The objective of this study was to determine the molecular characteristics of the horse vascular endothelial growth factor alpha gene ($VEGF{\alpha}$) by constructing a phylogenetic tree, and to investigate gene expression profiles in tissues and blood leukocytes after exercise for development of suitable biomarkers. Using published amino acid sequences of other vertebrate species (human, chimpanzee, mouse, rat, cow, pig, chicken and dog), we constructed a phylogenetic tree which showed that equine $VEGF{\alpha}$ belonged to the same clade of the pig $VEGF{\alpha}$. Analysis for synonymous (Ks) and non-synonymous substitution ratios (Ka) revealed that the horse $VEGF{\alpha}$ underwent positive selection. RNA was extracted from blood samples before and after exercise and different tissue samples of three horses. Expression analyses using reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and quantitative-polymerase chain reaction (qPCR) showed ubiquitous expression of $VEGF{\alpha}$ mRNA in skeletal muscle, kidney, thyroid, lung, appendix, colon, spinal cord, and heart tissues. Analysis of differential expression of $VEGF{\alpha}$ gene in blood leukocytes after exercise indicated a unimodal pattern. These results will be useful in developing biomarkers that can predict the recovery capacity of racing horses.
In the present study, the effect of $HgCl_2$on the function of human peripheral polymorphonuclear leukocytes(PMNs) was examined. PMNs were isolated from human peripheral blood with density centrifugation in Ficoll-Paque. The cells were then incubated with $0.5{\sim}5{\mu}M\;HgCl_2$and glass adherence, chemotactic activity and erythrocyte-antibody rosette forming activity were measured. $HgCl_2$ decreased the function of PMNs in all three aspects tested. $HgCl_2$significantly diminished glass adherence(40.5 {\mu}M: 92{\pm}12%$ (percentage of control, $mean{\pm}$ S.D.); 41 {\mu}M: 46{\pm}11%,$ P<0.01; $3{\mu}M: 35{\pm}7%,$P<0.01;$5{\mu}M:49{\pm}10%,$ P<0.01). Similarly, significant differences were observed in chemotactic activity after $HgCl_2$treatment compared with control (control: $0.95{\pm}0.14mm; 0.5 {\mu}M: 0.91{\pm}0.11 mm; 1 {\mu}M: 0.77{\pm}0.16mm, P<0.05; 3{\mu}M: 0.61{\pm} 0.06mm, P<0.01; 5{\mu}M: 0.15{\pm}0.03 mm, P<0.01).$ Also, 4HgCl_2$decreased the percentage of rosette-forming PMNs, indicating diminished phagocytic activity of PMNs upon $HgCl_2$ exposure compared with control (control: $58{\pm}4%; 1{\mu}M: 53{\pm}4%, p<0.05; 3{\mu}M: 49{\pm}3%, P<0.01; 5{\mu}M: 46{\pm}3%, P<0.01).$ Cell viability was not antered after $HgCl_2$treatment (483{\pm}5%$ viability in control PMNs versus $81{\pm}8%$ viability in $5{\mu}M$ Hg-treated PMNs), suggesting that the impaired PMN function after $HgCl_2$treatment was not due to nonspecific cytotoxicity induced by $HgCl_2$. $HgCl_2$-induced decrease in the function of PMNs may have some implications in depressed host susceptibilityupon bacterial challenge after mercury exposure.
백혈구는 인체가 세균이나 바이러스에 감염되면 그 숫자가 증가하게되고 특히 요 중에 백혈구가 검출되면 비뇨기계나 생식기계의 감염을 의심하게 되어 이 계통의 질병을 진단하고 예후를 판단하는데 중요한 지표가 된다. 이에 본 연구에서는 백혈구내의 에스터라제의 활성을 측정함으로써 간접적으로 백혈구의 수를 측정하기 위하여 pentyl-3-thiophene-carboxlyate(PTC), pentyl-8-quinolinecarboxylate(PQC), 2-phenyl-4(N-tosylalanyloxyl)-thiazole(PTT)의 에스테르 기질을 합성하였고 각 기질을 이용하여 백혈구 검출용 시험지를 제조하여 요 중의 백혈구를 측정하였다. 이 세 가지 기질을 사용하여 백혈구 측정을 한 결과 0.5% borate 완충용액 pH 8.0, 기질 0.03%, 0.1∼0.8% PVP 안정제, 1% decanol의 구성비로 만들어진 PTT 시험지의 반응 색상이 다른 기질에 비교하여 안정하며 표준 비색표에 의한 육안적인 감별은 물론 요 화학 자동분석기에서의 응용성이 좋았다.
화학주성인자를 선택하기 위하여 chemotactic factor로 영지추출액(靈芝抽出液), 대장균 배양액, N-fMLP 및 TC-199 medium을 사용하였으며 modified Boyden chamber와 Nuclepore membrane filter를 이용하여 백혈구의 유주능을 측정한 바 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 화학주성인자로 TC-199 medium과 N-fMLP 그리고 대장균 배양액을 사용하였을때, N-fMLP에서 백혈구의 유주능이 우수하었으나 대장균 배양액도 그에 못지않게 우수하였다. 2. 영지추출액(靈芝抽出液)을 PBS로 1.00%, 0.10%, 0.01%로 희석 조제하여 화학주성인자로 사용하였을때 비교적 저농도인 0.01%에서 우수하였다. 3. 영지추출액(靈芝抽出液)의 각 희석액 (1.00%, 0.10%, 0.01%)로 백혈구를 처리한 후 유주능을 실험(實驗)한 결과 0.01%에서 매우 우수하였다. 따라서 영지(靈芝) 추출액(抽出液)은 0.01%에서 우수한 유주능을 나타낸다는 사실을 알았다.
Lipocortin 1 has been proposed as a putative mediator of anti-inflammatory actions of glucocorticoids. We investigated the role of lipocortin 1 in the effect of dexamethasone using rat splenic leukocytes. Concanavalin A(ConA; 1 ${\mu}g/ml$) increased the leukocyte proliferation and nitric oxide(NO) generation, which were measured as $[^3H]-thymidine$ uptake by the cells and nitrite accumulation in the culture media, respectively. Dexamethasone suppressed ConA-induced cell proliferation, in a concentration-dependent manner with $EC_{50}$ around 50nM. The addition of anti-lipocortin l(Anti-LCl) reversed dexamethasone effects: 0.24, 1.2, 6 ${\mu}g/ml$ of Anti-LC1 reversed dexamethasone(50 nM)-induced suppression of thymidine uptake by $9{\pm}3%$, $16{\pm}3%$, $36{\pm}5%$, respectively; 0.24, 1.2, and 6 ${\mu}g/ml$ of Anti-LCI reversed dexa-methasone-induced decrease of nitrite concentration by $49{\pm}16%$, $61{\pm}20%$, $77{\pm}19%$, respectively. The present data indicate that lipocortin 1 mediates, at least in part, glucocorticoids-induced suppression of leukocyte proliferation and blockade of NO generation.
지방간은 대사증후군의 한 형태로 인슐린저항성이 중요한 역할을 한다. 본 연구는 당뇨 및 대사 인자들과 연관성이 있는 것으로 알려진 말초혈액의 사립체 DNA (mtDNA) copy 수와 지방간 및 인슐린저항성 관련 인자와의 연관성을 알아보고자 하였다. 지방간 진단을 위해 음주력 설문과 복부 초음파 검사를 시행하였으며 실시간 중합효소 연쇄반응을 이용하여 말초혈액의 백혈구에서 mtDNA copy 수를 측정하였다. 총 445 명의 대상자 중 지방간이 있는군(fatty liver group)은 148 명이고 정상군은 297 명이었다. 지방간이 있는 군에서 정상군에 비해 mtDNA copy수가 유의하게 낮았다. 비알콜성 지방간과 알코올성 지방간 모두 지방간이 있는 군에서 말초혈액 mtDNA copy 수가 낮았다. 말초혈액의 mtDNA copy 수는 ALT, AST, $\gamma$-GTP, 체질량지수, 허리둘레, 이완기혈압, 유리지방산 수치와 역의 상관관계를 보였다. 말초혈액에서의 mtDNA copy 수는 지방간 여부 및 인슐린저항성 관련 대사 인자들과 높은 연관성이 있었다.
Kim, Hyoung-Ki;Choi, Soo-Ran;Choi, Sang-Jin;Chio, Myung-Sup;Shin, Yong-Kyoo
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제8권6호
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pp.319-327
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2004
This study was aimed at evaluating the effect of defibrotide on the development of the surgically induced reflux esophagitis, on gastric secretion, lipid peroxidation, polymorphonuclear leukocytes (PMNs) accumulation, polymorphonuclear leukocytes adherence, superoxide anion and hydrogen peroxide production in PMNs, scavenge of hydroxyl radical and hydrogen peroxide, cytokine (interleukin-1 ${\beta}$, tumor necrosis $factor-{\alpha}$) production in blood, and intracelluar calcium mobilization in PMNs. Defibrotide did not inhibit the gastric secretion and not change the gastric pH. Treatment of esophagitis rats with defibrotide inhibited lipid peroxidation, and myeloperoxidase (MPO) in the esophagus in comparison with untreated rats. Defibrotide significantly decreased the PMN adherence to superior mesenteric artery endothelium in a dose-dependent manner, Superoxide anion and hydrogen peroxide production in $1{\mu}M$ formylmethionylleucylphenylalanine (fMLP)- or $0.1{\mu}g/ml$ N-phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)-activated PMNs was inhibited by defibrotide in a dose-dependent fashion. Defibrotide effectively scavenged the hydrogen peroxide but did not scavenge the hydroxyl radical. Treatment of esophagitis rats with defibrotide inhibited interleukin-1 ${\beta}$ production in the blood in comparison with untreated rats, but tumor necrosis $factor-{\alpha}$ production was not affected by defibrotide. The fMLP-induced elevation of intracellular calcium in PMNs was inhibited by defibrotide. The results of this study suggest that defibrotide may have partly beneficial protective effects against reflux esophagitis by the inhibition lipid peroxidation, PMNs accumulation, PMNs adherence to endothelium, reactive oxygen species production in PMNs, inflammatory cytokine production(i.e. interleukin-1 ${\beta}$), and intracellular calcium mobilization in PMNs in rats.
The effects of aconite root in rats and rabbits were studied following oral administration of the powder which was prepared by lyophilization of the decoction of the salted aconite roots. The $LD_{50}$ of the powder, the blood picture, total blood volume, uptake rate of ${42}^K$ and ${24}^Na$ in various organs, oxygen consumption, thyroid activity, and histopathological changes in various organs, were observed. The results obtained were as follows: 1. The $LD_{50}$ of the powder of decoction of the aconite root was 4.07g/kg of body weight in mice which is equivalent to approximately 40g/kg of the salted aconite roots. 2. The number of erythrocytes and leukocytes, hematocrit value, and the amount of hemoglobin in blood were increased in the rats administered daily dosages of 0.1, 0.5, and 1.0g/kg respectively. No significant differences were observed in the differential count of leukocytes. A slight tendency of hemoconcentration was recognized. 3. No changes in the erythrocyte volume, plasma volume and total blood volume were observed in the rats after administration of the powder for one, three, and six days. However, those were decreased in rats treated for ten days. 4. Generally, in various organs of rats the uptake rate of ${24}^Na$ showed a tendency of increasing but that of ${42}^K$ slowed a decreasing tendency. 5. The oxygen consumption was markedly decreased in rats administered the powder. 6. Iodine-131 uptake of thyroid gland was markedly decreased in the rabbits following administration of the powder. 7. In rabbits administered 0.5g/kg for 20 days, fatty changes of hepatic cells, cloudy swelling of the epithelial cells of proximal convoluted tubules of the kidney and the dilation of splenic sinuses were observed, however, milder changes were found in rabbits treated with 0.1g/kg for the same period.
The purpose of this study was to evaluate the effect of moderate physical exercise program on a number of immune parameters in middle school boys($15.07{\pm}0.39$ yrs). 14 volunteers were included in this physical exercise program. They were randomly assigned to an experiment(7) and a control(7) group. Measurements were taken before program, after 4 weeks and 8 weeks of aerobic exercise for immune parameters such as number of circulating leukocytes, concentration of WEC subsets, lymphocyte subsets, immunoglobulins, complements, and number of blood adipose components. Aerobic exercise consisted of track running at a work intensity of 65% HRmax, $45{\sim}55$ min per day, 3 times per week, and for 8 weeks. The results are as follows; 1. There were no significant changes between and within groups in the number of circulating leukocytes and concentration of WEC subsets. 2. There were significant(p<.05) changes in concentration of B-cell between groups, and T-cell, helper T-cell, and B-cell within experimental group. 3. There were no significant changes between and within groups in concentration of complements. 4. There were significant(p<.05) changes in concentration of IgG between groups and within experimental group. 5. There were significant(p<.05) changes in concentration of TG between groups, and TG, HDL-C and LDL-C within experimental group. In conclusion, the moderate exercise training for 8 weeks can be beneficial on immune function and decrease the concentration of flood adipose components in adolescents.
Fine needle aspiration of the breast is an important diagnostic tool in malignant lesions, but is also useful in differentiation of inflammatory breast diseases mimicking carcinoma clinically and radiologically. Recently, the authors have experienced eight biopsy-proven cases of chronic inflammatory diseases of the breast, which consisted of 4 cases of duct ectasia, 2 cases of fat necrosis, and a case of tuberculous mastitis and granulomatous mastitis respectively. Their cytologic features mainly based on the components and the relative frequency of inflammatory cells were evaluated for differential diagnosis of chronic inflammatory breast diseases. The results are as follows; 1. In cases of duct ectasia, varying amount of neutrophils, mononuclear leukocytes, histiocytes and multinucleated giant cells were intermixed with benign epithelial cell clusters. 2 Abundant fat tissue fragments were diagnostic for fat necrosis. Histiocytes and mononuclear cells were main components but not rich, and neutrophils and giant cells were infrequently observed. 3. Characteristic granulomas composed of epithelioid cells, mononuclear leukocytes and Langhans' type giant cells and lymphocytic infiltrates were conspicuous in tuberculous mastitis, and occasionally neutrophils, necrotic materials and epithelial cell clusters were found 4. In granulomatous mastitis, epithelioid cell granulomas were also noted but numerous neutrophils and histiocytes were intermingled within or outside the granulomas.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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