폐모(Fritillaria thunbergii)의 자구인편, 줄기, 및 마디조직 및 정단을 구명하고자 실험한 결과는 다음과 같다. 1. 자구형성수는 자구인편조직에 비해 마디나 줄기조직에서, BA처리구보다 kinetin처리구에서 현저히 증가하였다. 줄기조직은 생장이 3cm이하일 때 채취하여 kinetin이 $1.0{\sim}3.0mg\;/L$첨가된 배지에 배양하였을 , 마디조직은 3cm이상 생장한 조직을 kinet이 5.0mg /L 첨가된 배지에 배양하였을 때 자구형성수가 증가하였다. 기내에서 생장한 마디의 액아에서 자구가 직접 형성되는 현상도 관찰되었는데 최고 15개의 자구가 마디에서 형성되었다. 2. 신초가 l0cm 이상 생장한 후 줄기조직을 채취하여 배양하였을 때는 어린 줄기조직보다 자구 형성능력이 감소하였으며 생장조절제의 첨가가 자구형성에 필수적이었고 적정농도는 kinetin 1.0 mg /L였다. 3. 지하에서 생장중인 패모에서는 줄기조직이나 정단이나 자구조직에 비해 구형성율이 높았으며 자구 형성에 적합한 당의 농도는 $5{\sim}7%$였다. 4. 이상의 결과를 종합해 보면 패모의 기내 배양재료로는 자구 인편조직에 비해 3cm정도 생장한 줄기나 마디조직을 이용하는 것이 대량중식에 효과적일 것으로 생각되었다. 특히 줄기나 마디조직은 구형성수가 최고 20배 이상 달하여 중식율이 상당히 높았다. 생장조절제 요구도는 배양재료에 따라 다소 차이가 있으나 Kinetin $1.0{\sim}5.0mg\;/L$가 적합하였다.
김엽체의 생장에 미치는 식물흐르몬의 영향을 조사하기 위해서 Gibberellin, IAA, Kinetin, NAA및 2.4-D 등을 농도별로 회석한 배지에서 김엽편을 32일간 배양하고 또 2차적으로 Kinetin의 농도별배지에서 수온을 $5^{\circ}C$와 $10^{\circ}C$로 구분하여 18일간 배양하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다. (1) Gibberellin은 10.0mg/l 농도에서, 기타는 모두 5.0mg/1 농도의 배지에시 각각 최고생장효과가 나타났다. 간종량으로 본 효율치는 Kinetin이 $312.5\%$(엽면체:$345.3\%$)로 으뜸이며 2.4-D는 $257.5\% (236.1\%)$, Gibberellin $247.9\%(241.9\%)$, IAA, $166.7\%(147.6\%)$, NAA $141.7\% (167.7\%)$의 순이였다. (2) 특히 Kinetin 5.0mg/1농도에서 배양된 엽편은 그 색채가 진한 흑갈색으로 가장 좋았으며 세포마다 생기 있는 큰 색소체가 뚜렷하고 건전하여 뛰어난 효과가 나타났으나 기타는 색채가 담갈색 또는 황록갈색으로 변하고 사세포가 많이 발견되었으며 생세포도 원형질이 위축되었거나 큰 세포가 생겨 매우 불건전하였다.(3) 저온($5^{\circ}C$)과 고온($10^{\circ}C$)에서의 Kinetin의 생장효율은 저농도에서는 대차가 없었으나, 5.0mg/1의 고농도애시는 저온이 $366.7\%$, 고온이 $318.8\%$로서 $48\%$의 효율차가 생겼으며 세포의 건전성은 1차시험때와 마찬가지로 모두 좋았다.(4) 최고생장효과가 나타난 Kinetin 5.0mg/1농도에서는 엽편의 녹변에 지름 $25.0\sim27.5\mu$ 정도의 이상대형세포가 많이 발견되었으며 그 중에는 한 세포내에 수개의 색소체가 있는 것이 관찰되었다. 두께도 $41.0\sim42.0\mu$으로 비교적 두꺼웠다.(5) Kinetia 1.0mg/l농도의 배지에서 배양된 엽편중에는 조정기을 형성하고 있는 세포군이 관찰되었다.
마산약(山藥) 경절편(莖節片)의 기내조직(器內組織) 배양(培養)을 위해서 적정배지(適正培地)가 선발(選拔)됨에 따라 이에 적합시(適合時) 되는 생장조절물질(生長調節物質) 활성탄(活性炭)의 처리농도(處理濃度)를 구명(究明)함으로서 기내조직(器內組織) 배양(培養)에 의(依)한 증식율(增殖率)를 높이코져 무기강기성(無機강基性)이 낮은 1/8MS, White에 IAA와 NAA를 $1{\sim}4mg\;/\;\ell$ 로 하고 활성탄(活性炭)을 $0,\;1,\;3,\;6g\;/\;\ell$ 수준(水準)으로 실험(實驗)을 실시(實施)하였던 바 다음과 같은 결과(結果)를 얻었다. 1. 1/8MS 배지(培地)의 경우 $1{\sim}4mg\;/\;\ell$, Kinetin $2mg\;/\;\ell$ 그리고 활성탄(活性炭)을 $1{\sim}3g\;/\;\ell$ 첨가(添加) 하므로서 Shoot 유기(誘起)와 식물체(植物體)의 재분화률(再分化率)이 모두 100%에 달하는 효과(效果)를 보였으며 이러한 효과(效果)는 NAA처리시(處理時)에도 같은 경향(傾向)이 있었다. 2. White 배지(培地)의 경우 IAA $1mg\;/\;\ell,\;Kinetin\;2mg\;/\;\ell$ 그리고 활성탄(活性炭) $6g\;/\;\ell$ 첨가처리(添加處理)와 NAA $4mg\;/\;\ell,\;Kinetin\;2mg\;/\;\ell$ 그리고 활성탄(活性炭)을 $1g\;/\;\ell$ 첨가처리(添加處理) 만이 식물체(植物體)의 재분화율(再分化率)이 l00%에 달하였으나 그 외(外) 처리(處理)에서는 대부분(大部分) 저조(低調)하였다. 3. 발육상태(發育狀態)를 보면 1/8M /S 배지(培地)의 경우 IAA $2mg\;/\;\ell,\;Kinetin\;2mg\;/\;\ell$ 그리고 활성탄(活性炭)을 $1g\;/\;\ell$ 첨가처리(添油處理)와 NAA $4mg\;/\;\ell,\;Kinetin\;2mg\;/\;\ell$ 활성탄(活性炭)을 $1g\;/\;\ell$ 첨가처리(添加處理) 하므로서 모두 주당(株當) 본수(本數)가 $2.3{\sim}2.7$개(個)이고 발육상태(發育狀態)도 활성탄(活性炭)$0g\;/\;\ell,\;3g\;/\;\ell,\;6g\;/\;\ell$ 처리(處理)보다 양호(良好)하였다. 4. 그러나 White 배지(培地)의 경우 IAA $1{\sim}4mg\;/\;\ell,\;NAA\;1{\sim}mg\;/\;\ell$ 그리고 $Kinetin\;2mg\;/\;\ell$ 처리(處理)의 대부분(大部分)이 주당(株當) 본수(本數)가 거의 1개체(個體) 정도(程度)이도 발육상태(發育狀態)도 불량(不良)하였으나 NAA $4mg\;/\;\ell\;Kinetin\;2mg\;/\;\ell$ 그리고 활성탄(活性炭) $1g\;/\;\ell$ 첨가처리(添加處理)에서 만이 주당(株當) 본수(本數)가 2.3개이고 개체당(個體當) 발근수(發根數)가 월등(越等)히 많았다. 5. 실험결과(實驗結果) 마 경절편(莖節片) 배양(培養)의 Shoot유가(誘起)에 가장 효과적(效果的)인 배지(培地)는 1/8MS+1AA $2mg\;/\;\ell+Kinetin\;2mg\;/\;\ell$+활성탄(活性炭) $1g\;/\;\ell$ 이였으며, White+NAA $4mg\;/\;\ell+Kinetin\;2mg\;/\;\ell$+활성탄(活性炭)$1g\;/\;\ell$ 로 처리(處理)하는 것이 바람직한 결과(結果)를 얻었다.
This study was undertaken to investigate the influence of kinetin and 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid on the rate of growth, the contents of RNA, DNA, and protein. And also the effect of plant growth regulator on isoperoxidases in callus derived from root (root-callus) and petiole (petiolecallus) was investigated. The rate of growth in petiole-callus was higher than the rootcallus at 0.1 mg/l kinetin and 1mgfl 2,4-D. At 1mgll kinetic, the rate of growth increased, but at high concentration the rate of growth decreased fast. The contents of RNA, DNA and protein also increased, but it did not coincide with the increase of the growth rate of callus. The isoperoxidases of callus grown at various amounts of 2,4-D and kinetic occurred in an almost fashion, but those of root-callus appeared different from those of petiole-callus.
Kinetin(4.7$\times$10\ulcornerM) and 6-benzylaminopurine (2.2$\times$10\ulcornerM) were found to increase ca. 1.5-fold putrescice content in corn grown in medium containing kinetin and 6-benzylaminopurine(6-BAP) for 3days whereas kinetin was found to decrase ca. 30% spermidine and spermine, respectively. KCI (3$\times$10\ulcornerM) was found to decrease more than 50% putrescine content. After germination, ornithine decarboxylase activity was observed to increase constantly whereas arginine decarboxylase activity remained constant, suggesting involvement in putrescine biosynthesis. 6-benzylaminopurine was shown to increase more activities of arginine ornithine decarboxylase than kinetin when they were added to medium.
The optimized in vitro culture system was investigated for improvement of regeneration efficiencies by observing the responses of scutella-derived callus of Korean rice (Oryza sativa L.). Large variations of callus induction (43.9-93.9%) and shoot regeneration (0-88.7%) were observed among the rice cultivars depending on medium. However, shoot regeneration was significantly improved by selected utilization of basal medium, growth regulators, and carbon sources. N6 basal medium was more efficient for embryogenic callus induction than MS or LS basal medium, while MS was superior to N6 for shoot regeneration. The calli of highly regenerative cultivars grew faster and showed higher rates of green tissue formation (GT) and shoot regeneration (SR) and lower rate of callus browning (CB) than those of recalcitrant cultivars. Although a higher level of kinetin stimulated the GT and SR in highly regenerative cultivars, $10\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin generally suppressed the GT and SR, while CB was accelerated compared to $2\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin. Additional benefits of sorbitol combined with maltose (or sucrose) under $5\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin were certainly confirmed on regeneration efficiencies compared to sucrose alone as carbon source and osmotic regulator. This combination showed high rate of GT and SR with multiple shoots while low rate of CB. With MSRK5SM-Pr medium ($5\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin, 3% sorbitol, 2% maltose, $500\textrm{mgL}^{-1}$ proline), the regeneration efficiencies of total 17 out of 24 cultivars were practically improved 160% on average compared to MSRK2S ($2\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin, 3% sucrose) control medium. Especially, the medium was most effective to the cultivars showing a medium level of regenerability such as Daesanbyeo and Dongjinbyeo and Suwon477, enhancing efficiencies more than 300-600% compared to MSRK2S medium.
Three-week old Commelina communis was transferred and grown in Hoagland solution containing $100{\mu}M\;Cd^{2+},\;100{\mu}M\;Cd^{2+}+100{\mu}M\;kinetin,\;100{\mu}M\;Cd^{2+}+100{\mu}M\;zeatin\;and\;100{\mu}M\;Cd^{2+},\;200{\mu}M$ zeatin for 7 days, and then a number of physiological activities were investigated. In control, the length of the stem of plants was increased to 4.7cm, but in $Cd^{2+},\;Cd^{2+}+kinetin,\; Cd^{2+}+100{\mu}M\;zeatin\;and\;Cd^{2+}+200{\mu}M$ zeatin treatments, the growth of plants were increased to 1.5cm, 2.1cm, 3.9cm and 4.3 em, respectively. In the treatments of $Cd^{2+},\;Cd^{2+}+kinetin,\;Cd^{2+}+100{\mu}M\;zeatin\;and\; Cd^{2+}+200{\mu}M$ zeatin, total chlorophyll contents were reduced to $26\%,\;24\%,\;15\%\;and\;3\%$, respectively, on the contrast to the control. In chlorophyll fluorescence experiments, Fv/Fm ratios were also reduced to $44\%,\;21\%,\;17\%\;and\;5\%$ in the light intensity of $2100{\mu}Mmole\;E\;m^{-2}s^{-1}\;by\;Cd^{2+},\;Cd^{2+}+kinetin,\;Cd^{2+}+$100{\mu}M\;zeatin\;and\;Cd^{2+}+200{\mu}M$ zeatin treatments on the contrast to the control. Water stresses were increased to 2.6, 1.7 and 1.2 times by $Cd^{2+},\; Cd^{2+}+kinetin\;and\;Cd^{2+}+{\mu}M$ zeatin. On the other hand, combination of $Cd^{2+}+200{\mu}M$ zeatin reduced water stress to $0.12\%$. In $Cd^{2+}$ accumulation experiments $Cd^{2+}$transports were inhibited to $33\%\; 48\%\;and\;70\%\;by\;Cd^{2+}+kinetin,\;Cd^{2+}+100{\mu}M\;zeatin\;and\;Cd^{2+}+200{\mu}M$ zeatin. Therefore, it could be concluded that zeatin clearly reduced the toxicities of $Cd^{2+}$ by reducing the absorption of $Cd^{2+}$.
In vitro culture of panicle has been the method to accumulate starch and protein in immature grains by providing nutrients after florets crossed between remote genotypes artificially. Grain filling means embryo development and sucrose translocation from photosynthetic source, and starch manufacture in endosperm. The concentrations of sucrose used to culture immature rice panicle were 5, 10, 15, 20% and glutamine was 20 mM. When immature rice panicles at 5 days after flowering were cultured in distilled water with different concentrations of sucrose, glutamine 20 mM and MS medium with different concentrations of sucrose, glutamine 20 mM for 30 days the later was effective on grain filling. The optimal concentration of sucrose on grain filling in vitro culture of rice panicle was 10% and the weight of grain cultured was 10.14 mg that was corresponded to 57% of intact plant. In the method of treating plant growth regulators, the culture of immature rice panicle adding in MS medium with Kinetin, IAA, $\textrm{GA}_3$ were effective on grain filling than the culturing of immature rice panicle after submerging in solutions of Kinetin, IAA, $\textrm{GA}_3$ for 1day. When immature rice panicle was cultured in MS medium with sucrose 10% and Kinetin 46.47 $\mu$M it was effective on grain filling, respectively. The weight of grain cultured was 13.1mg that was corresponded to 75% of intact and germination rate was 51 %. When immature rice panicles were cultured in medium with different concentrations combined with Kinetin 4.65, 46.47, 464.7 $\mu\textrm{M}$, IAA 5.71, 57.08, 570.80 $\mu\textrm{M}$ for 30 days and in medium with IAA 5.71, 57.08, 570.80 $\mu\textrm{M}$ for 15 days after culturing in medium with Kinetin 4.65, 46.47, 464.70 $\mu\textrm{M}$ for 15 days the effect on grain filling was similar.
상수리나무와 굴참나무의 잎과 절간조직(節間組織)을 MS 및 GD배지(培地)에 식물생장조절물질(植物生長調節物質)로 NAA와 BAP, NAA와 kinetin, 2,4-D와 BAP, 2,4-D와 kinetin을 몇가지 농도(濃度)로 첨가하여 callus 배양(培養)한 결과(結果) 다음과 같은 결과(結果)를 얻을 수 있었다. 1. NAA와 BAP를 GD배지(培地)에 첨가하여 배양(培養)한 것이 callus 형성율(形成率)이 양호(良好)할 뿐만 아니라 callus 생장(生長)도 좋았으며, MS배지(培地)에서는 처리농도(處理濃度)에 따라 많은 차이(差異)가 나타났다. 뿌리는 NAA와 BAP의 농도 비(比)가 10~100배(倍)일 때 형성(形成)되었다. 2. NAA와 kinetin 조합(組合)에서도 GD배지(培地)에서 callus 형성율(形成率)이 100%로 좋았으며, callus 생장(生長)도 저농도(低濃度)의 NAA와 kinetin을 처리(處理)한 것을 제외(除外)하고는 대체적으로 양호(良好)하였다. 뿌리는 주(主)로 잎조직을 GD배지(培地)에 배양(培養)하였을 때 발생(發生)되었다. 3. 2,4-D와 BAP조합(組合)에서도 GD배지(培地)에서 callus가 100% 형성(形成)되었으며, callus의 생장(生長)은 MS 및 GD배지(培地)에서 모두 양호하였고, 특히 절간조직(節間組織)을 MS배지(培地)에 2,4-D $10{\mu}M$, BAP $1.0{\mu}M$과 2,4-D $10{\mu}M$, BAP $0.1{\mu}M$ 첨가하여 배양(培養)하였을 때 직경(直徑) 22mm이상(以上)으로 가장 왕성(旺盛)한 생장(生長)을 보여주었다. 4. 2,4-D와 kinetin에서도 MS배지(培地)에 비하여 GD배지(培地)에서 callus 형성율(形成率)이 높았으며 callus의 생장(生長)은 MS 및 GD배지(培地)에서 모두 양호(良好)하였다. 이상(以上)의 결과(結果)를 종합해 보면 callus 형성(形成)은 GD배지(培地)에서 생장조절물질(生長調節物質)의 종류(種類) 및 농도(濃度)에 관계없이 양호(良好)하였으며, callus의 생장(生長)은 2,4-D와 BAP 및 2,4-D와 kinetin 조합(組合)이 좋았으며, MS배지(培地)에 비(比)하여 GD배지(培地)에서 생장(生長)이 양호(良好)하였다. callus로부터 뿌리분화(分化)는 NAA와 BAP 및 NAA와 kinetin을 첨가한 배지(培地)에서만 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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