신규 제초제 작용점의 발굴은 유전체학과 조합화학 등 새로운 기술이 등장하여 그 가능성이 높아지고 있다. 대략 $10^{30}$에서 $10^{50}$여 개의 화학물질의 합성이 가능하고 50,000여 개의 식물 유전자 지도가 완성되어 이들의 조합으로 새로운 제초제의 작용점 발굴 가능성이 높아지게 될 것이다. 즉, 고등식물이 가지고 있는 50,000여 개의 유전자 가운데 0.1%, 1.0% 또는 10%가 신규 작용점이 된다면 50, 500, 5000개의 신규 작용점을 발견할 수 있는 것이다. 신규 제초제의 개발을 위해서는 target enzyme의 선택과 결정, 저해제의 설계, 작용점까지 도달하는 과정, 대사적인 운명 등 여러가지 요인들이 검토되어야 한다. 이러한 과정에서 가장 중요한 것은 확실한 작용점의 선택에 있다. 또한 다양한 생화학적 정보를 통하여 작용점/효소의 저해로부터 고사에 이르는 과정을 이해함은 물론 보다 강력한 저해제의 합성과 살초과정을 이해할 수 있어야 할 것이다. 그 동안에는 이미 알려진 작용점을 대상으로 신규 화합물을 합성하거나 유도체를 개발하는 것이 대부분이었지만 최근에는 antisense 기법 등을 활용하여 새로운 치사관련 작용점을 찾아내는데 잠재력과 가능성을 확대시켜주고 있다. 새로운 치사관련 작용점을 발굴한 후에는 대상효소의 화학적, 생화학적 기능과 단백질의 구조를 분석하여 강력한 저해제를 설계하는데 활용하게 될 것이다. 치사관련 돌연변이체와 antisense 기법을 활용하고, 식물 생리학적 반응을 기초로 하여 리드화합물을 탐색하는 것은 새로운 접근방식이며 농약 화학적 특성을 갖는 효소 저해제들의 합성은 크게 6가지로 할 수 있다. 공통특이시얀 기질 유사체 합성, affinity labels, 자살기질체, 반응중간산물, 그리고 extraneous site inhibitors 등을 들 수 있다. 이와 같은 방법으로 후보화합물이 선발된다 하여도 실제식물에 처리하여 흡수, 이행, 대사 등에 관한 시험이 반드시 이루어져야 새로운 제초제를 탄생시킬 수 있다. 또한 약물의 전달과정과 무독화작용을 통하여 pro-herbicide에 대한 연구를 진행하게 될 것이며, 마지막으로 잡초와 작물간의 선택성이 고려되어야 효소 측이적 접근방식에 의한 신규 선택성 제초제의 개발이 성공할 수 있는 것이다.
가열살균 처리시의 온도값을 이용하여 다양한 미생물들의 가열살균 효과를 D값, z값 등의 미생물 내열성 특성치와 kinetic 모델 및 수식을 이용하여 살균치 계산을 컴퓨터를 이용하여 수행함으로써 target 미생물의 살균정도를 예측하고자, Excel과 Visual Basic을 연동하여 작성된 시스템으로 Excel을 기본으로 사용한 프로그램을 개발하였다. 가열살균 target 미생물을 선택하고자 야채식품을 기반으로 하는 식품에서의 미생물을 검토하여, 내열성인 가장 큰 호기성 포자형성균인 Bacillus spp. 계통이 산을 형성하여 맛 등의 품질을 저하시켜 변패를 유발하며, 위생적인 면에서 포자수를 줄이거나 사멸할 필요가 있어서 선택하였다. 병원성 균 중에서 $D_{121.1}$이 0.0065분, z값이 7.8$^{\circ}C$인 Bacillus cereus와 부패현상 관련 균 중에서 $D_{121.1}$이 0.5분, z값이 12$^{\circ}C$인 Bacillus subtilis를 대상으로 해서 개발되었으며, 필요시에는 D값과 z값을 직접 대입하므로서, 여러 가지 미생물에 대해서도 적용이 가능하게 하였다.
Entomopathogenic nematodes, Steinernema carpocapsae, was able to invade and kill the several lepidopteran pests including the beet armyworm, Spodeptera exigua Hubner, which was the most effective target host. The beet armyworms treated with the effective nematode concentrations were died within 48 hrs. The lethal effect of the nematode was varied among the developmental stages of the host. The fifth instar larvae of the beet armyworm was more vulnerable to the nematode than the third instar larvae. Pupae was, however, refractory to the nematode. All three bioessays (topical application, filter paper test, and soil treatment) showed the positive correlation between the number of the treated nematodes and the mortality of the host. Topical application was the most effective and fast-acting method so that it gave the lethal effect 2 days earlier than did filter paper test at the same number of the treated nematodes. Soil treatment required higher number of the nematodes to get the effective lethality than did filter paper test. The fifth instar larvae of the beet armyworm expressed the specific hemolymph proteins of 5 to 10 kDa in response to nematode infection.
Bacillus anthracis는 탄저병의 병원체이다. 탄저병의 독소는 Bacillus anthracis가 가진 세가지 독소로 이루어져 있다. protective antigen (PA), lethal factor (LF)그리고 edema factor (EF)로 구성되어 있다. PA는 세포수용체와 결합하여 활성화 과정을 거친 후 LF 흑은 EF를 세포질 안으로 이동시켜 주는 역할을 한다. LF는 금속이온 $(Zn^{2+})$ 의존적 단백질 가수분해 효소로써 탄저병에 감염된 동물들의 치사독소로 작용하게 된다. 따라서 LF에 대한 특성 분석 및 억제재 개발에 관한 연구는 탄저치료제 개발에 매우 중요한 과정이라 할 수 있다. 본 연구에서는 탄저독소의 치료제 개발을 위해 선행되어야 하는 LF 고처리량 활성검증방법 및 저해제 선별에 더 높은 효율을 가지기 위해 이러한 시스템 방법 등을 이용하여 세포내 검정방법의 기초 자료를 마련하고자 하였다. 이를 위하여 yeast를 숙주로 한 LF 발현 vector의 구축과, 구축한 발현 시스템을 yeast에 형질전환 하여 plasmid의 안정성 및 LF유전자의 발현을 확인하였다. 본 연구는 LF유전자의 발현을 진핵세포 내에서 처음으로 시도했으며, 세포내 검증 시스템 도입의 기초적 자료를 제공하였다. Yeast내에서의 LF의 발현은 탄저병의 저해제 선별이나 활성측정검증을 생체 내에서 용이하게 할 수 있다는 가능성을 나타냈다.
This study was conducted to obtain the acute information of the oral dose toxicity of lyophilized water extract of Picrorrhiza Rhizoma (PR) - dried underground stem of Picrorrhiza kurroa, having various pharmacological effects, in male and female mice. In order to calculate 50% lethal dose ($LD_{50}$), approximate lethal dose and target organs, test article was administered once by oral gavage to male and female ICR mice at 2000, 1000, 500 and 250 mg/kg. The mortality and changes on body weight, clinical signs and gross observation were monitored during 14 days after dosing with organ weight and histopathology of 12 types of principle organs. As the results, we could not find any mortality, clinical signs, changes in the body weight and gross findings except for hair loss, a significantly (p<0.05) increase of body weight gains in 2000mg/kg of PR extracts-dosing male group and some sporadic gross findings. In addition, no meaningful changes on the organ weight and histopathology of 12 types of principle organs were detected in the present study except for significantly (p<0.05) but dose independent changes on thymus, spleen and popliteal lymph nodes weights, and some sporadic accidental histopathological findings. The results obtained in this study suggest that the PR extract is non-toxic in mice and is therefore likely to be safe for clinical use. The $LD_{50}$ and approximate lethal dose of PR extracts in both female and male mice were considered as over 2000 mg/kg.
Human papillomavirus (HPV) is the primary etiologic agent of cervical cancer. Consideration of safety and non human leukocyte antigen restriction, protein vaccine has become the most likely form of HPV therapeutic vaccine, although none have so far been reported as effective. Since tumor cells consistently express the two proteins E6 and E7, most therapeutic vaccines target one or both of them. In this study, we fabricated DC vaccines by transducing replication-defective recombinant adenoviruses expressing E6/E7 fusion gene of HPV-16, to investigate the lethal effects of specific cytotoxic T lymphocytes (CTL) against CaSki cells in vitro. Mouse immature dendritic cells (DC) were generated from bone marrow, and transfected with pAd-E6/E7 to prepare a DC vaccine and to induce specific CTL. The surface expression of CD40, CD68, MHC II and CD11c was assessed by flow cytometry (FCM), and the lethal effects of CTL against CaSki cells were determined by DAPI, FCM and CCK-8 methods. Immature mouse DC was successfully transfected by pAd-E6/E7 in vitro, and the transfecting efficiency was 40%-50%. A DC vaccine was successfully prepared and was used to induce specific CTL. Experimental results showed that the percentage of apoptosis and killing rate of CaSki cells were significantly increased by coculturing with the specific CTL (p <0.05). These results illustrated that a DC vaccine modified by HPV-16 E6/E7 gene can induce apoptosis of CaSki cells by inducing CTL, which may be used as a new strategy for biological treatment of cervical cancer.
적외선 유도 미사일은 미사일에서 자체적으로 방사하는 신호가 없어 항공기에서 접근을 인지하고 대응하기가 어렵다. 또한 적외선 유도 미사일을 탐지하는 MAW(missile approach warning)는 고가의 장비로 현재는 항공기에의 사용이 제한되고 있으며 그 효용성이 공개된바가 없다. 따라서 본 연구에서는 MAW가 탑재되어 항공기가 접근하는 유도 미사일에 대해 회피기동을 수행할 때 항공기의 생존성이 얼마나 증가하는지를 해석하여 MAW의 효용성을 평가하고자 하였다. 생존성의 평가지표로 위험 거리를 사용하였으며 고도 5km를 마하 0.9로 비행하는 항공기에 대해 AIM-9 적외선 유도 미사일이 접근하는 상황에 대한 위험 거리를 방위각 별로 도출하였다. 항공기의 회피기동에 대한 변수로는 5~7km의 MAW 인지거리와 3~7G의 항공기 기동성능을 고려하였다. 해석 결과 MAW를 통한 미사일 접근 인지와 회피기동 만으로도 위험 거리가 상당히 감소하는 것을 확인했다. 회피기동에 따른 위험 거리의 감소는 최대 29.4%로 나타났다. 또한 상대적으로 향상시키기 어려운 항공기 기동성능보다는 MAW 인지거리를 증가시키는 것이 위험 거리의 감소에 더 효과적인 것으로 나타났다.
DNA-functionalized silver and silver/gold bimetallic nanoparticle superstructure probes with controllable sizes and optical properties are synthesized using monothiol DNA and dithiothreitol. The superstructures exhibit a very narrow size distribution, which can be easily controlled by balancing the ratio of dithiothreitol and DNA. These superstructures assemble reversibly in a highly cooperative manner, and are SERS active. Multiplexed colorimetric detection of DNA targets using these superstructure probes has been demonstrated to identify three different DNA target sequences that are associated with three lethal diseases, respectively.
Thyroid cancer is one of the slow-growing tumors with excellent oncological outcomes. However, a small set of patients with unexpectedly severe outcomes are usually ignored. Anaplastic thyroid cancer (ATC) remains one of the most aggressive and lethal solid tumors. Recently, dabrafenib and trametinib combination therapy or neoadjuvant BRAF induction therapy has shown promising results. In addition, a combination of targeted drugs, immunotherapy, surgery, and radiation therapy can improve overall survival in ATC patients. Another disease for which there is no breakthrough treatment is radioactive iodine-refractory differentiated thyroid cancer (DTC). To date, multikinase inhibitors (sorafenib, lenvatinib) targeting the growth factor signaling pathway have been developed and approved as anticancer agents for patients with advanced DTC. This review includes results from multikinase inhibitors to the emergence of new target molecules, including rearrangements during transformation (RET) and tropomyosin receptor kinase (TRK).
An herbal water extract of Bojungikkeehapdaechilkitang(BDT) was prepared to test it for single-dose and repeated-dose toxicity, genotoxicity and reproductive toxicity, and to obtain a 50% lethal dose$(LD_{50})$, approximated lethal dose(ALD), and approximated target organs for BDT. The extract was tested on female and male ICR mice according to KFDA Guideline 1999-61 at doasge level of 2000, 1000, 500, 250 and 125mg/kg/10mL In this study, clinical signs, mortalities and gross findings of principal organs were observed for 14 days of single dosing, and afterwards in some cases. The ALD and $LD_{50}$ of BDT extract obtained in this study was>2000mg/kg for both male and female ICR mice. Also, any possible digestive toxicity of BDT extract was found to be above 1000mg/kg in both male and female ICR mice. The results of this study strongly suggest that BDT extract has no toxic effect at dosage level below 500mg/kg.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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