A multiplex-polymerase chain reaction (PCR) assay was used to detect staphylococcal enterotoxin production by 12 strains of Staphylococcus aureus isolated from clinical specimens. To evaluate the efficacy and/or sensitivity of this method, the results were compared to those obtained with the reversed passive latex agglutination kit (SET-RPLA, Denka Seiken, Japan). Of 10 strains positive by PCR were positive by RPLA but two strains, representing high sensitivity of the former method. Enterotoxin B was the most prevalent by the two methods. The kappa index between the two methods was 0.826, indicating a higher agreement and fully reliable for use. These results would suggest that sensitive, inexpensive, and relatively rapid multiplex-PCR technique may be an effective means for the detection of staphylococcal enterotoxin genes as an alternative to traditional methods such as kits or immunological methods, which depend upon the amount of enterotoxin produced.
독소원성 대장균(enterotoxigenic Escherichia coli, ETEC, EC81, serotype O148:H28)이 생산하는 heat labile enterotoxin(LT)를 검색해 본 결과, reversed passive latex agglutination(RPLA)법에 있어서는 2배로 희석한 용액 (50 ng)으로부터 64로 희석한 용액 (1.56 ng)에서까지 양성반응을 보였으며 polymerase chain reaction (PCR)기법에 있어서는 10 ng으로부터 1 pg희석용액에서까지 147-base pair(bp)의 LT DNA fragment가 확인되었다. Clostridium perfringens A형 (NCTC8238, Hobbs serotype 2)이 생산한는 장독소를 검색해 본 결과, RPLA법에 있어서는 2배로 희석한 용액 (50 ng)으로부터 64로 희석한 용액 (1.56 ng)에서 까지 양성반응을 보여 독소원성대장균이 생산하는 LT와 일치하였으나, PCR기법에 있어서는 10ng로부터 10 pg 희석용액에서 까지 354-bp의 DNA fragment가 확인되어 독소원성대장균이 생산하는 LT보다 1/10의 낮은 감도를 보였다. PCR기법은 RPLA법에 비하여 훨씬 신속하고 소량의 sample로 장독소를 확인할 수 있었다.
This study was conducted to determine the serum antibodies against toxoplasma in swine from breeding-pig farm, pig farm and abattoir by latex agglutination(LA) test. LA test was carried out with commercial Toxo-MT kit (Eiken chemical co.). The results obtained were summerized as follows : 1. The cut-off titer of positive and negative reactions by Toxo-MT antigen used in this experiment was determined as the serum dilution of 1 ; 32. 2. positive rates of toxoplasma antibodies in 823 swine sera were 17.0%(140 cases) by LA test. 3. The toxoplasma antibody detection rates against 194 swine sera in breeding-pig farm, 273 swine sera in pig farm and 356 swine in abattoir were 46.9%(91 cases), 8.4%(23 cases) and 7.3% (26 cases) , respectively. 4. In LA test serum antibody titers in 823 test sera were shown as 51 cases (36.4%) in 1 : 32, 40(28.6%) in 1;64, 17(12.1%) in 1:128, 14(10.0%) in 1:256, 10(7.1%) in 1:512, 5(3.6%) in 1:1,024, and 3(2.1%) in 1 : 2,048. 5. Positive rates of toxoplasma antibodies in swine sera from each breeding-pig farm were 20.0∼61.9%.
This study was conducted to detect the serum antibody of toxoplasma in swine from breeding-pig, rearing-pig farm and slaughtered pig in abattior by latex agglutination(LA) test. The perfomance of LA test was carried out with commercial Toxo-MT kit(Eiken Chemical Co.)by Tsubota and Ozawa's method. The cut-off titer of positive and negative reactions by Toxo-MT antigen used in this experiment was determined as the serum titer of 1 : 32. Positive rate of toxoplasma antibody from the total of 823 serum samples by LA test was 17.0%(140 cases). And positive rates of toxoplasma antibody against serum samples of 194 from breeding-pig farm, 273 from rearing-pig farm and 356 from abattior were 91 cases(46. 9%), 23 cases(8.4%) and 26 cases(7.3%), respectively. The distributions of serum antibody titers in 823 test sera by LA test were shown 51 cases(36.3%) in 1:32, 40(28.6%) in 1:64, 17(12.1%) in 1:128, 14(10.0%) in 1:256, 3(2.1%) in 1:512, 5(3.6%) in 1:1024 and 3(2.1%) in 1:2048. The ranges of positive rate from the sera in each group of breeding-pig farms were 20~61.9%.
Sensitivity of anti-Texoplasma antibody (IgG) test by enzyme·linked immunosorbent assay (ELISA) was evaluated in comparison with indirect laten agglutination (ILA) using 2,016 paired human samples of serum and cerebrospinal quid (CSF) . The samples were collected from neurologic patients in Korea with mass lesions in central nervous system(CNS) as revealed by imaging diagnosis(CTIMRI). When the sera were screened for anti-Toxoplasma antibody by ILA, 76 cases (3.8%) were positive (1:32 or higher titers). In the pairs samples of CSF, no positive reactions were observed. When ELISA was performed using PBS extract of Percoll purified tachysoites as antigen, cut-off absorbance was determined as 0.40 for serum and 0.27 for CSF tests. The antibody positive rates by ELISA were 7.0% in serum and 5.6% in CSF Of them, 40 cases(2.0%) showed positive reactions in both serum and CSF, The antibody positive rates were higher in groups older than 40 years, The rates were higher in male(4.7% by ILA, 8.3% by ELISA) than in female(2.2% by ILA, 5.0% by ELISA). The rates in CSF showed no such sex difference. ELISA showed twice higher positive rates when serum was tested, and was sensitive enough to detect specific antibodies in CSF. Etiologic relations between positive antibody tests and CNS lesions remained unknown.
A simple test using latex-agglutination was developed to detect serologically tobacco mosaic virus (TMV), soybean mosaic virus (SoyMV), and barley stripe mosaic virus (BSMV) from infected Plants. Latex spheres ( 0.81 $\mu$, Difco) were adsorbed with immuno globulin purified by electrophoresis from crude antiserum against viruses. The antibody- sensitized latex suspension was mixed with sap from virus -infected leaves in a glass capillary tube (inner diam. 1mm $\times$ 100 mm length) The mixture, after agitation, was observed under a stereo microscope at low magnification (X20 - X4O), to examine the reaction between antigen (Virus) and its antibody. Flocculation occurred when the reaction was positive.
The prevalence of Toxoplasma (T.) gondii was surveyed using a latex agglutination test (LAT) in native Korean cattle. A blood sample was collected from female 105 cattle in the Daejeon area of Korea. All cattle were asymptomatic and had not received any prophylactic treatment for T. gondii. Blood samples were collected via the caudal vein. The cattle ranged in age from 2~6 years (mean 3.7 years). LAT detected antibody to T. gondii in four of 105 (3.8%) cattle. However, the hazard analysis and critical control point protocol has been applied to cattle farms and beef traceability has been strengthen.
A total of 573 Patients hospitalized in National Seoul Mental Hospital and 76 of healthy Persons as control were examined by indirect latex agglutination test in order to evaluate Toxoplasma antibody titers in mental patients. Throughout this survey, 1:32 or more titers of diluted sera were regarded as positive. 1, The 573 samples of test sera showed negative in 386 cases (67.4%), 1:2 in 93 cases (16.2%), 1:4 in 57 cases (9.9%), 1:8 in 14 cases (2.4%), 1:16 in 12 cases (2.1%), 1:32 in 5 cases (0.9%), 1:64 in 1 case (0.2%), 1:128 in 3cases (0.5%) and 1:256 in 2 cases (0.3%) respecttively, 2. Among total 573 mental patients, 11 cases (1.9%) showed positive, and they were 9 cases 41.8%) of schizophrenia and 2 cases (7.4%) of manic depression. 3. One case (1.3%) out of 76 control sera showed positive result.
Clostridium perfringens A형이 생산하는 장독소를 검색해본 결과, RPLA법에 있어서는 2배로 희석한 용액으로부터 64배로 희석한 용액 (NCTC 8239 Hobbs serotype 3 CPE$^+$)에서까지 양성반응을 보였으며 PCR 기법에 있어서는 10 pg 희석 용액까지 364 bp의 장독소 DNA fragment(NCTC 8238 Hobbs serotype 2 CPE$^+$)를 확인 할수 있었다. 그러므로 장독소를 검색하기 위해서는 PCR기법이 RPLA법에 비하여 훨씬 감도가 높음을 확인할 수 있었다.
A total of 377 pregnant women, 43 pelvic tumor patients and 80 of multiphysic health center persons as controls were examined by indirect latex agglutination test in order to evaluate Toxoplasma antibody titers at Kang-Nam St. Mary's Hospital in Seoul. Throughout this survey, 1 : 32 or more titers of diluted sera were regarded as positive. 1. The 377 samples of test sera in pregnant women showed negatives in 319 cases (84.6%), 1 : 2 in 44 cases (11.7%), 1:4 in 9 cases (2.4%), 1:8 in 2 cases (0.5%), 1:16 in 1 case (0.3%) and 1 : 32 in 2 cases (0.5%) respectively. 2. The 43 samples of test sera in pelvic tumor patients showed negatives in 29 cases (67.4%), 1:2 in 8 cases(18.6%), 1:4 in 1 case(2.3%), 1:16 in 2 cases (4.7%), 1:32 in 1 case(2.3%) and 1 : 128 in 2 cases (4.7%). 3. The 80 samples of test sera in multiphysic health center persons as controls negatives in 56 cases (70.0%), 1.2 in 19 cases (23.8%), 1:4 in 3 cases (3.8%), 1:8 in 1 case (1.3%) and 1 : 128 in 1 case (1.3%). 4. Among total 420 study cases, 5 cases (1.2%) showed Positives, and they were 2 cases (0.5%) of pregnant women and 3 cases (7.0%) of pelvic tumor patients. 5. One case (1.3%) out of 80 control sera showed positive result.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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