The optimal culture conditions were studied for plant regeneration from mesophyll protoplasts of Solanum sisymbriifolium. Axenic seedlings of S. sisymbriifolium were used as a explant for protoplast culture. Many viable protoplasts were isolated by incubating leaf slices in an enzyme solution containing 0.25% Meicerase and 0.05% Macerozyme for 16 hr at $25^{\circ}C$ without shaking. Protoplast density of $5.0{\times}10^4\;ml^{-1}$ in Kao medium containing 5.0 mg/L NAA, 1.0 mg/L 2,4-D and 1.0 mg/L BA was optimal for colony formation. Most colonies were formed when protoplasts were cultured at $25^{\circ}C$ after initial culture at $30^{\circ}C$ for one week. On the MS agar medium with 1.0 mg/L zeatin, 38.4% of protoplast-derived calli differentiated shoots. These shoots rooted on 1/2MS medium with 5.0 g/L sucrose and 2.5 g/L gellan gum, and developed into whole plants.
This study was carried out to elucidate the physiological and ecological mechamism of the branch pattern and electronmicroscopic structure of photosynthetic organs in Zoysia japonica Steud. The angles between the internodes of rhizome and the branches of Z.iaponica were changed from 0 to 52 degrees. The rhizomes tended to branch from the 3th node to the 10th node. When the terminal bud was damaged by various environmental factors, the initial branching formation was appeared immediately to the 4th node. The internode growth of the rhizome started from the beginning of April and continued to the end of Octobor. It became evident that there is a division labor between two different kinds of photosynthetic cells of mesophyll and bundle sheath tissues in Z.japonica The thick-walled bundle sheath cells surrounds the leaf vascular bundles as the Kranz type and separates them from the mesophyll cells.
Selection of glyphosate-resistant clones from MNNG-treated mesophyll protoplasts of haploid tobacco and their differentiation were studied. The protoplasts were treated with 0.1 to 100 $\mu\textrm{g}$/mL N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) for 30 min when they expanded to oval shapes. After the treatment, the protoplasts in 4-16 cell stages were transferred to the selective medium containing 1 mM glyphosate for the selection of the glyphosate-resistant colonies. The efficiency of the cell division of the protoplasts in the selective medium decreased as the MNNG concentrations in creased. Optimal MNNG concentration for induction of the glyphosate-resistant clones was 10$\mu\textrm{g}$/mL and mutation frequency was 2.66$\times$10-6. The stability of the glypohsate-resistance of the clones was examined by prolonged subculture in the medium with 1 mM glyphosate, and the resistant clones were survived more than 10 months. Among them one clone has been proliferating and greening and the others were proliferating without greening or greening with slower proliferating.
Citrus scab disease is one of the destructive diseases that reduce the value of fruit for the fresh market. We analyzed the process of symptom development after infection with scab pathogen $Elsino{\ddot{e}}$ fawcettii in the susceptible satsuma mandarin leaves to observe the structural modification against pathogen. The cuticle and epidermal cells along with 3-5 layers of mesophyll tissue were degraded 1-2 days post inoculation. Surrounding peripheral cells of degraded tissues grew rapidly and then enveloped the necrotic area along with the growing conidia. Cross sections through the lesion revealed hyphal colonization in epidermis and mesophyll tissues. In response to the pathogen colonization, host cell walls were lignified, inner cells were rapidly compartmentalized and a semi-circular boundary was formed that separated the infected region from the non-infected region, and finally prevented the intercellular pathogen spread.
Leaf mesophyll protoplasts from five cultivars of tobacco (N. tabacum L.) were cultured. The protoplasts did not survive in culture medium containing Murashige and Skoog inorganic salts for over 6 days. NH4NO3 and FeSO4.Na2EDTA concentration of Murashige and Skoog medium were toxic in tobacco leaf mesophyll protoplast culture. Therefore we investigated optimum condition in Murashige and Skoog medium. High plating efficiency was obtained by reducing the concentrations of NH4NO3 and FeSO4.Na2EDTA to 1/3 and 1/10, respectively, on the supplemented with 5$\mu$M IAA, 0.5 $\mu$M 2.4-D 5 $\mu$M BAP. Plants were regenerated from protoplast-derived calluses.
칼슘이온의 농도가 Arabidopsis thaliana의 원형질체배양에 미치는 영향을 조사하기 위해 Arabidopsis thaliana의 원형질체를 분리하여 서로 다른 농도의 CaCl$_2$를 첨가한 IMH 배지에서 배양하면서 나타나는 현상을 관찰하였다. 대조군과 12.5 mM 이하의 농도에서는 배양세포들이 심하게 액포화되었으며 세포분열은 관찰되지 않았다. 0-50 mM 범위의 농도에서는 농도의 증가와 비례하여 세포의 액포화가 적었으며 이에 반하여 plasma rich cell의 비율은 높아졌다. 세포분열의 유도는 25 mM 이상의 농도에서 관찰되었고 50mM에서 가장 높은 평판효율(5-6%)을 나타내었다. 그러나 100 mM 이상의 농도에서는 뚜렷한 저해효과를 나타내었다. 칼슘이온의 투여 시기가 세포분열과 콜로니 형성과정에 미치는 영향을 조사하기 위하여 서로 다른 농도의 칼슘이온을 각각 원형질체 분리용액과 배양액에 투여하고 배양한 결과, 투여 시기에 따른 영향은 콜로니의 형성과정에 다소 차이를 보였다. 이처럼 높은 칼슘 농도가 원형질체 배양시 요구되는 것은 원형질체가 배지로부터 생장조절물질을 흡수하여 재분화하는 과정에서 칼슘이온이 중요한 조절작용을 하기 때문인 것으로 추측된다.
A field experiment was conducted in order to investigate the seasonal changes of leaf grwoth and related characteristics in three cultivars of orchardgrass; Potomac, Kay and Sumas. The results were summarized as follows: 1. Leaf elongation was increased in a nearly linear phase during first and third cutting stages. It was increased slowly in early 10 days to 15 days after cutting and increased rapidly there-after during the rest cutting stages. In cultivars, Potomac was showed higher leaf elongation than other cultivars during all cutting stages. There was no difference of leaf width within cutting stages, but the leaf width of fall regrwoth was narrow. Sumas had relatively short and wide leaves. 2. Leaf dry weight and leaf area in first cutting stage were larger than others. Leaf area was increased rapidly form 15 days after cutting and leaf weight was increased rapidly from 20 days over all cutting stages. The increase in leaf area and dry weight were slow down after 30 days. 3. Number of epidermal cells was increased rapidly after cutting and the rate of increase was slow down after 30 days. In a cross section of leaf tissue, the part of mesophyll was occupied with about 60% of total area and larger area than other tissue, the part of mesophyll was occupied with about 60% of total area and larger area than other tissues. Leaf tissue had a large vacancy at early growth period after harvest and was filled gradually with mesophyll. This result was related to the increase of leaf dry matter.
대마(Cannabis sativa L.)의 잎과 암꽃의 포(苞)를 투과 전자현미경으로 관찰한 결과 다음과 같은 결과를 얻었다. 어린 엽육세포에서 관찰되는 원시색소체는 타원형으로서 장축의 크기는 $1.5-2.0{\mu}m$이었으며, 스트로마 기질내에는 100nm 크기의 색소체소구가 많이 나타났다. 파종후 3주후에 채취된 시료의 엽육세포에 있어서는 그라나가 잘 발달된 엽록체가 관찰되었는데, 틸라코이드의 신장과 더불어 엽록체의 형태도 긴 장타원형을 이루고 있었다. 엽육세포가 성숙하면서 전분립의 수와 크기가 점차 증가하였고, 이에 따라서 엽록체의 형태도구형에 가까운 타원형으로 변하였다. 특히 이 시기의 그라나간틸라코이드는 매우 팽창되는 양상을 나타내었다. 엽육세포 가운데 비교적 어린 단계에 있는 세포에서는 원시색소체가 엽록체와 함께 출현하기도 하였는데, 이때의 이들 엽록체는 전분립을 전혀 지니지 않았다. 엽육조직과 암꽃의 포에서 관찰된 표피세포는 전분립을 지닌 엽록체가 세포벽을 따라 나타났으며, 핵은 세포의 기부에 규칙적으로 배열하였다. 비분비모는 세포의 중앙에 큰 액포가 발달하였으며 아주 적은 세포질이 세포벽을 따라 존재하였다. 이들 세포질내에도 옅록체가 나타났는데, 이들은 엽육세포의 엽록체에 비해 현저히 작았고, 형태도 타원형에 가까왔다. 한편, 분비모에서는 매우 특징적인 색소체가 출현하였는데, 이들은 격자구조의 막성구조(reticulate body)를 지니면서 분비작용을 왕성히 하고 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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