New method to obtain Intravascular Bonghan ducts of rats and mice were developed By extracting blood from caudal veins and arteries that were hold by forceps we took broken pieces of BHDs which were examined using microscopes. The advantage of this method is to gain the pure BHD without fibrin, and its disadvantage is the smallness of the sample.
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2017.06a
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pp.87-87
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2017
Flowering time of either early or late is one of the crucial parameters that determine the crop productivity. Therefore, elucidation of regulatory mechanisms of flowering time should contribute to breeding for yield enhancement. However, comprehensive explanation on molecular mechanism of flowering has not yet been reported in hexaploidy common wheat (Triticum asetivum L.). The mechanism of flowering in wheat has been studied mostly using flag leaf or floral meristem. The exposed peduncle, which is a shoot part between bottom of the spike and flag leaf, could be an important tissue that is responsible for flowering through various molecules expressing. To clarify for transcriptomic dynamics in the wheat peduncle that was uncovered by leaf sheath of flag leaf, RNA sequencing and transcriptomic analysis were conducted. With this, we also analyzed other transcriptomic results deposited in the public DB to identify genes specially expressed in peduncle tissue at transition from vegetative to reproductive phase. The obtained results will provide valuable information to understand the role of peduncle for flowing regulation in wheat aimming for elucidation of the regulatory mechanism of wheat flowering.
Traditionally, genetic variability is generated by an extensive crossing program, which is complemented by strict selection to identify useful new recombinants. Plant biotechnology offers many opportunities for breeders to solve certain breeding problems at the molecular level. The tissue culture methodology and the genetic modification of economically important monocotyledons have undergone a revolution in the last decade. As the production of transgenic plants is a complex procedure, including the uptake of DNA molecules into the cells, the integration of foreign nucleotide sequences into the host genomic DNA and the expression of new genes in a controlled way, and as there are still many unsolved questions, further development is necessary. The methodology opens up the possibility of introducing novel genes that may induce resistance to diseases and abiotic stresses, allow the modification of dough quality and the dietetic quality of proteins, and increase the levels of micronutrients such as iron, zinc, and vitamins. In the present review, the authors would like to summarise the most important advances in wheat transformation.
Stock enhancement is considered to be a valuable approach for restoring fishery resources. Because no specific official institution in Taiwan is responsible for the production of fry, the released fry are purchased directly from the private sector. However, fishermen from the private industry have not established a genetic background, so the genetic composition for each batch of released fry is unclear. Mangrove red snapper (Lutjanus argentimaculatus), a prominent species released in Taiwan, was collected after its official release. One hundred and two field samples were compared with four batches of hatchery fry (n = 685) by using a microsatellite-based multiplex PCR assay. Four of the field samples (3.9%; 4/102) were revealed to be from a fish farm and most likely from a single batch. This study revealed that wild mangrove red snappers are genetically different from those originating from farms, and their origins can be traced through molecular markers, even without information on breeding stocks.
The total proteins were estimated in both deoxycholate (DOC)-extract of sperm membrane and seminal plasma of chilled as well as frozen semen obtained from five Murrah buffalo bulls. Proteins were further characterized by polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) in three bulls. The protein content of sperm membrane extract (SME) and that of seminal plasma (SP) decreased gradually with increase in freezing period from 6 to 24 mo when compared with the values observed in freshly chilled semen in all bulls. The total decrease in protein content of SME and SP varied from 30-40% and 28-59% respectively during 6-24 mo of freezing. The number of glycoproteins/proteins (GP/P) in SME varied from 4-8 in freshly-chilled semen of all bulls and reduced to 2-4 after 24 mo of freezing. In SP, the number of proteins varied from 6-10 in freshly chilled semen of all bulls and reduced to 3-8 after 24 mo of freezing. Some of the proteins in SME and SP disappeared, others got altered and appeared with change in molecular weight after different freezing times. These studies reveal that alterations in the sperm membrane proteins may be responsible for damage to their membrane during freezing and thus lowering their fertilizability.
An 1.4 kb of the fad3 cDNA encoding microsomal linoleic acid desaturase catalyzing the conversion of linoleic acid (18:2, ${\omega}-6$) to linolenic acid (18:2, ${\omega}-3$) was introduced into tobacco plants by the Agrobacterium-mediated plant transformation, Among the transgenic tobacco plants conferring kanamycin resistance, five transformants showing increment in unsaturated fatty acid contents were selected and further analyzed for the transgenecity, In genomic Southern blot analyses, copy numbers of the integrated fad3 DNA in chromosomal DNA of the five transgenic tobacco plants were varied among the transgenic lines. By Northern blot analyses, the abundancy of the fad3 mRNA transcript directed by Cauliflower Mosaic Virus 35S promoter was consistent with the relative copy number of the fad3 DNA integrated in the chromosome of transgenic tobacco plants. When compared with the wild type, accumulation of linolenic acid in transgenic tobacco roots was elevated 3.7- to 4.7-fold showing a corresponding decrease in the linoleic acid contents; however, slight increments for linolenic acid were noticed in transgenic leaf tissues. These results indicated that the elevated level of fad3 expression is achieved in transgenic tobacco plants.
Proceedings of the Microbiological Society of Korea Conference
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1991.04a
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pp.237-242
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1991
In order to increase the production of glutathione by maximizing the expression of recombinant gsh plasmids, two genes responsible for the biosynthesis of glutathione were cloned. A gshI gene was cloned onto pBR322 plasmid as 3.6Kb PstI DNA fragment from E. coli K-12 chromosomal DNA. Also gshII gene was cloned onto pUC13 plasmid as 2.2Kb PstI-BamHI DNA fragment. In order to improve the glutathione producing activity more efficiently, various recombinant plasmids containing tandem repeated gshI genes or both genes in various copy number onto the same vector were constructed. E. coli cells harboring pGH501 plasmid (pUC8-gshI$\cdot$I$\cdot$II) showed the highest glutathione synthesizing activity. The conditions for glutathione production with an ATP-generating system such as acetate kinase reaction of E. coli cells or glycolytic pathway of yeast cells were examined using the E. coli cells harboring the pGH501 plasmid. When the acetate kinase reaction of E. coli cells was used as an ATP generating system, 20mM of L-csteine was converted into glutathione with a yield of $100\%$.
We have developed a polymerase chain reactionrestriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) marker that can distinguish male-fertile (N) and male-sterile (S) cytoplasm in onions. The PCR-RFLP marker was located in a chloroplast psbA gene amplicon. Digesting the amplicons from different cytoplasm-containing varieties with the restriction enzyme MspI revealed that N-cytoplasm plants have a functional MspI site (CCGG), whereas the S-cytoplasm plants has a substitution in that site (CTGG), and thus no MspI target. The results obtained using this PCR-RFLP marker to distinguish between cytoplasmic male sterile factors in 35 onion varieties corresponded with those using a CMS-specific sequence-characterized amplified region (SCAR) marker. Moreover, the PCR-RFLP marker can identify N- ot S-cytoplasms in DNA sample mixtures in which they are in up to a 10-fold minority, indicating that use of the marker has high diagnostic precision. We also demonstrated the usefulness of the SNP detected in the psbA gene for high-throughput discrimination of CMS factors using Real-time PCR and a TaqMan probe assay.
Natural-killer-cell-enhancing factor (NKEF) belongs to the newly defined peroxiredoxin (Prx) family. It was originally isolated from human erythroid cells. The black rockfish NKEF cDNA was identified through the expressed sequence tag (EST) analysis of PBLs libraries. The full-length NKEF cDNA was 1433 bp long and contained an open reading frame (ORF) of 594 bp that encoded 198 amino-acid residues. The 5' UTR had a length of 39 bp, and the 3’UTR 800 bp. The deduced amino-acid sequence of the black rockfish had a density 93.4, 92.9, 87.8, 85.8, 84.8, 83.8, 80.3, 79.7, 77.2, and 75.2% that of the pufferfish, olive flounder, channel catfish, zebrafish, chicken, common carp, Myotis lucifugus, cattle, human PrxI, rat PrxI, human NKEF-A, and Xenopus tropicalis, respectively. The NKEF gene was expressed in all the tissues of the black rockfish. The RT-PCR indicated that the NKEF transcripts were predominantly in the spleen and gill, less dominantly in the PBLs, head kidney, trunk kidney, and liver, and least in the intestine and muscles. This is the first report on the existence of the NKEF-A gene in black rockfish.
In an effort to optimize tissue culture conditions for genetic transformation of orchardgrass (Dactylis glomerata L.), an efficient and high-frequency plant regeneration system from seed-derived calli was established. Embryogenic calli induced on MS medium containing 3mg/L 2,4-D and 0.1mg/L BA had significantly improved regeneration ability. Plant regeneration rate was 92% when embryogenic calli were cultured on N6 medium supplemented with 1mg/L 2,4-D and 3mg/L BA. Among three kinds of medium, MS and N6 medium were optimal for embryogenic callus induction and plant regeneration, respectively. Ho difference in callus induction frequency was observed among four cultivars of orchardgrass, however, "Roughrider" cultivar showed higher regenerability with the frequency of 61%. Addition of maltose to the regeneration medium as a carbon source dramatically increased regeneration frequency up to 69%. A short tissue culture period and high-frequency regeneration system would be beneficial for molecular breeding of orchardgrass through genetic transformation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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