield) was obtained from its racemic mixture.
$\alpha$-Amylase 의 당전이반응에 의해 가용성전분으로부터 benzylalcohol-$\alpha$-glucoside(BG)를 합성하였다. 이 때 glycosyl 기의 공여체인 가용성전분 1%, glycosyl 기의 수용체인 benzylalcohol 90%, pH 5.0의 0.1M citrate 완충액 10%, Aspergillus oryzae 유래의 $\alpha$-amylase 10 unit를 함유하는 이상계(water-organic two phase )에서 당전이반응이 가장 효율적으로 일어났으며, $40^{\circ}C$, 80시간 정도의 반응에서 전문 10mg 으로부터 약 4mg 의 BG가 합성되었다. 합성초기에는 benzylalcohol-$\alpha$-maltoside(BM) 가 주로 생산되었다가 반응시간이 경과함에 따라 이는 가수분해되고 최종적으로는 BG 만이 생성되었다. 합성물질은 모두 환원력이 없고 $\alpha$-glucosidase 에 의해 가수분해되었드며 ESI-Mass 에 의해 분자량이 각각 270, 432로 측정되어 그 구조가 BG, BM 임을 확인하였다.
This research was carried to investigate the effects of several organic solvents on the enzymatic transphosphatidylation in emulsion and two-phase solvent systems. The solvents having a similar dielectric constant with diethylether were effective for the enzyme activity. Diethylether and butylacetate were the most effective solvents, when added 12-15%(v/v) and 10-40%(v/v), respectively, for the synthesis of phosphatidylglycerol, phosphatidylethyleneglycol and phosphatidylpropyleneglycol. In the emulsion system, the size of ovolecithin liposome was increased and the clearness of the phospholipid bilayer was reduced as increasing the diethylether concentration. In the twophase solvent system, the rapidest reaction was obtained when water-organic solvent ratio was close to 1. The ratio of aqueous phase. however, should be lowered to 37% to gain the sole product of transphosphatidy1ation, without phosphatidohydrolysis.
Rod-like polymerizable LC molecules having two different reactive groups, i.e. acryl and diacetylene groups were prepared. 4-Hydroxyphenyldiacetylenes were synthesized by the coupling reaction of 1-bromoalkynes with 4-ethynylphenol and then reacted with 4-(6-acryloyloxyalkyloxy)benzoic acid to give polymerizable LC molecules 4a-d. The mesomorphic properties of compounds 4a-d were investigated by differential scanning calorimetry, polarized optical microscopy and X-ray diffractometry. Compounds 4a-c exhibited smectic and nematic phases, but compound 4d having a longest alkyl tail among the series formed only a smectic phase. Photopolymerizability of acryl and diacetylene groups was investigated by IR spectroscopy. An anisotropic polymer film could be prepared by selective polymerization of acryl groups with 365 nm UV light in the presence of a photoinitiator (2,2-dimethoxy-2-phenylacetophenone). The subsequent reaction of diacetylene groups with 254 nm UV light disrupted the anisotropic structure, suggesting that these LC molecules could be used for imaging on the film.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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