The hyperthermophilic archaebacterium Thermococcus profundus Isolated from a deep-sea hydrothermal vent system, produced several amylolytic enzymes such as extracellular amylase and pullulanase, intracellular a-1,4-91ucosidase in respone to the presence of complex carbohydrates In the growth medium. This strain showed high activities on 0.5% maltose than on complex carbohydrates One of the amylases was partially purified by ammonium sulfate precipitation, DEAE-Toyopearl chromatography. The amylase exhibited maximal activity at pH 5.5 and 80$^{\circ}C$, and was stable in the range of pH 5.5 to 9.5 and up to 80$^{\circ}C$ for 30 min. The enzyme activity was no dependence on Ca2+ and not inhibited by detergents. The amylase hydrolyzed soluble starch, amylose, amylopectin and glycogen to produce maltose and maltotriose with trace amounts of glucose, but not pullulan and ${\alpha}$-, ${\beta}$-, ${\gamma}$-cyclodextrin. Malto-oligosaccharides ranging from maltotetraose to maltoheptaose were hydrolyzed in an endo fashion.
올리고당이 가래떡의 조직감변화에 미치는 영향을 알아보기 위하여 당 조성이 다른 3가지 올리고당류 (M75, HL, G4)를 쌀가루에 고형분대치로 10% 까지 첨가하여 제조한 후 실온$(25^{\circ}C)$과 냉장$(4^{\circ}C)$ 조건하에서 5일간 보관하연서 조직감의 변화를 기계적으로 측정하였다. 가래떡의 조직감특성은 사용된 올리고당의 종류, 첨가농도, 보관온도 및 보관기간에 따라 유의적인 차이(p<0.0001)를 나타내므로 이들이 모두 가래떡의 견고성, 응집성, 탄성, 검성 및 씹힘성에 영향이 있음을 나타내었다. 모든 시료는 올리고당을 첨가하였을 때, 올리고당을 첨하지 않은 경우보다, 올리고당의 종류나 보관온도에 관계없이 시간경과에 따라 낮은 조직감 변화를 보였으며, 당농도가 증가할수록 조직감의 변화는 감소하는 경향으로 가래떡의 관능적 품질의 안정화에 효과를 보였다 특히 DE값이 높은 M75및 HL이 G4보다 노화억제에 더욱 기여하였으며 isomaltose 및 panose의 함량이 높은 HL이 maltose가 주성분인 M75보다 노화억제효과가 더 높았다. 호화된 전분젤을 $4^{\circ}C$에서 7일간 저장한 후 DSC를 이용하여 전분의 노화현상을 측정한 결과, 올리고당을 첨가했을 때 호화개시온도가 처음보다 낮아졌으며, 올리고당의 첨가농도가 증가함에 따라 재결정도는 낮은 비율을 나타냈다. 올리고당의 종류중 maltotetraose가 주성분인 G4보다 이당류, 삼당류가 주성분인 M75와 HL의 노화지연효과가 큰 것으로 나타났고, 특히 HL은 5%첨가로도 약 15%의 높은 전분 재결정화 억제효과를 나타내므로 조직감 측정 결과와 비교적 일치된 결과를 보였다.
과요오드산 산화 가용성전분 및 말토올리고당을 고구마 ${\beta}-amylase$, 밀 ${\beta}-amylase$, aldolase, bovine serum albumin, catalase, carboxypeptidase, ferritin, pronase와 반응시켜서 전기영동하였다. 이들 단백질은 전기영동상의 이동도가 달라지고, 단백질 밴드와 같은 위치에서 PAS 염색 밴드를 나타내어 당이 부가된 것으로 확인되었다. 당의 부가는 과요오드산 산화당의 알데히드기가 단백질 분자 표면 리신의 ${\varepsilon}-NH_2$기와 Schiff 염기를 형성하여 일어난다. 변형효소는 자외흡광곡선에 변화를 나타내지 않았다.
A Bacillus strain capable of producing an extracellular malto-oligosaccharides forming $\alpha $-amylase was isolated from soil and designated as Bacillus sp. SUH4-2. The enzyme was purified by ammonium sulfate fractionation, DEAE-Toyopearl and Mono-Q HR 5/5 column chromatographies using a FPLC system. The specific activity of the enzyme was increased by 16.1-fold and the yield was 13.5%. The optimum temperature for the activity of $\alpha $-amylase was 60-65$\circ$C and more than 50% of initial activity was retained after the enzyme was incubated at 60$\circ$C for 40 min. The enzyme was stable over a broad pH range of 5.0-8.0 and the optimum pH was 5.0-6.0. The molecular weight of the enzyme was determined to be about 63.6 kD and isoelectric point was around 5.8. The enzyme activity was strongly inhibited by Mn$^{2+}$, Ni$^{2+}$, and Cu$^{2+}$ ; slightly by Ca$^{2+}$. The purified enzyme produced starch hydrolyzates containing mainly maltose and maltotriose from soluble starch. The starch hydrolyzates were composed of 11% glucose, 59% maltose, 25% maltotriose and 5% maltotetraose.
무를 2cm 크기로 자르고, 30%를 사용하여 전분을 1% 가한 것과 가하지 않은 동치미를 담가 4$^{\circ}C$에서 30일간 발효시켰다. HPLC 및 TLC 분석결과 전분을 가하지 않은 동치미에는 글루코오스, 프룩토오스, 수크로오스가 있었고, 발효진행에 따라 이들의 함량이 낮아졌다. 전분을 가한 동치미는 아밀라아제의 작용으로 이들 당 외에 말토오스. 말토트리오스, 말토테트라오스가 생성되었다. 전분을 가하지 않은 동치미는 30일 발효후 환원당 361$\mu$g/ml, 아밀라아제 활성 0.012 unit/ml, pH 3.82, 산도 3.0을 나타냈다. 전분 1%를 가한 동치미는 환원당 329 $\mu$g/ml, 아밀라아제 활성 0.04 unit/ml. pH 3.8, 산도 3.15를 나타냈다.
Physical and chemical properties of glycosylsucrose were characterized as follows: 1. The moisture content of glycosylsucrose syrup (35% , w/w) was 63.6% and total sugar in solid was 35.9%. 2. Main sugar compositions of glycosylsucrose syrup were maltotetraose 54.5%, sucrose 18.0%, glycosylsucrose 15.3%, maltosylsucrose 11.3% and the content of glucose, maltose, maltotriose and fructose were very little. 3. Perceived sweetness threshold of glycosylsucrose was 0.71%, relative sweetness was 0.53, and sweetness intensity expressed as power function was S=$0.78^{\circ}$C^{1.5}$$. 4. Viscosity of glycosylsucrose was higher than that of sucrose and Japanese product at 10, 25, 35 and $65^{\circ}C$. 5. The content of water absorption of gylcosylsucrose at Aw 0.80 was 0.48 g $H_2$O/g dry weight while that of sucrose was 0.17g $H_2$O/g dryweight at Aw 0.86. 6. The stability of glycosylsucrose was decreased by acidic pH, high temperature and long heating time. 7. The glycosylsucrose showed very little browning when heated with pepton, but alkaline pH (pH8), high temperature and long heating time increased browning reaction.
한국산 맥주 3가지와 일본산 맥주 21가지의 당함량을 비교 분석하였다. 당함량은 1.71%∼3.93%의 분포를 나타냈으며, 평균 3.15%를 나타냈다. 한국산 맥주는 에탄올 함량 4.5%짜리 뿐으로 평균 당함량은 3.24%, 일본산 에탄올 함량 4.5% 제품은 당함량 2.5%, 에탄올 5% 제품은 당함량 3.2%, 에탄올 5.5% 제품은 당함량 3.15%를 나타냈다. 비발효성 말토올리고당과 한계덱스트린은 평균 2.32%를 나타냈다. 당의 조성은 말토오스 ∼ 말토데카오스, 한계덱스트린까지 균일한 분포를 나타냈다. 그러나 식혜 당화법에서는 말토테트라오스∼말토헵타오스까지의 말토올리고당은 생성되지 않기 때문에 식혜당화법을 사용하면 맥주 제조의 당화율을 증가시킬 수 있다.
토양으로부터 maltopentaose생산성 amylase를 분비하는 세균 KSM B-404를 분리하여 그의 형태적, 생리적인 특성을 고려한 결과 Bacillus megaterium으로 동정되었다. 효소는 ($NH_4$)$_2$$SO_4$ 침전 분획, DEAE-Toyopearl 및 Superdex 75 HR 10/30 크로마토그래피로 129배 정제되었으며 21.4%의 활성이 회수되었다. 정제된 효소를 SDS-PACE로 분석한 결과 분자량은 약 68 kDa이었고, 최적 반응 온도는 $50^{\circ}C$이며 $Ca^{2+}$ 이온의 존재 시 열 안정성이 증가하였다. 한편 최적 반응 pH는 6.0~7.0부근이며 알칼리 조건에서도 안정하였다. 또한 효소의 활성은 $Cu^{2+}$ , $Hg^{2+}$ 그리고 특히 Fe/eup 3+/이온 등의 금속이온에 의해 강하게 저해 받았고 acetic anhydride, EDTA , hydroxylamine-HCI, $\rho$ - chloromercuribenzoate 등의 저해제에 의해서 활성이 저해되었으나 concanavalin A에 의한 저해 효과는 나타나지 않았다. 전분의 가수분해 산물을 HPLC로 분석한 결과 maltopentaose가 주산물로 나타났으며 반응 24시간 후 총 가수분해 산물의 약 52%를 차지하였다.
Background: The reports about valuable oligosaccharides in ginseng are quite limited. There is an urgent need to develop a practical procedure to detect and analyze ginseng oligosaccharides. Methods: The oligosaccharide extracts from ginseng were permethylated by solid-phase methylation method and then were analyzed by ultra-high-performance liquid chromatography-Q-Orbitrap/MS. The sequence, linkage, and configuration information of oligosaccharides were determined by using accurate m/z value and tandem mass information. Several standard references were used to further confirm the identification. The oligosaccharide composition in white ginseng and red ginseng was compared using a multivariate statistical analysis method. Results: The nonreducing oligosaccharide erlose among 12 oligosaccharides identified was reported for the first time in ginseng. In the comparison of the oligosaccharide extracts from white ginseng and red ginseng, a clear separation was observed in the partial least squares-discriminate analysis score plot, indicating the sugar differences in these two kinds of ginseng samples. The glycans with variable importance in the projection value large than 1.0 were considered to contribute most to the classification. The contents of oligosaccharides in red ginseng were lower than those in white ginseng, and the contents of maltose, maltotriose, maltotetraose, maltopentaose, maltohexaose, maltoheptaose, maltooctaose, maltononaose, sucrose, and erlose decreased significantly (p < 0.05) in red ginseng. Conclusion: A solid-phase methylation method combined with liquid chromatography-tandem mass spectrometry was successfully applied to analyze the oligosaccharides in ginseng extracts, which provides the possibility for holistic evaluation of ginseng oligosaccharides. The comparison of oligosaccharide composition of white ginseng and red ginseng could help understand the differences in pharmacological activities between these two kinds of ginseng samples from the perspective of glycans.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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