Objectives : Oxidative stress has a critical role in neurodegenerative diseases. In this study, we investigated the antioxidant and neuroprotective effects of the ethanolic extract of Banryong-hwan (BRHE) in SH-SY5Y cells and primary rat mesencephalic dopaminergic neurons. Methods : To assess the antioxidant effects, we carried out 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH) free radical scavenging assay, 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid)(ABTS) radical cation decolorization assay, and determination of total polyphenolic content. We evaluated the effect of BRHE treatment on neuroprotection against 6-hydroxydopamine(6-OHDA) toxicity using thiazolyl blue tetrazolium bromide(MTT) assay, nitric oxide(NO) assay, reactive oxygen species(ROS) assay in SH-SY5Y cells and tyrosine hydroxylase(TH) immunocytochemistry in primary rat mesencephalic dopaminergic neurons. Results : BRHE showed IC50 values of 328.10 ${\mu}g/mL$ and 43.12 ${\mu}g/mL$ in DPPH assay and in ABTS assay, respectively. Total polyphenolic content was 180.76 ${\mu}g/mL$. In SH-SY5Y cells, BRHE significantly attenuated the toxicity induced by 6-OHDA at the concentrations of 25-100 ${\mu}g/mL$ pre- and post- treatment in MTT assay. While 6-OHDA increased the NO and ROS contents, BRHE decreased them in a dose dependent manner. Moreover, in primary dopaminergic neuron culture, BRHE significantly protect-ed the dopaminergic cell loss against 6-OHDA toxicity up to 136% at the concentration of 75 ${\mu}g/mL$. Conclusions : These results demonstrate that BRHE has neuroprotective effect against 6-OHDA induced neurotoxicity through decreasing NO and ROS generation.
Kim, Ho;Lee, Shin-Rye;Park, Hae-Chul;Lee, Won-Ha;Lee, Myung-Shik;Suk, Kyoung-Ho
IMMUNE NETWORK
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제11권6호
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pp.342-347
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2011
Background: Glial cells are involved in immune and inflammatory responses in the central nervous system (CNS). Glial cells such as microglia and astrocytes also provide structural and functional support for neurons. Migration and morphological changes of CNS cells are associated with their physiological as well as pathological functions. The secreted protein lipocalin-2 (LCN2) has been previously implicated in regulation of diverse cellular processes of glia and neurons, including cell migration and morphology. Methods: Here, we employed a zebrafish model to analyze the role of LCN2 in CNS cell migration and morphology in vivo. In the first part of this study, we examined the indirect effect of LCN2 on cell migration and morphology of microglia, astrocytes, and neurons cultured in vitro. Results: Conditioned media collected from LCN2-treated astrocytes augmented migration of glia and neurons in the Boyden chamber assay. The conditioned media also increased the number of neuronal processes. Next, in order to further understand the role of LCN2 in the CNS in vivo, LCN2 was ectopically expressed in the zebrafish spinal cord. Expression of exogenous LCN2 modulated neuronal cell migration in the spinal cord of zebrafish embryos, supporting the role of LCN2 as a cell migration regulator in the CNS. Conclusion: Thus, LCN2 proteins secreted under diverse conditions may play an important role in CNS immune and inflammatory responses by controlling cell migration and morphology.
Taste-responsive neurons in the nucleus of the solitary tract (NST), the first gustatory nucleus, often respond to thermal or mechanical stimulation. Alcohol, not a typical taste modality, is a rewarding stimulus. In this study, we aimed to investigate the effects of ethanol (EtOH) and/or temperature as stimuli to the tongue on the activity of taste-responsive neurons in hamster NST. In the first set of experiments, we recorded the activity of 113 gustatory NST neurons in urethane-anesthetized hamsters and evaluated responses to four basic taste stimuli, 25% EtOH, and 40℃ and 4℃ distilled water (dH2O). Sixty cells responded to 25% EtOH, with most of them also being sucrose sensitive. The response to 25% EtOH was significantly correlated with the sucrose-evoked response. A significant correlation was also observed between sucrose- and 40℃ dH2O- and between 25% EtOH- and 40℃ dH2O-evoked firings. In a subset of the cells, we evaluated neuronal activities in response to a series of EtOH concentrations, alone and in combination with 32 mM sucrose (EtOH/Suc) at room temperature (RT, 22℃-23℃), 40℃, and 4℃. Neuronal responses to EtOH at RT and 40℃ increased as the concentrations increased. The firing rates to EtOH/Suc were greater than those to EtOH or sucrose alone. The responses were enhanced when solutions were applied at 40℃ but diminished at 4℃. In summary, EtOH activates most sucrose-responsive NST gustatory cells, and the concomitant presence of sucrose or warm temperatures enhance this response. Our findings may contribute to elucidate the neural mechanisms underlying appetitive alcohol consumption.
The aim of this study is to identify central neural pathway of neurons following the projection to the large intestine and Hapgok(LI4) which is Won acupoint of the large intestine meridian of hand-yangmyeong. In this experiment, Bartha's strain of pseudorabies virus was used to trace central localization of neurons related with large intestine and acupoint(LI4) which has been known to be able to regulate intestinal function. The animals were divided into 3 groups: group 1, injected into the large intestine; group 2, injected into the acupoint(LI4); group 3, injected into the acupoint(LI4) after severing the radial, ulnar, median nerve. After four days survival of rats, PRV labeled neurons were identified in the spinal cord and brain by immunohistochemical method. First-order PRV labeled neurons following the projection to large intestine, acupoint(LI4) and acupoint(LI4) after cutting nerve were found in the cervical, thoracic, lumbar and sacral spinal cord. Commonly labeled neurons were labeled in the lumbosacral spinal cord and thoracic spinal cord. They were found in lamina V- X, intermediomedial nucleus and dorsal column area. The area of sensory neurons projecting was L5-S2 spinal ganglia and T12-L1 spinal ganglia, respectively. In the brainstem, the neurons were labeled most evidently and consistently in the nucleus tractus solitarius, area postrema, dorsal motor nucleus of vagus nerve, reticular nucleus, raphe nuclei(obscurus, magnus and pallidus), C3 adrenalin cells, parapyramidal area(lateral paragigantocellular nucleus), locus coeruleus, subcoeruleus nucleus, A5 cell group, periaqueductal gray matter. In the diencephalon, PRV labeled neurons were marked mostly in the arcuate nucleus and median eminence. These results suggest that overlapped CNS locations are related with autonomic nuclei which regulate the functions of large intestine-related organs and it was revealed by tracing PRV labeled neurons projecting large intestine and related acupoint(LI4).
Kim, Ji Hyun;Cho, Kwang Ho;Jin, Zhe Wu;Murakami, Gen;Abe, Hiroshi;Chai, Ok Hee
Anatomy and Cell Biology
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제51권4호
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pp.266-273
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2018
The ganglion cardiacum or juxtaductal body is situated along the left recurrent laryngeal nerve in the aortic window and is an extremely large component of the cardiac nerve plexus. This study was performed to describe the morphologies of the ganglion cardiacum or juxtaductal body in human fetuses and to compare characteristics with intracardiac ganglion. Ganglia were immunostained in specimens from five fetuses of gestational age 12-16 weeks and seven fetuses of gestational age 28-34 weeks. Many ganglion cells in the ganglia were positive for tyrosine hydroxylase (TH; sympathetic nerve marker) and chromogranin A, while a few neurons were positive for neuronal nitric oxide synthase (NOS; parasympathetic nerve marker) or calretinin. Another ganglion at the base of the ascending aorta carried almost the same neuronal populations, whereas a ganglion along the left common cardinal vein contained neurons positive for chromogranin A and NOS but no or few TH-positive neurons, suggesting a site-dependent difference in composite neurons. Mixtures of sympathetic and parasympathetic neurons within a single ganglion are consistent with the morphology of the cranial base and pelvic ganglia. Most of the intracardiac neurons are likely to have a non-adrenergic non-cholinergic phenotype, whereas fewer neurons have a dual cholinergic/noradrenergic phenotype. However, there was no evidence showing that chromogranin A- and/or calretinin-positive cardiac neurons corresponded to these specific phenotypes. The present study suggested that the ganglion cardiacum was composed of a mixture of sympathetic and parasympathetic neurons, which were characterized the site-dependent differences in and near the heart.
Glutamate is a putative excitatory neurotransmitter in the central nervous system. The present study utilizing monoclonal antibodies against fixative-modified glutamate analyzed the distribution of glutamate-immunoreactive neuronal elements in the dog basilar pons. The glutamatergic neurons were present throughout the rostrocaudal extent of the basilar pons, predominantly to the medial and ventral subdivisions. Labelled cells were relatively sparse in the midline region of the medial nucleus and most lateral area of the lateral nucleus. The majority of glutamate-immunoreactive neuronal somata in the basilar pons was multipolar-shaped, and the size was in the range of 15-25 ${\mu}$m in diameter. Glutamate-immunoreactive axons and terminals were also observed at specific regions of the basilar pons. These observations provide evidence that this excitatory neural element functions in a multisynaptic pathway involving glutamatergic afferents to the basilar pons, pontocerebellar projection neurons, and the granule cells of the cerebellar cortex.
Repair mechanisms in the postnatal and mature central nervous system(CNS) have long been thought to be very limited. However recent works have shown that the mature CSN contains neural progenitors, precursors, and stem cells that are capable of generating new neurons, astrocytes, and oligodendrocytes especially in germinative areas such as the subventricular zone of the lateral ventricles, the dentate gyrus of the hippocampus. These findings raise the possibilities for the development of novel neural repair strategies via mobilization and replacement for dying neurons of neural stem cells in situ. Indeed recent reports have provided evidences that endogenous stem cells are activated in response to various injuries, and in some injury models, limited neuronal replacement occurs in the CNS. Here, current understandings for endogenous neurogenesis and induction neurogeneis in postnatal CNS including neonatal brain are summarized and discussed.
A retrograde tracer, WGA-apo-HRP-gold, was injected into midline thalamic nuclei and subsequently orexin-A immunostaining was performed on the tuberal region of the hypothalamus in order to investigate orexinergic projections to the midline thalamus. Injection site was targeted within one specific region, i.e., paraventricular, centromedian, rhomboid, reuniens, or intermediodorsal nucleus, but it proved to be either one or a combination of these thalamic nuclei. The distribution of WG/orexin-double-labeled neurons exhibited a general pattern in that the majority of labeled cells were observed within the ventral portion of the lateral hypothalamus as well as the perifornical nucleus (PeF). A small number of double-labeled cells were also observed at the dorsomedial nucleus, the area dorsal to the PeF, dorsal portion of the lateral hypothalamus, and the posterior hypothalamus. These orexin-immunoreactive neurons might have wake-related influences over a variety of functions related with midline thalamic nuclei, which include autonomic control, associative cortical functions, and limbic regulation.
포유류 동물의 시각피질 세포에 나타나는 특징은 크게 단순특징을 추출하는 simple cell과 복잡한 특징에 반응하는 complex cell로 구분된다. 특히, 하위 계층의 세포들은 단순특징을 추출하며, 상위 계층으로 갈수록 복합특징을 추출하는 세포들이 존재한다. 이 연구에서는 입력영상에 독립성분분석을 적용하여 complex cell에 대응하는 복잡한한 특징을 추출하였다. 이 결과는 시각피질 세포의 정보처리에 대한 방식에 대한 이해를 기반으로 시각정보처리 알고리즘을 개발하는 데 기여할 것이다.
Stress severely disturbs physiological and mental homeostasis which includes adult neurogenesis in hippocampus. Neurogenesis in hippocampus is a key feature to adapt to environmental changes and highly regulated by multiple cellular signaling pathways. The primary cilium is a cellular organelle, which acts as a signaling center during development and neurogenesis in adult mice. However, it is not clear how the primary cilia are involved in the process of restraint (RST) stress response. Using a mouse model, we examined the role of primary cilia in repeated and acute RST stress response. Interestingly, RST stress increased the number of ciliated cells in the adult hippocampal dentate gyrus (DG). In our RST model, cell proliferation in the DG also increased in a time-dependent manner. Moreover, the analysis of ciliated cells in the hippocampal DG with cell type markers indicated that cells that were ciliated in response to acute RST stress are neurons. Taken together, these findings suggest that RST stress response is closely associated with an increase in the number of ciliated neurons and leads to an increase in cell proliferation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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