This study was carried out to get infomation on the nitric oxide production ability and its formation mechanisms of polysaccharides extracted from Ganoderma lucidum(PSG) by using murine macrophage cell line. The cultured mycelial cells of Ganoderma lucidum were extracted by alkali, and than neutralized by acid. The extract were passed through the column of DEAE cellulose for more purification. The neutral fraction was concentrated and precipitated with 95% ethanol. The precipitate was lyophilized and PSG was obtained. The immunomodulating effects of PSG on macrophage were performed by using murine macrophage cell line ATCC TIB 71 cells with PSG 0.5mg. PSG alone could not induce the production of nitrite, but it had a significant potential effect on nitrite secretion when the cells were primed and triggered with BCG and Interferon(IFN)-${\gamma}$. Also it was prominent by using calcium channel blocker(verapamil) and adenylate cyclase activator(forskolin).
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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pp.139.2-139.2
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2003
The in vitro effects of extracted fractions of C. militaris on the secretion of cytokines in murine macrophage cell line, RAW 264.7 were studied. F1 (crude cordycepin containing adenosine), F2 (ethanol precipitation), F3 (ethanol soluble supernatant) and F4 (fraction of through SK-1B) significantly stimulated the production of cytokine and nitric oxide (NO) on murine macrophage cell line RAW264.7. We examined how the ethanol extract of C. militaris regulates production of interleukine 1-beta(IL-1$\beta$), tumor necrosis factor-alpha (TNF-$\alpha$), and NO in vitro. (omitted)
A murine leukemia x LM fibroblast hybrid cell line with immune augmenting properties stimulated resistance to Mycobacterium avium complex (MAC) in mouse peritoneal macrophages, and in immune deficient beige mice (C57BL/6/bgj/bgj). The proliferation of MAC in mouse peritoneal macrophages was inhibited by medium conditioned by the growth of the hybrid cells (hybrid cell-CM). Under similar circumstances, media conditioned by the growth of LM cells (LM cell-CM), a mouse fibroblast cell line used as one parent in forming the hybrid cell, was exhibited no inhibitory effect. Treatment of mouse peritoneal macrophages with hybrid cell-CM, but not with LM cell-CM, stimulated the expression of each of four previously described macrophage activation antigens, suggesting that the hybrid cells formed immunomodulators in addition to those formed by LM cells. Furthermore, the morphology of the macrophages following treatment with hybrid cell-CM was clearly distinguishable from that following exposure of the cells to LM cell-CM. The therapeutic effects of hybrid cells on the progression of MAC-infection were indicated by the prolonged survival of MAC-infected immune-deficient beige mice. One hundred percent of treated animals survived more than 60 days, while untreated animals died in approximately 22 days.
The oxidative modification of low density lipoprotein(LDL) has been implicated in the development of atherosclerosis . Oxidized LDL(oxLDL) are found in macrophage foam cell , and it can induce an macrophage proliferation in atherosclerotic plaque. In this study, we investigated the hypothesis that Tokhwalkisaengtang(TK) may reduce atherosclerosis by lowering the oxidizability of LDL, To achieve this goal, we examined the effect of TK on LDL oxidation, nitric oxide production in murine macrophage cell line , and the effect of TK on cupuric sulfate-induced cytotoxicity. LDH release, and macrophage activity TK inhibited the generation of oxLDL from native LDL in macrophage cell culture, and decreased the release of LDH from cupric sulfate-stimulated macrophage. In other experiments, TK activated macrophase cell, and increased the survival rate, and enhanced nitric oxide production in macrophage.
Park, Young-Mi;Kim, In-Tae;Jung, Jin-Hyun;Mun, Han-Seo;Lee, Kyung-Tae
대한약학회:학술대회논문집
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대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.1
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pp.209.2-210
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2003
Nitric oxide (NO) and prostagladins(PGs) produced by inducible nitric oxide synthase(iNOS) and cyclooxygenase(COX-2) are known as inflammatory mediator. Modulation of these enzymes, induced by many stimuli(LPS, IFN-gamma, TNF-alpha, phorbol ester, etc), is a potent strategy as treatment of inflammatory diseases. Treatment of murine macrophage RAW 264.7 cell line with indole compound(IND-6) markedly reduced lipopolysacchride(LPS) stimulated NO production in a concentration-related manner. (omitted)
Three TNF-$\alpha$inhibitory lignans were isolated from the flower buds of Magnolia fargesii through bioassay-guided isolation. They were identified as eudesmin, magnolin and lirioresinol-B dimethylether on the basis of their spectroscopic data. All three lignans showed inhibitory effects on TNF-$\alpha$ production in LPS-stimulated murine macrophage cell line, RAW264.7 and eudesmin showed the strongest activity ($IC_{50}=51{\mu}M)$.
Monocytes and macrophages playa major role in defense mechanism of the host response to tumor, in part through the secretion of several potent products and macrophage cytokines. Monocytes and tissue macro phages produce at least two groups of protein mediators of inflammation, interleukin 1 (IL-1) and tumor necrosis factor (TNF). Recent studies emphasizes that TNF and IL-1 modulate the inflammatory function of endothelial cells, leukocytes, and fibroblasts. In this study, our work is directed toward studying the in vitro effects of Korean propolis on the ability to induce cellular and secretory responses in murine macrophage cell line, RAW 264.7. It was found that Water Extract of Korean Propolis (WEP) could activate macro phages by producing cytokines. The production of the macrophage cytokines, IL-1 and TNF-$\alpha$, by RAW 264.7 treated with WEP was examined from 2.5 $\mu\textrm{g}$/ml up to 25 $\mu\textrm{g}$/ml with dose dependent manner. Nitric oxide (NO) production was also increased when cells were exposed to combination of LPS and WEP from 2.5 $\mu\textrm{g}$/ml up to 25 $\mu\textrm{g}$/ml. At high dose of WEP (50 to 100 $\mu\textrm{g}$/ml) used to prescribe for anti-inflammatory and analgesic medicine showed inhibition of NO production in LPS-stimulated macrophage. Besides cytokine production, NO release, surface molecule expression and cell morphologic antigen expression were increased in response to the stimulation by WEP. These results suggested WEP may function through macrophage activation.
Bifidobacterium has been previously shown to potentiate immune function, which was mediated through the stimulation of cytokine production by macrophage. This study was performed to further characterize the effective component of Bifidobacterium by measuring the level of interleukin (IL)-6 cytokine using the RAW 264.7 murine cell line as a macrophage model. RAW 264.7 cells were cultured for 24 h in the presence of whole cells (WCs), cell walls (CWs), and cell-free extracts (CFEs) from various strains of Bifidobacterium and other lactic acid bacteria at various concentrations. The most effective component was different depending on the strains and the concentrations used. When tested with each cell fraction from Bifidobacterium sp. BGN4, heat treatment of the cell fractions lowered the production of IL-6. Synergistic effect was obtained, especially when CWs and CFEs were combined. Sonicated WCs stimulated IL-6 production more than intact WCs. The in vitro approaches employed here should be useful in further characterization of the effects of Bifidobacterium on gastrointestinal and systemic immunity.
We have cloned the mouse neurotensin/neuromedin N (NT/N) gene from the murine mast cell line Cl.MC/C57.1 for the first time. The murine NT/N cDNA clone consisted of 765 nucleotides and coded for 169 peptide residues with an N-terminal signal peptide, and the C-terminal region contained of one copy of neurotensin (NT) and one copy of neuromedin N (NN). Total of four Lys-Arg dibasic motifs were present; one each at the middle of the open reading frame, at the N-terminal of NN, at the C-terminal of NT, and between NN and NT. Amino acid sequence analysis of the mouse NT/N revealed 90% homology to that of the rat NT/N gene. NT/N is expressed in murine mast cell lines (Cl.MC/C57.1 and P815), but not in murine bone marrow-derived mast cells (BMMCs), murine macrophage cell line (RAW 264.7), nor in murine T cell line (EL-4). NT/N mRNA in C1.MC/C57.1 is highly inducible by IgE cross-linking, phorbol myristate acetate, neurotensin, and substance P. Following the treatment of demethylating agent, 5-azacytidine (5-azaC), the NT/N gene was induced in BMMCs in response to IgE cross-linking. 5-azaC-treated BMMCs did not express the NT/N gene without additional stimuli. These findings suggested that the regulation of NT/N gene expression was dependent on the effects of not only gene methylation but also enhancer and/or repressor proteins acting on the NT/N promoter.
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