• 제목/요약/키워드: nodulation test

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시험관내 뿌리혹 생성 실험의 개선된 방법 (An Improved Method for Nodulation Test in Test Tube)

  • 고상균
    • 미생물학회지
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    • 제35권2호
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    • pp.169-172
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    • 1999
  • 한천 사면배지 대신 한지를 사용하여 시험관내 뿌리혹생성 실험방법을 개선하였다. 개선된 이 방법은 기존의 한천-시험관 법에 비해 전체 과정이 간단하며, 특히 굵고 단단한 유근을 갖는 콩과식물에서도 효과적으로 사용할 수 있다. 이 방법을 사용하여 Bradyrhizobium sp. CN9135을 접종한 차풀에서 접종후 7일째부터 조사된 식물개체의 6%에서 뿌리혹이 생기기 시작하여 14일 째에 조사된 모든 식물개체에서 뿌리혹이 생성되었다.

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Transposon Tn5 Mutagenesis of Bradyrhizobium japonicum: A Histidine Auxotrophic Mutant of B. japonicum Shows Defective Nodulation Phenotype on Soybean

  • So, Jae-Seong
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제5권2호
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    • pp.110-113
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    • 1995
  • Transposon Tn5 was used to induce random insertional mutations in Bradyrhizobium japonicum, a soybean endosymbiont. By genomic Southern blot analysis, transposition events were found to have occurred randomly throughout the B. japonicum genome. After screening 3, 626 mutants by auxotrophy test, a histidine auxotroph was isolated. Upon plant infection test, the His mutant showed a 3~4 day delay in nodule formation.

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벌노랑이로부터 Rhizobium loti 의 분리 동정 및 그 특성 (Isolation and Characterization of Ilhizobium loti from Lotus corniculatus var. japonicus)

  • 소병인;이강련;윤경하;고상균;이영록
    • 미생물학회지
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    • 제30권6호
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    • pp.450-455
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    • 1992
  • 대전 지역에서 자생하는 벌노랑이 (Lotus corniculatus var. japonicus) 의 뿌리혹으로부터 생장속도가 빠른 (fast-growing) 5균주를 분리하였다. 분리된 공생균주들은 형태적, 생리적 특성 및 뿌리혹형성 실험을 통하여 이 균주들은 Rhizobium loti 로 동정되었다. 분리균주로 접종시킨 벌노랑이 유식물에서 뿌리혹을 형성하였으며, 대조구와 비교하였을 때 정상적인 성장을 하는 것으로 보아 질소고정능을 갖는 (effect) 뿌리혹을 형성함을 알 수 있었다. 유도된 뿌리혹으로부터 재분리된 공생균주의 형태절 특성 및 항생제 내성에 대한 조사로부터 이들 뿌리혹은 1차 분리균주에 의해 형성된 것임을 알 수 있었다. 또한 이들은 Lotus corniculatus 에서도 질소고정능을 갖는 뿌리혹을 형성하였다. 분리균주 중 R. loti TUS2, TUS5 그리고 TUS8 은 calcofluor-binding exopolysaccharide(EPS) 를 생성하였다.

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토양별 근류균접종이 대두의 근류형성 및 질소개정활성에 미치는 영향 (The inoculation effect of R. japonicum on the nodulation and nitrogen fixation activity in Glycine max with the different kinds of soil.)

  • 유익동;김창진;김성훈;이윤;민태익
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제14권2호
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    • pp.187-192
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    • 1986
  • 대두근류균 접종제 개발을 목적으로 수집 분리되어 우수균주로 선발된 근류균(Rhizobium japonicum)을 대상으로 가기 재배경력이 상이한 3종류의 토양에 장엽콩을 공시 품종으로 하여 접종효과 시험을 실시하였다. 그 결과 근류형성정도 및 질소고정활성을 보면 근류균무접종구에 비하여 근류균을 접종함으로써 3토양 모두 현저한 근류형성 및 질소고정활성의 증가를 보였고 그에 따라 대두의 생육정도도 양호하여 평균 10%의 건물중의 증가를 보였다. 토양별 총질소고정활성의 증가지수는 개간전토양 238%. 미숙전토양 266%, 숙전토땅 157%로 개간전 및 미숙전토양에서 접종효과가 뚜렷하였다. 공시 근류균주별 접종효과는 Rhizobium japonicum R-214, R-138 균주가 우수한 접종효과를 나타냈다.

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동부류 근류균(根瘤菌)의 땅콩에 대한 근류형성(根瘤形成)과 질소고정(窒素固定) (Nodulation and Fixation in Groundnut by Cowpea Bradyrhizobia)

  • 김무기;박건호;소재돈;최대웅
    • 한국토양비료학회지
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    • 제25권1호
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    • pp.89-98
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    • 1992
  • 국내에서 분리(分離)된 73개의 땅콩 근류균(根瘤菌)과 31개의 도입된 Cowpea 근류균(根瘤菌)의 국내 땅콩 장려 품종(品種)에 대한 접종효과를 온실실험으로 조사하였던바 근류형성(根瘤形成)과 건물생산량 및 총(總) 질소함량(窒素含量)에서 다양한 변화(變化)를 보였다. 총(總) 건물생산량과 총(總) 질소함량(質素含量)의 서열간에 가장 높은 상관관계가 있었다. 조사된 균주중(菌株中)에서 51.9%, 26.4%, 21.7%가 각각 우량균주(優良菌株), 보통균주(普通菌株), 및 불량균주(不良菌株)로 나타났으며, JB7을 포함한 6개 균주가 가장 우수했다. 조사된 균주(菌株)는 YMA배지상에서의 생장특성에 따라 5개의 군(群)으로 분리되었다.

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Dual Inoculation of Native Rhizobium spp. and Arbuscular Mycorrhizal Fungi: An Impact Study for Enhancement of Pulse Production

  • Choudhury, Bula;Azad, Padum
    • Mycobiology
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    • 제32권4호
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    • pp.173-178
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    • 2004
  • Fifteen Rhizobium spp. from nodules of 6 common pulses collected from 6 districts of Assam were studied for their infectivity, intrinsic antibiotic resistance, nitrogenase activity and effect of dual inoculation with two native Arbuscular Mycorrhizal Fungi viz. Glomus mosseae(GM) and Gigaspora gilmarie(GG). Out of the 15 isolates 9 were found nodulation positive and 6 of them(AR1, BR8, BR12, AR10, UR10 & GR21) were subjected to intrinsic antibiotic sensitivity test of which AR1 showed resistance against all the 9 test antibiotics. Isolates AR1 and GR21 showed the highest(4.25 mole, $gm^{-1}hour^{-1}$) and the lowest(1.05 mole, $gm^{-1}hour^{-1}$) nitrogenase activity respectively. In Most Probable Number count, the maximum Rhizobium population $5.8{\times}10^5$, was found in both Blackgram and Greengram variety of pulses. The maximum dry weight of nodules(3.14 g), dry weight of shoot(10.08 g), nitrogen content(7.68 mg, $plant^{-1}$), chlorophyll content(1.89 mg, $g^{-1}$), phosphorus content of shoot(6.17 mg, $g^{-1}$) and yield(535.67 kg, $Ha^{-1}$) were found when AR1 dually inoculated with GM in Blackgram.

근류균과 숙주식물의 상호작용에 관한 렉틴의 역할 (Role of Lectins in Host Plant-Rhizobium Interactions)

  • 장무웅;전경희;박원학
    • 한국응용곤충학회지
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    • 제22권4호
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    • pp.293-299
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    • 1983
  • 강남콩 렉틴과 근류균(R. phaseoli)의 결합에 관한 광범위한 실험을 수행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 강남콩종자의 자엽에서 가장 많은 렉틴은 성장에 따라 뿌리로 이동하였는데 발아후 약 5일경에, 뿌리의 길이가 $6\~8cm$인 것이 가장 렉틴의 함량이 많았다. 2. 근류균의 배양시기에 따가 강남콩렉틴과의 응집력을 측정 한 결과 배양초기 가 후기보다 응집력이 높았다. 3. 강낭콩종자에 존재하는 렉틴을 추출 정제하여서 6종 근류균과의 응집력을 측정한 결과 R. phaseoli와의 응집이 가장 강했고 이는 렉틴에 대한 특이적 결합, 즉 숙주특이성을 입증하는 것이었다. 4. 단당류에 의한 응집반응의 경쟁적 저해를 시도함으로써 강남콩렉틴의 근류균에 대한 결합부위가 mannose와 galactose를 포함한 oligosaccharides가는 것을 알수 있었으며 이들의 저해효과에 필요한 당의 최소농도는 6.25mM로서 측정되었다. 5. R. phaseoli와 강낭콩 렉틴을 강낭콩 뿌리에 인공감염시켜본 결과 렉틴의 경쟁적 저해가 확인되었으므로 뿌리혹형성에 렉틴의 가교가 관여한다는 가설을 입증할 수 있었다. 6. Immunodiffusion에 의한 R. phaseoli의 항원 결정기는 R. japonicum과 일부 관련성이 있을뿐 다른 Rhizobium spp.과는 전혀 다른 것으로 나타났다.

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Bradyrhizobium japonicum의 공생효과(共生效果) 우수균주(優秀菌株) 선발(選拔)을 위한 면역혈청학적(免疫血淸學的) 접근(接近) (Serological Approach for Selection of Bradyrhizobium japonicum Strain with Superior Symbiotic Effectiveness)

  • 강위금;하호성;박경배;이상규;임동규;양민석
    • 한국토양비료학회지
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    • 제29권2호
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    • pp.165-172
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    • 1996
  • 콩의 공중질소이용도(空中窒素利用度) 향상에 바람직한 우수근류균(優秀根瘤菌) 선발(選拔)의 기초자료를 얻고자 우리나라 토착(土着) B. japonicum 의 혈청형별(血淸型別) 콩 공생효과(共生效果)와 그 유의성(有意性)을 분석한 결과는 다음과 같았다. 1. 근류균(根瘤菌)의 근류형성정도(根瘤形成程度)는 USDA 123혈청형(血淸型) 균주(菌株)를 접종한 구에서 가장 높고 다음으로 YCK 150혈청형(血淸型) > YCK 117혈청형(血淸型) > YCK 141혈청형(血淸型) > USDA 110 혈청형(血淸型) 순위의 경향이었는데, 콩 품종별(品種別) 혈청형(血淸型)에 따라서 상이하였다. 2. 콩 건물생산(乾物生産)에 있어서 근류균(根瘤菌) 접종효과(接種效果)는 콩 품종별로 상이하였으나 평균적으로 볼 때, USDA 110혈청형(血淸型)과 YCK 141혈청형(血淸型) 균주(菌株)의 접종구에서 우수하였고 USDA 123 혈청형(血淸型) 균주(菌株)의 접종구(接種區)에서는 저조하였다. 그리고 균주접종(菌株接種)에 따른 건물생산량(乾物生産量)이 가장 높았던 콩은 방사(放射)콩이었다. 3. 혈청형내(血淸型內) 균주(菌株)들의 공생효과(共生效果) 유사성(類似性)(n=20)은 근류수에서 100%, 질소고정력에서 90%, 콩 건물중에서 80% 수준(水準)이었으며, 균주(菌株)의 공생관계(共生關係) 변이분석(變異分析)에서는 또 각 혈청형간(血淸型間), 콩 품종간(品種間)에 근류수와 근류무게, 질소고정력, 콩 건물중 모두 고도(高度)의 유의성(有意性)($$P{\leq_-}0.01$$)을 보였다. 그러므로 B. japonicum 의 면역혈청학적(免疫血淸學的) 특성은 콩의 공중질소이용도(空中窒素利用度) 개선연구(改善硏究)에 이용가치가 높은 것으로 판단되었다.

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알팔파근류균(根瘤菌)의 분리(分離) 및 질소고정능력(窒素固定能力)의 비교(比較) (Isolation of Alfalfa Nodule Bacteria ana Assessement of their Nitrogen Fixing Capacities)

  • 최우영;김성열
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제22권3호
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    • pp.166-172
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    • 1979
  • 두과목초(荳科牧草)의 증산(增産)과 질산비료(窒酸肥料)의 소비절약(消費節約)을 위(爲)하여 근류균(根瘤菌)의 실용화(實用化)를 위(爲)한 일련(一連)의 연구(硏究)를 시도(試圖)하고 그 기초연구(基礎硏究)로서 알팔과군(群)을 대상(對象)으로 근류균(根瘤菌)을 분리(分離)하고 우수균주(優秀菌株)를 선발(選拔)하였다. 1. 대관령(大關嶺), 제주도(濟州道) 및 기타지역(其他地域)에서 수집(蒐集)한 근류(根瘤)로부터 47주(株)의 근류균(根瘤菌)을 분리(分離)하였다. 2. 분리균주(分離菌株)에 대(對)하여 형태적(形態的) 및 배양적(培養的) 성질(性質)을 검토(檢討)하는 동시(同時)에 항원(抗原)의 특성(特性)을 비교(比較)하고 lysogeny 여부(與否)를 확인(確認)한 결과(結果) : (1) yeast mannitol broth 및 agar 상(上)에서의 생육형태(生育形態) 및 증식속도(增殖速度)를 달리하였으며 congo red에 의한 착색정도(着色程度)에도 차이(差異)가 있었고 (2) 항원성(抗原性)의 상호(相互) 근연성(近緣性)이 인정(認定)적는 균주(菌株)는 M-11/SU47, M-13/M-15 및 M-3/M-5 이었으며 (3) latent phage의 감염균주(感染菌株)가 발견(發見)되지 않았다. 3. 항온조명실내(恒溫照明室內)에서 행(行)한 시험관법(詩驗管法)에 의한 식물접종시험(植物接種試驗)을 통(通)하여 분리균주(分離菌株)의 근류형성(根瘤形成) 및 질소고정능력(窒素固定能力)을 비교한 결과(結果), 공시숙주식물(供試宿主植物)에 대(對)하여 근류(根瘤)를 형성(形成)하지 못하는 즉(卽) 친화력(親和力)이 없는 균주(菌株), 근류(根瘤)는 형성(形成)하나 숙주식물(宿主植物)의 생육(生育)에는 영향(影響)을 주지 못하는 무효균주 그리고 숙주식물(宿主植物)의 생육(生育)을 크게 촉진(促進)하는 유효균주등으로 구분(區分)할 수 있었으며 특(特)히 유효균주중에서 M-8, 9, 14, 20, 21, 25 및 34균주등(菌株等)은 질소시용구(窒素施用區) 수준(水準) 또는 그 이상(以上)으로 숙주식물(宿主植物)의 생육(生育)에 유효한 결과(結果)를 나타내었다.

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완두 및 대두근류균(根瘤菌)의 분리(分離) 및 질소고정능력(窒素固定能力)의 비교(比較) (Isolation of Pea and Soybean Nodule Bacteria and Assessment of their Nitrogen-fixing Capacities)

  • 김성열;최우영
    • 농업과학연구
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    • 제5권2호
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    • pp.136-144
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    • 1978
  • 두과작물(荳科作物)의 증산(增産)과 질소비료(窒素肥料)의 소비절약(消費節約)을 위(爲)하여 근류균(根瘤菌)의 실용화(實用化)를 위(爲)한 일련(一連)의 연구(硏究)를 시도(試圖)하고 그 기초연구(基礎硏究)로서 완두와 대두군(群)을 대상(對象)으로 근류균(根瘤菌)을 분리(分離)하고 우수균주(優秀菌株)를 선발(選拔)하였다. 1. 대관령(大關嶺), 제주도(濟州道) 및 기타지역(其他地域)에서 수집(蒐集)한 근류(根瘤)로 부터 완두군(群) 22주(株), 대두군(群) 88주(株)의 근류균(根瘤菌)을 분리(分離)하였다. 2. 분리균류(分離菌瘤)에 대(對)하여 형태적(形態的) 및 배양적(培養的) 성질(性質)을 검토(檢討)하는 동시(同時)에 항원(抗原)의 특성(特性)을 비교(比較)하고 lysogeny 여부(與否)를 확인(確認)한 결과(結果) : (1) yeast mannitol broth 및 agar상(上)에서의 생육형태(生育形態) 및 증식속도(增殖速度)를 달리하였으며 congo red에 의한 착색정도(着色程度)에도 차이(差異)가 있었고 (2) 항원성(抗原性)의 상호(相互) 근록성(近緣性)이 인정(認定)되는 균주(菌株)는 대두군(群) G-8/G-9/D216 및 G-20/G-52이었으며; (3) latent phage의 감염균주(感染菌株)가 발견(發見)되지 않았다. 3. 항온조명실내(恒溫照明室內)에서 행(行)한 시험관(試驗管) 및 bottle법(法)에 의한 식물접종시험(植物接種試驗)을 통(通)하여 분리균주(分離菌株)의 근류형성(根瘤形成) 및 질소고정능력(窒素固定能力)을 비교한 결과, 각군별(各群別)로 공시숙주식물(供試宿主植物)에 대(對)하여 근류(根瘤)를 형성(形成)하지 못하는 즉친화력(卽親和力)이 없는 균주(菌株), 근류(根瘤)는 형성(形成)하나 숙주식물(宿主植物)의 생육(生育)에는 영향(影響)을 주지 못하는 무효균주(無效菌株) 그리고 숙주식물(宿主植物)의 생육(生育)을 크게 촉진(促進)하는 유효균주등(有效菌株等)으로 구분(區分)할 수 있었으며 특(特)히 각군별(各群別) 유효균주중(有效菌株中)에서 완두군(群)의 P-3, 4 및 8균주(菌株); 대구군(群)의 G-23 및 27 균주등(菌株等)은 질소시용무접종구(窒素施用無接種區) 수준(水準) 또는 그 이상(以上)으로 숙주식물(宿主植物)의 생육(生育)에 유효(有效)한 결과(結果)를 나타내었다.

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