The salt resistance of antibacterial activity and synergistic effect with clinically used antibiotic agents are critical factors in developing effective peptide antibiotic drugs. For this reason, we investigated the resistance of antibacterial activity to antagonism induced by NaCl and $MgCl_2$ and the synergistic effect of P20 with cefotaxime. P20 is a 20-residue synthetic peptide derived from a cecropin A (CA)-melittin(ME) hybrid peptide. In this study, P20 was found to have potent antibacterial activity against clinically isolated methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) strains without hemolytic activity against human erythrocytes. The combination study revealed that P20 in combination with cefotaxime showed synergistic antibacterial activity in an energy-dependent manner. We also confirmed the synergism between P20 and cefotaxime by fluorescence-activated flow cytometric analysis by staining bacterial cells with propidium iodide (PI) and bis-(1,3-dibutylbarbituric acid) trimethine oxonol (BOX). This study suggests that P20 may be useful as a therapeutic antibiotic peptide with synergistic effect in combination with conventional antibiotic agents.
Lee, Sang Yoon;Lee, Yan;Choi, Joon Sig;Park, Jong Sang;Choi, Myung-Un
Bulletin of the Korean Chemical Society
/
v.34
no.3
/
pp.931-935
/
2013
Lipid events in liposome-mediated transfection (lipofection) are largely unknown. Here we studied whether phospholipase D (PLD), an important enzyme responsible for phospholipid breakdown, was affected during lipofection of HepG2 cells with a luciferase plasmid. Synthetic cholesterol (Chol) derivatives, including $3{\beta}$[L-ornithinamide-carbamoyl]Chol, [polyamidoamine-carbamoyl]Chol and $3{\beta}$[N-(N',N'-dimethylaminoethane)-carbamoyl]Chol, and a cationic lipid, N-[1-(2,3-dioleyloxy)propyl]-N,N,N-trimethylammonium chloride were mixed with a helper lipid dioleoylphosphatidylethanolamine to form respective cationic liposomes. All cationic liposomes were found to stimulate PLD. Although orders of magnitude effects of the cationic liposomes on PLD stimulation did not consistently match those on cytotoxicity and luciferase expression, a causal relationship between PLD activation and cytotoxic effect was remarkable. PLD stimulation by the cationic liposomes was likely due to their amphiphilic characters, leading to membrane perturbation, as supported by similar results obtained with other membrane-perturbing chemicals such as oleate, melittin, and digitonin. Our results suggest that lipofection induces cellular lipid changes such as a PLD-driven phospholipid turnover.
목적 : 본 연구는 봉약침의 주요성분인 멜리틴이 전립선 암세포주인 DU-145 세포성장에 어떤 영향을 미치는지를 알아보기 위하여 시행하였다. 방법 : 멜리틴이 DU-145의 성장에 미치는 영향을 알아보기 위한 cell viability 측정으로는 WST-1 assay를, 세포자멸사의 관찰에는 DAPI(4,6-diamidino-2-phenylindole)와 TUNEL staining assay를 시행하였으며, 세포자멸사 조절단백질(calpain, Bax, caspase-3, -9, cleaved caspase-3, cleavaged PARP, cleaved caspase-9, Bcl-2, XIAP, cIAP2, Akt, p-Akt, MMP-2, MMP-13)의 관찰을 위하여 western blot analysis를 시행하였다. 결과 : 1. DU-145 세포에서 멜리틴을 처리한 후 세포자멸사가 유도되어 세포성장이 억제되었다. 2. 세포자멸사 관련 단백질 중 분리된 caspase-3, caspase-9은 유의한 증가를, Bcl-2, p-Akt, XIAP, cXIAP는 유의한 감소를 나타내었다. 결론 : 이상의 결과는 멜리틴이 인간 전립선암세포주인 DU-145의 세포자멸사를 유발함으로써 증식억제 효과가 있음을 나타낸 것으로, 전립선암의 예방과 치료에 대한 효과적인 치료제 개발에 도움이 될 것으로 기대된다.
The role of phospholipase ($A_2\;PLA_2$) in tumor cell growth was investigated using SK-N-MC human neuroblastoma cells. 4-Bromophenacyl bromide (BPB) and mepacrine (Mep), known $PLA_2$ inhibitors, suppressed growth of the tumor cells in a dose-dependent manner without a significant cytotoxicity. Melittin (Mel), a $PLA_2$ activator, enhanced the cell growth in a concentration-dependent fashion. The growth-enhancing effects of Mel were significantly reversed by the co-treatment with $PLA_2$ inhibitors. In addition, Mel induced intracellular $Ca^{2+}$ release from internal stores like as did serum, a known intracellular $Ca^{2+}$ agonist in the tumor cells. Intracellular $Ca^{2+}$ release induced by these agonists was significantly blocked by $PLA_2$ inhibitors at growth-inhibitory concentrations. Arachidonic acid (AA), a product of the $PLA_2-catalyzed$ reaction, induced cell growth enhancement and intracellular $Ca^{2+}$ release. These effects of AA were significantly blocked by BAPTA/AM, an intracellular $Ca^{2+}$ chelator. Taken together, these results suggest that the modulation of $PLA_2$ activity may be one of the regulatory mechanisms of cell growth in human neuroblastoma cells. Intracellular $Ca^{2+}$ may act as a key mediator in the $PLA_2-induced$ growth regulation.
CA(1-8)ME(1-12), the CA-ME hybrid peptide of the amino terminal segments of cecropin A (CA) and melittin (ME), has been reported to have a broad spectrum and improved potency without a hemolytic property. In order to obtain new synthetic peptides with powerful antibacterial activity without hemolytic activity, several hybrid peptides were designed from the sequences of CA, ME, magainin 2, bombinin and lactoferricin. All hybrid peptides were constructed to form an amphipathically basic-flexible-hydrophobic structure and synthesized by the solid phase method. Their hemolytic activities against human red blood cells and antibacterial activities against both Gram-positive and Gram-negative bacteria were detennined. CA(1-8)MA(1-12), CA(1-8)BO(1-12), MA(10-17)ME(1-12) and LF(20-29)ME(1-12) showed comparable activities with broad spectra against both Gram-positive and Gram-negative bacteria relative to CA(1-8)ME(1-12) but without hemolytic properties. These hybrid peptides, therefore, could be useful as model peptides to design a novel peptide with improved antibacterial activity and study on structure-activity relationships of antimicrobial peptides.
Objectives: This study was performed to analyze a 13-week repeated dose toxicity test of Sweet Bee Venom (SBV) extracted from bee venom and administered in Sprague-Dawley (SD) rats. Methods: Male and female 5-week-old SD rats were treated once daily with SBV (high-dosage group: 0.28 mg/kg; medium-dosage group: 0.14 mg/kg; or low-dosage group: 0.07 mg/kg) for 13 weeks. Normal saline was administered to the control group in a similar manner (0.2 mL/kg). We conducted clinical observations, body weight measurements, ophthalmic examinations, urinalyses, hematology and biochemistry tests, and histological observations using hematoxylin and eosin (H&E) staining to identify any abnormalities caused by the SBV treatment. Results: During this study, no mortality was observed in any of the experimental groups. Hyperemia and a movement disorder were observed around the area of in all groups that received SBV treatment, with a higher occurrence in rats treated with a higher dosage. Male rats receiving in the high-dosage group showed a significant decrease in weight during the treatment period. Compared to the control group, no significant changes in the ophthalmic parameters, the urine analyses, the complete blood cell count (CBC), and the biochemistry in the groups treated with SBV. Compared to the control group, some changes in organ weights were observed in the medium-and the high-dosage groups, but the low-dosage group showed no significant changes. Histological examination of thigh muscle indicated cell infiltration, inflammation, degeneration, and necrosis of muscle fiber, as well as fibrosis, in both the medium- and the high-dosage groups. Fatty liver change was observed in the periportal area of rats receiving medium and high dosages of SBV. No other organ abnormalities were observed. Conclusion: Our findings suggest that the No Observed Adverse Effect Level (NOAEL) of SBV is approximately 0.07 mg/kg in male and female SD rats.
Objectives: This study was performed to check for reversibility in the changes induced by a 13-week, repeated, dose toxicity test of Sweet Bee Venom (SBV) in Sprague-Dawley (SD) rats. Methods: Fifteen male and 15 female SD rats were treated with 0.28 mg/kg of SBV (high-dosage group) and the same numbers of male and female SD rats were treated with 0.2 mL/kg of normal saline (control group) for 13 weeks. We selected five male and five female SD rats from the high-dosage group and the same numbers of male and female SD rats from the control group, and we observed these rats for four weeks. We conducted body-weight measurements, ophthalmic examinations, urinalyses and hematology, biochemistry, histology tests. Results: (1) Hyperemia and movement disorder were observed in the 13-week, repeated, dose toxicity test, but these symptoms were not observed during the recovery period. (2) The rats in the high-dose group showed no significant changes in weight compared to the control group. (3) No significant differences in the ophthalmic parameters, urine analyses, complete blood cell counts (CBCs), and biochemistry were observed among the recovery groups. (4) No changes in organ weights were observed during the recovery period. (5) Histological examination of the thigh muscle indicated cell infiltration, inflammation, degeneration, necrosis of muscle fiber, and fibrosis during the treatment period, but these changes were not observed during the recovery period. The fatty liver change that was observed during the toxicity test was not observed during the recovery period. No other organ abnormalities were observed. Conclusion: The changes that occurred during the 13-week, repeated, dose toxicity test are reversible, and SBV can be safely used as a treatment modality.
Jeong, Chang Hee;Cheng, Wei Nee;Bae, Hyojin;Lee, Kyung Woo;Han, Sang Mi;Petriello, Michael C.;Lee, Hong Gu;Seo, Han Geuk;Han, Sung Gu
Journal of Microbiology and Biotechnology
/
v.27
no.10
/
pp.1827-1836
/
2017
The world dairy industry has long been challenged by bovine mastitis, an inflammatory disease, which causes economic loss due to decreased milk production and quality. Attempts have been made to prevent or treat this disease with multiple approaches, primarily through increased abuse of antibiotics, but effective natural solutions remain elusive. Bee venom (BV) contains a variety of peptides (e.g., melittin) and shows multiple bioactivities, including prevention of inflammation. Thus, in the current study, it was hypothesized that BV can reduce inflammation in bovine mammary epithelial cells (MAC-T). To examine the hypothesis, cells were treated with LPS ($1{\mu}g/ml$) to induce an inflammatory response and the anti-inflammatory effects of BV (2.5 and $5{\mu}g/ml$) were investigated. The cellular mechanisms of BV against LPS-induced inflammation were also investigated. Results showed that BV can attenuate expression of an inflammatory protein, COX2, and pro-inflammatory cytokines such as IL-6 and TNF-${\alpha}$. Activation of NF-${\kappa}B$, an inflammatory transcription factor, was significantly downregulated by BV in cells treated with LPS, through dephosphorylation of ERK1/2. Moreover, pretreatment of cells with BV attenuated LPS-induced production of intracellular reactive oxygen species (e.g., superoxide anion). These results support our hypothesis that BV can decrease LPS-induced inflammatory responses in bovine mammary epithelial cells through inhibition of oxidative stress, NF-${\kappa}B$, ERK1/2, and COX-2 signaling.
Purified bee venom was collected from colonies of honeybees (Apis mellifera L.) using a bee venom collector under sterile conditions and then purified under strict laboratory conditions. Purified bee venom contained $63.9{\pm}5.4%$ melittin, $10.9{\pm}1.6%$ phospholipase A2, and $2.3{\pm}0.3%$ apamin. Purified bee venom has various anti-bacterial, anti-inflammatory and immunostimulating effects. In this study, we evaluated purified bee venom which are mammary gland cells, MAC-T cells are used to increase the synthesis of milk protein. Purified bee venom promoted the proliferation of MAC-T cells at concentrations below $1{\mu}g/mL$, but cytotoxicity at $10{\mu}g/mL$ and above. As a result of the increase in the synthesis of ${\beta}-casein$, a milk protein after treatment with MAC-T cells at a concentration of the bee venom without cytotoxicity, the ${\beta}-casein$ content in the cell culture was increased when treated at a concentration of 1 ng/mL or more. In addition, it was confirmed that purified bee venom significantly increased the expression of bovine ${\beta}-casein$ (bCSNB) mRNA, a ${\beta}-casein$ synthesis gene, at a concentration of 1 ng/mL or more. These results suggest that purified bee venom can be used to increase the production of livestock by ultimately increasing the expression of milk protein.
Objectives : This study was performed to analyse single dose toxicity of Sweet Bee Venom(Sweet BV) extracted from the bee venom in Beagle dogs. Methods : All experiments were conducted under the regulations of Good Laboratory Practice (GLP) at Biotoxtech Company, a non-clinical study authorized institution. Male and female Beagle dogs of 5-6 months old were chosen for the pilot study of single dose toxicity of Sweet BV which was administered at the level of 9.0 mg/kg body weight which is 1300 times higher than the clinical application dosage as the high dosage, followed by 3.0 and 1.0 mg/kg as midium and low dosage, respectively. Equal amount of excipient(normal saline) to the Sweet BV experiment groups was administered as the control group. Results : 1. No mortality was witnessed in all of the experiment groups. 2. Hyperemia and movement disorder were observed around the area of administration in all the experiment groups, and higher occurrence in the higher dosage treatment. 3. For weight measurement, Neither male nor female groups showed significant changes. 4. To verify abnormalities of organs and tissues, thigh muscle which treated with Sweet BV, brain, liver, lung, kidney, and spinal cords were removed and histologocal observation using H-E staining was conducted. In the histologocal observation of thigh muscle, cell infiltration, inflammation, degeneration, necrosis of muscle fiber, and fibrosis were found in both thigh tissue. And the changes depend on the dose of Sweet BV. But the other organs did not showed in any abnormality. 5. The maximum dose of Sweet BV in Beagle dogs were over 9 mg/kg in this study. Conclusions : The above findings of this study suggest that Sweet BV is a relatively safe treatment medium. Further studies on the toxicity of Sweet BV should be conducted to yield more concrete evidences.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.