Objective: Muscle fiber types, numbers and area are crucial aspects associated with meat production and quality. However, there are few studies of pig muscle fibre traits in terms of the detection power, false discovery rate and confidence interval precision of whole-genome quantitative trait loci (QTL). We had previously performed genome scanning for muscle fibre traits using 183 microsatellites and detected 8 significant QTLs in a White Duroc×Erhualian F2 population. The confidence intervals of these QTLs ranged between 11 and 127 centimorgan (cM), which contained hundreds of genes and hampered the identification of QTLs. A whole-genome sequence imputation of the population was used for fine mapping in this study. Methods: A whole-genome sequences association study was performed in the F2 population. Genotyping was performed for 1,020 individuals (19 F0, 68 F1, and 933 F2). The whole-genome variants were imputed and 21,624,800 single nucleotide polymorphisms (SNPs) were identified and examined for associations to 11 longissimus dorsi muscle fiber traits. Results: A total of 3,201 significant SNPs comprising 7 novel QTLs showing associations with the relative area of fiber type I (I_RA), the fiber number per square centimeter (FN) and the total fiber number (TFN). Moreover, one QTL on pig chromosome 14 was found to affect both FN and TFN. Furthermore, four plausible candidate genes associated with FN (kinase non-catalytic C-lobe domain containing [KNDC1]), TFN (KNDC1), and I_RA (solute carrier family 36 member 4, contactin associated protein like 5, and glutamate metabotropic receptor 8) were identified. Conclusion: An efficient and powerful imputation-based association approach was utilized to identify genes potentially associated with muscle fiber traits. These identified genes and SNPs could be explored to improve meat production and quality via marker-assisted selection in pigs.
Wang, Wenjun;Hu, Xiaoxiang;Fei, Jin;Meng, Qinyong;Li, Ning
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제20권10호
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pp.1490-1495
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2007
Insulin-like growth factor binding protein-4 (IGFBP-4) is a member of the IGF super family, and regulates the action of IGFs. The polymorphism of porcine IGFBP-4 gene in 17 pig breeds (total n = 570) was detected by PCR-SSCP, and alleles A and B were detected. In these pig breeds, it was found that exotic pig breeds carried high frequencies of allele A, while Chinese native pig breeds carried high frequencies of allele B. The role of porcine IGFBP-4 was investigated in 172 F2 offspring of a $Lantang{\times}Lantang $ population. Forty eight growth traits were recorded for analyzing the association between IGFBP-4 gene polymorphism and quantitative performance traits. In this resource family, pigs with AA genotype had higher fore-body weight, bone weight of mid-body, bone weight of rear-body, fore-leg weight and rear-leg weight than those pigs with BB genotype (p<0.05); while pigs which carried BB genotype had higher back-fat thickness at C point and lard weight than those pigs with AA genotype (p<0.05); pigs with AA genotype had higher body weight than those with BB genotype; for meat quality traits, pigs with AA genotype had higher meat color than those of BB genotype (p<0.01), and pigs with BB genotype had higher marbling than those of AA and AB genotypes (p<0.01 and p<0.05, respectively).Based on these results, it is necessary to do more studies on IGFBP-4 before using the IGFBP-4 locus for the application of marker-assisted selection programs.
Objective: Agu pigs are indigenous to the Okinawa prefecture, which is the southernmost region of Japan. Agu pigs were exposed to a genetic bottleneck during the 20th century, due to the introduction of European pig breeds. The objective of this study was to elucidate the genetic structure of Agu pigs and to determine their relationships with those of five European breeds, two Chinese breeds and Ryukyu wild boar using microsatellite markers. Methods: A total of 203 DNA samples from 8 pig breeds were used in this study. Genotyping was performed using 21 microsatellite markers distributed across 17 chromosomes. Results: Numbers of effective alleles in Agu pigs were fewer than in European breeds and Ryukyu wild boar. Among domestic pigs, Agu pigs had the lowest heterozygosity (0.423) and highest inbreeding coefficient (FIS = 0.202), indicating a severe loss of heterozygosity in Agu pigs possibly due to inbreeding. Neighbor-joining tree analysis was performed based on Reynolds' genetic distances, which clustered Agu pigs with Duroc pigs. However, principal component analysis revealed a unique genetic position of the Agu pig, and the second principal component separated Agu pigs from all other breeds. Structure analysis with the optimal assumption of seven groups (K = 7) indicated that Agu pigs form an independent cluster from the other breeds. In addition, high and significant FST values (0.235 to 0.413) were identified between Agu pigs and the other breeds. Conclusion: This study revealed a substantial loss of genetic diversity among Agu pigs due to inbreeding. Our data also suggest that Agu pigs have a distinctive genetic structure, although gene flows from European breeds were observed.
Objective: This study aimed to validate the statistical evidence from the genome-wide association study (GWAS) as true-positive and to better understand the effects of the glycophorin C (GYPC) gene on serum hemoglobin traits. Methods: Our initial GWAS revealed the presence of two single nucleotide polymorphisms (SNPs) (ASGA0069038 and ALGA0084612) for the hemoglobin concentration trait (HGB) in the 2.48 Mb region of SSC15. From this target region, GYPC was selected as a promising gene that associated with serum HGB traits in pigs. SNPs within the GYPC gene were detected by sequencing. Thereafter, we performed association analysis of the variant with the serum hemoglobin level in three pig populations. Results: We identified one SNP (g.29625094 T>C) in exon 3 of the GYPC gene. Statistical analysis showed a significant association of the SNP with the serum hemoglobin level on day 20 (p<0.05). By quantitative real-time polymerase chain reaction, the GYPC gene was expressed in eight different tissues. Conclusion: These results might improve our understanding of GYPC function and provide evidence for its association with serum hemoglobin traits in the pig. These results also indicate that the GYPC gene might serve as a useful marker in pig breeding programs.
본 연구는 Duroc, Landrace, Berkshire, Yorkshire를 기초 축으로 이용한 1003두에 대해 MC4R유전자의 PCR-RFLP를 이용하여 그 다형성을 조사하고 돼지의 일당증체량, 등지방 두께, 사료 요구율, 정육율과 그 유전자형 간의 연관성을 규명하고자 실시하였다. MC4R유전자에 대해 PCR-RFLP를 이용하여 226bp산물을 증폭한후 Taq I 체한효소로 사용하였다. 얻어진 MC4R gene의 유전자 빈도는 품종별로 다르게 나타났다. 통계적 분석을 통하여 각 유전자형에 대한 경제형질과 관련성을 분석한 결과 일당 증체량과 사료요구량은 NN 유전자형을 가진 개체들이 DN이나 DD유전자형을 가진 개체들에 비해 유의적으로 우수한 능력을 보였다(P < 0.05). 하지만 D 대립유전자는 높은 정육율과 낮은 등지방두께에 연관성이 있음을 관찰하였다. 따라서 돼지의 성장과 정육율과 관련된 선발력을 높이기 위해서 MC4R유전자의 다형성분석에서 검증된 PCR marker를 우량돼지육종 계획에 있어 분자생물학적 선발 marker로 사용할 수 있을 것으로 사료된다.
Choi, Kwang-Hwan;Yoon, Ji Won;Kim, Minsu;Jeong, Jinsol;Ryu, Minkyung;Park, Sungkwon;Jo, Cheorun;Lee, Chang-Kyu
한국축산식품학회지
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제40권4호
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pp.659-667
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2020
Muscle stem cells isolated from domestic animals, including cows and pigs, were recently spotlighted as candidates for the production of alternative protein resources, so-called cultured meat or lab-grown meat. In the present study, we aimed to optimize the in vitro culture conditions for the long-term expansion of pig muscle stem cells via the screening of various signaling molecules. Pig muscle stem cells were collected from the biceps femoris muscles of 3-d-old crossbred pigs (Landrace×Yorkshire×Duroc, LYD) and cultured in minimum essential medium-based growth media. However, the pig muscle stem cells gradually lost their proliferation ability and featured morphologies during the long-term culture over two weeks. To find suitable in vitro culture conditions for an extended period, skeletal muscle growth medium-2, including epidermal growth factor (EGF), dexamethasone, and a p38 inhibitor (SB203580), was used to support the stemness of the pig muscle stem cells. Interestingly, pig muscle stem cells were stably maintained in a long-term culture without loss of the expression of myogenic marker genes as determined by PCR analysis. Immunostaining analysis showed that the stem cells were capable of myogenic differentiation after multiple passaging. Therefore, we found that basal culture conditions containing EGF, dexamethasone, and a p38 inhibitor were suitable for maintaining pig muscle stem cells during expanded culture in vitro. This culture method may be applied for the production of cultured meat and further basic research on muscle development in the pig.
Kim, Lee-Kung;Park, Chang-Min;Park, Sun-Ae;Kim, Seung-Chang;Chung, Hoyoung;Chai, Han-Ha;Jeong, Gyeong-Yong;Choi, Bong-Hwan
Reproductive and Developmental Biology
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제37권4호
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pp.205-211
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2013
The swine is one of the most widespread mammalian throughout the whole world. Presently, many studies concerning microsatellites in swine, especially domestic pigs, have been carried out in order to investigate general diversity patterns among either populations or breeds. Until now, a lot of time and effort spend into a single PCR method. But simple and more rapid multiplex PCR methods have been developed. The purpose of this study is to develop a robust set of microsatellites markers (MS marker) for traceability and individual identification. Using multiplex-PCR method with 23 MS marker divided 2 set, various alleles occurring to 5 swine breed (Berkshire, Landrace, Yorkshire, Duroc and Korea native pig) used markers to determine allele frequency and heterozygosity. MS marker found 4 alleles at SW403, S0227, SWR414, SW1041 and SW1377. The most were found 10 alleles at SW1920. Heterozygosity represented the lowest value of 0.102 at SWR414 and highest value of 0.861 at SW1920. So, it was recognized appropriate allele frequency for individual identification in swine. Using multiplex-PCR method, MS markers used to determine individual identification biomarker and breed-specific marker for faster, more accurate and lower analysis cost. Based on this result, a scientific basis was established to the existing pedigree data by applying genetics additionally. Swine traceability is expected to be very useful system and be conducted nationwide in future.
연구에서는 돼지의 세포 분화 및 활성적 특이성과 개체의 성장, 노화의 생물학적 특성을 구명하고자 국내 대표적인 종돈을 대상으로 telomeric DNA probe를 이용한 양적형광접합보인법(Q-FISH)으로서 백혈구 세포의 연령 별, 품종 별, 성 별 텔로미어 함량을 분석 고찰하고, 텔로미어 함유율과 개체 별 각 생산 능력과의 연관성을 검토하고자 하였다. 본 연구에 공시된 품종은 대한양돈협회 제2종돈능력검정소에서 검정 사육된 Yorkshire, Landrace, Duroc 및 Berkshire종 암수 100두 이상으로서 분석 결과, 돼지의 연령이 증가함에 따라 유의한 텔로미어 함유율의 감소를 나타내었고, 품종 간에 있어서도 유색 종이 백색 종에 비해 유의적으로 높은 텔로미어 함유율을 보였으며, 성 간에도 수컷이 암컷에 비해 높은 텔로미어 함유율을 나타내었다. 한편 각 개체 별 능력검정 성적과 텔로미어 함유율 간의 상관관계를 분석한 바 일당 증체량, 정육율 및 선발지수와는 정(+)의 상관을 보이고, 체장, 사료 요구율 및 등지방 두께와는 부(-)의 상관을 보여 선발 지표로서 매우 바람직한 양상을 보이나 이들 간의 상관계수가 낮고 또한 모든 계수가 유의성이 없는 것으로 분석되어 각 경제형질과 개체의 텔로미어 함유율 간에 큰 연관성이 없는 것으로 나타났다. 이상의 결과들을 종합하여 볼 때 텔로미어 함유율이 돼지의 생리 표지로서 활용은 가능하나 생산능력의 표지로서 이용하기에는 다소 어려움이 있는 것으로 사료된다.
본 연구는 돼지에 있어서 정원줄기세포를 포함하는 정소세포를 recipient 돼지의 정소 내로 이식할 수 있는 기법을 개발하기 위하여 시행되었다. 공여세포는 $10{\sim}14$일령의 돼지로부터 채취된 정소에서 효소처리법을 이용하여 회수하였고, recipient의 정소 내로 이식하기 전 형광 마커(PHK26)로 표지하였다. 외과적 수술을 통하여 recipient 돼지부터 정소를 꺼낸 후 초음파 기기와 이식 장치를 이용하여 형광표지된 공여세포를 recipient 정소의 세정관 내로 이식하였다. 14주령의 recipient 정소에 $5{\sim}7ml$의 공여 세포부유액을 주입하여 정소 내 50% 이상의 세정관 내로 새포부유액의 주입이 가능하였고, 세포부유액이 주입된 세정관 내에서 형광표지된 정소세포들이 고루 이식되어짐이 관찰되었다. 본 연구에서 개발한 이식 기법을 이용하여 효율적인 정소세포의 이식이 가능함에 따라 향후 돼지 정원줄기세포의 연구 및 활용법 개발에 획기적인 돌파구가 마련될 것으로 기대된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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