Silage making has become a significant method of forage conservation worldwide. To determine how tomato pomace (TP) may be used effectively as animal feed, it was ensilaged for 90 days and microbiology counts, fermentation characteristics and chemical composition of tomato pomace silage (TPS) were evaluated at the 30th, 60th, and 90th days, respectively. In addition, 103 lactic acid bacteria were isolated from TPS. Based on the phenotypic and chemotaxonomic characteristics, 16S rDNA sequence and carbohydrate fermentation tests, the isolates were identified as 17 species namely: Lactobacillus coryniformis subsp. torquens (0.97%), Lactobacillus pontis (0.97%), Lactobacillus hilgardii (0.97%), Lactobacillus pantheris (0.97%), Lactobacillus amylovorus (1.9%), Lactobacillus panis (1.9%), Lactobacillus vaginalis (1.9%), Lactobacillus rapi (1.9%), Lactobacillus buchneri (2.9%), Lactobacillus parafarraginis (2.9%), Lactobacillus helveticus (3.9%), Lactobacillus camelliae (3.9%), Lactobacillus fermentum (5.8%), Lactobacillus manihotivorans (6.8%), Lactobacillus plantarum (10.7%), Lactobacillus harbinensis (16.5%) and Lactobacillus paracasei subsp. paracasei (35.0%). This study has shown that TP can be well preserved for 90 days by ensilaging and that TPS is not only rich in essential nutrients, but that physiological and biochemical properties of the isolates could provide a platform for future design of lactic acid bacteria (LAB) inoculants aimed at improving the fermentation quality of silage.
The optimal conditions for protoplast fusion between the cells of kanamycin resistant Lactobacillus bulgaricus IFO 13593 and those of lincomycin resistant Lactobacillus helveticus IAM 12090 were investigated in this study. The highest fusion frequency of 9.1*10-4 was obtained when protoplast fusion was carried out for 0.5 min using 40% PEG 4000 solution as a cell fusion stimulant and subsequent post-PEG-incubation was undergone at 30 for 30 min in the PPI medium.
복숭아 수확시기에 낙과한 토양에서 Lactobacillus sp. D4와 D5 균주를 분리하였다. 분리한 Lactobacillus sp. D4와 D5 균주를 동정하기 위하여 형태학적 동정, 생화학적 동정 및 16S rRNA 유전자서열 분석을 수행하였다. 16S rRNA 유전자서열 분석 결과 Lactobacillus sp. D4는 Lactobacillus plantarum subsp. plantarum ATCC $14917^T$과 Lactobacillus pentosus ATCC $40997^T$에 각각 99.05%, 98.98% 일치하였으며, Lactobacillus sp. D5는 Lactobacillus pentosus ATCC $40997^T$, Lactobacillus plantarum subsp. plantarum ATCC $14917^T$에 각각 98.71%, 98.64% 일치하였다. Lactobacillus sp. D4와 D5 균주는 당 이용성 비교에서 Lactobacillus plantarum ATCC $14917^T$과 Lactobacillus pentosus ATCC $8041^T$에 비교하여 다른 결과를 나타내었다. 정확한 동정을 위하여 VITEK MS matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) 분석, multiplex PCR, random amplified polymorphic DNA (RAPD)-PCR을 수행하였다. 이러한 결과에 근거하여 Lactobacillus sp. D4와 D5 균주는 Lactobacillus plantarum으로 동정되었다.
본 연구에서는 Kefir를 $0.02\%\;NaN_3$를 포함하는 MRS agar에 도말하여 1차적으로 Lactobacillus sp.를 선발하였고, 그 중 가장 우수한 균을 최종 분리하였다. 분리된 유산균은 API kit를 이용한 당 발효성 및 생화학적 시험을 토대로 Lactobacillus rhamnosus에 $99.5\%$의 상동성을 가진 유산균종으로 동정되었다. Lactobacillus rhamnosus는 amylase와 xylanase 비활성이 0.673과 $0.288\;{\mu}mole/min/mg$으로 비교적 높은 활성을 보였다. pH 2에서 $65\%$ 이상의 강한 생존률을 나타냈고 $1.0\%$ 담즙산에서도 $72\%$가 생존하는 내성을 나타냈다. $60^{\circ}C$에서도 Lactobacillus rhamnosus는 강한 열 안정성을 나타내 대조구인 Lactobacillus acidophilus보다 100배 이상의 생존률을 보였다. 또한 Lactobacillus rhamnosus는 대장균에 첨가하여 혼합배양시 18시간 이내에 대장균을 $100\%$ 사멸시켜 높은 항균 활성을 나타냈다. Lactobacillus rhamnosus는 100ppm CTC, 50ppm OTC, 150ppm Lincomycin, 200ppm Tylosin에서는 생장이 억제되나 기타의 9가지의 항생제에 대하여는 강한 내성을 갖는 것으로 확인되었다. 이상의 결과로부터 새로 분리한 Lactobacillus rhamnosus는 소화에 관련한 효소 활성이 높고 내산성 및 내담즙산성, 열 안정성이 우수하며 높은 항균 활성을 함유하여 식품용 probiotics로 충분한 활용 가치가 있는 것으로 생각되었다.
1. 보리에서 분리한 균주는 Gram 양성의 구균으로 미생물 동정기를 이용하여 동정해 본 결과 Enterococcus mundtii와 89%의 상동성을 보여 이 균주는 Enterococcus 속으로 동정되었다. 2. 초기 pH는 모두 5.5였으며 시간이 경과함에 따라 가장 먼저 pH가 떨어지기 시작한 것은 Lactobacillus sanfrancisco이였으며 다음으로 Enterococcus mundtii와 Lactobacillus plantarum의 순이였다. pH 4.5까지 떨어지는데 걸리는 시간도 Lactobacillus sanfrancisco이 8시간 10분으로 가장 짧았으며 Enterococcus mundtii는 9시간 30분이였으며 Lactobacillus plantarum은 9시간 50분의 순이었다. 동일한 pH에서 산도는 Lactobacillus sanfrancisco가 가장 산도가 높았으며 Entercoccus mundtii, Lactobacillus plantarum의 순이었다. 3. 대조군에 비해 균주가 혼합된 식빵 3개 모두 부피가 커졌으며 이중 Lactobacillus sanfrancisco가 가장 부피가 컸으며 대조군에 비해 11%정도 부피가 증가하였다. 부피를 무게로 나눈 용적비도 부피와 같은 경향을 보였다. 식빵의 높이는 Lactobacillus sanfrancisco와 Enterococcus mundtii이 가장 컸고 다음이 Lactobacillus plantarum, 대조군의 순이었다. 4. 96시간 경과 시 대조군에만 곰팡이가 발견되었고 다른 군에서는 144시간 이후에도 곰팡이가 발견되지 않았다. 경도는 시간경과에 따라 지속적으로 증가하였으며 경도가 가장 낮은 Lactobacillus sanfrancisco와 다음으로 낮은 Enterococcus mundtii의 경우 초기에는 경도 변화가 별로 없었다가 48시간 경과 시 경도가 증가하였다.
A feeding trial was carried out effect of supplemental Lactobacillus on productivity, egg quality and intestinal microflora in 320 21 weeks - old laying hens for 12 week. Supplemented Lactobacillus strains were Lactobacillus amylovorus LLA7(LA), Lactobacillus crispatus LLA9(LC) and Lactobacillus vaginalis LLA11(LV). Three strains mixed to basal diet which containing 2,800㎉/kg ME, 16% CP with none, LA, LC, LV, LA+LC, LA+LV, LC+LV and LC+LC+LV. Supplemental level was 10(sup)7 cfu/g diet. Egg production was tended to increase with adding Lactobacilus, but not difference significantly. Average egg weight was heavier in adding Lactobacillrs compared to the none, and heaviest in LA+LV, LC+LV(P〈0.05). In periodic observation, the gap of egg weight with adding Lactobacillus or not was severe persisting laying periods. The diet containg MC or LV was better than LA, which means the difference by Lactobacillus strains for egg weight. Daily egg mass also increased in adding Lactobacillus about 1.1 to 2.3 g/hen, but not difference significantly. Feed intake and feed conversion were not difference regardless Lactobacillus strains and laying periods. Haugh unit improved with adding Lactobacillus. Cecal Lactobacillus spp. was increased with adding Lactobacillus(P〈0.05), didn't observed E. coli depression. In summary, supplemental Lactobacillus could improve for egg production, egg weight, egg mass and egg white. And those of effect expect much beneficial with mixing Lactobacillus which established well as single strain.
본 연구는 Lactobacillus paracasei와 Lactobacillus rhamnosus가 요구르트에 오염된 효모의 증식을 억제해서 품질을 향상시키기 위하여 진행하였다. 효모 투입 후 저장기간 동안 효모의 증식 속도는 Lactobacillus paracasei와 Lactobacillus rhamnosus가 포함된 실험구가 대조구에 비해 최소 1일에서 최대 4일까지 지연시켰다. 스웰링 현상은 대조구에 비해 실험구가 효모의 증식 속도를 일정 기간 지연시켜 주는 효과가 있었다. 따라서 요구르트 제조 시 Lactobacillus paracasei와 Lactobacillus rhamnosus를 사용한다면, 저장기간 동안의 품질 안정성이 향상되어 유통기한을 연장할 수 있고, 이로 인해 발효유 제조업체의 생산성과 소비자의 식품 안전성이 향상되는 것으로 사료된다. 또한 Lactobacillus paracasei와 Lactobacillus rhamnosus가 요구르트의 품질 기준인 후산 발효와 관능에 미치는 영향에 대해 조사하였다. 요구르트 제조 후 $10^{\circ}C$에서 저장할 경우 대조구에 비해 실험구의 산도 변화 폭은 미미하여 후산 발효가 거의 일어나지 않았다는 것을 알 수 있었다. 이는 제조일로부터 유통기한 만료일까지 일정하게 관능적 풍미를 유지시켜 줄 수 있다는 것을 의미하며, 이로 인해 소비자에 대한 관능적 품질향상을 꾀할 수 있다. 그리고 Lactobacillus paracasei와 Lactobacillus rhamnosus가 추가된 실험구는 대조구에 비해 조직감이 상대적으로 좋았으며, 풍미나 맛 또한 우수하였다. 즉, 요구르트에 Lactobacillus paracasei와 Lactobacillus rhamnosus의 사용은 효모의 증식 억제를 통해 제품 품질의 안전성 향상, 후산 발효 억제로 인한 품질의 균일성 증대, 조직감 및 풍미 향상으로 인한 관능적 품질 향상에 긍정적인 영향을 끼칠 것으로 판단된다.
The aim of this study was to develop species-specific primer sets for kimchi Lactobacillus. Known gene sequences of Lactobacillus 16S rRNA were collected from the NCBI Gene bank, and 69 primer sets were designed using the homologous gene sequence. Six species of kimchi Lactobacilli were used as reference strains: Lactobacillus brevis KCTC3102, Lactobacillus farciminis KCTC3681, Lactobacillus fermentum KCTC3112, Lactobacillus hilgardii KCTC3500, Lactobacillus plantarum KCTC3099, and Lactobacillus sanfranciscensis KCTC3205. PCR amplification and gel electrophoresis were performed to identify the accuracy and specificity of the developed primer set. The results show that the primer set of 5'-aagcctgcgaaggcaag-3' & 5'-aggccaccggctttg-3', 5'-acatactatgcaaatctaagagattagacg-3' & 5'-actgagaatggctttaagagattagcttac-3' resulted in a specific PCR band on L. hilgardii, and primer set of 5'-ctaataccgcataacaactactttcacat-3' & 5'-aacttaataaaccgcctacattctctttac-3' on L. farciminis. The results indicate that the developed primer sets can provide a useful tool for the identification and differentiation of L. hilgardii and L. farciminis from other Lactobacillus species of kimchi.
This study was carried out to examine the effects of Lactobacillus spp. on performance and cecal microflora in broiler chicks. Eight diets consisting of basal diet(C), C+Lactobacillus crispatus BC7 (T2), C+Lactobacillus reuteri BC9 (T3), C+L.reuteri BC5+L.crispatus BC9 (T4), C+L. reuteri BC5 (T1)+L.reuteri BC9 (T5), C+L.crispatus BC7+L.reuteri BC9 (T6) and C+L.reuteri BC5+L.crispatus BC7+L.reuteri BC9 (T7), were fed to Ross male broiler chicks for 5 weeks. The level of supplemented Lactobacillus spp. was 107 cfu/g diet. Body weight and feed intake were measured every week, and cecal microfla was counted at 1 and 5 weeks for Lactobacillus and yeast. Body weight increased signigicantly in supplemental Lactobacillus treatments from 2 weeks of age (p<0.05). Chicks in T2, T5 and T5 of treatments were heavier than those of other treatments at 5 weeks of age(p<0.05). Viability was not different significantly. Feed intake and feed conversion also were not different, although feed conversion improved slightly in supplemental Lactobacillus treatments. Lactobacillus spp. of cecal content was increased in supplemental Lactobacillus treatments at 1 week, but no significance was found. The number of yeast in cecum was not different from that of supplemental Lactobacillus. In conclusion, Lactobacillus, L.crispatus BC7 and L.reuteri BC9 from broiler cecum could contribute to the increase in body weight with supplemented mono-or mixing of di-lactobacilli. The results indicate that Lactobacillus feeding can benefit to intestinal lactobacillus at early growing broiler.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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