• 제목/요약/키워드: ion-exchange chromatography

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단백질 흡착성을 갖는 막 크로마토그래피용 재생 셀룰로오스 기반 음이온 교환 다공성 분리막의 제조 (Preparation of Protein Adsorptive Anion Exchange Membrane Based on Porous Regenerated Cellulose Support for Membrane Chromatography Application)

  • 서정현;이홍태;김태경;조영훈;오택근;박호식
    • 멤브레인
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    • 제32권5호
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    • pp.348-356
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    • 2022
  • 바이오산업의 발전으로 의약품, 식품 등의 생산 과정의 분리/정제 공정에 사용되어 왔던 기존의 컬럼 크로마토그래피를 대체하여 더 높은 처리효율을 갖는 막 크로마토그래피가 부상하고 있다. 본 연구에서는 서로 다른 기공 크기의 두 가지 상용 셀룰로오스 아세테이트(Cellulose acetate, CA) 분리막을 탈아세틸화 과정을 통해, 리간드의 개질이 용이한 다공성 재생 셀룰로오스 지지체를(Regenerated cellulose, RC) 제조하였다. 음이온 교환능을 부여하고자 grafting을 수행하였으며, 구체적으로는 UV 중합법을 통해 4차 암모늄을 포함하는 음이온 교환 리간드(MAPTAC)를 부착하여 음이온 교환용 흡착막을 제조하였다. 단백질 흡착 용량은 정적 흡착 용량(Static binding capacity, SBC)시험을 통해 총 단백질 흡착 용량을 측정했고, 동적 흡착 용량(Dynamic binding capacity, DBC)을 측정하여 상용막과 비교 평가하였다. 성능 평가 결과 단백질 흡착량은 넓은 표면적에 의해 리간드 밀도가 높은, 기공 크기가 작은 순서로 높게 측정되었고, 상용 CA분리막을 탈아세틸화하고 리간드를 부착시킨 분리막(RC 0.8 + MAPTAC 43.69 mg/ml, RC 3.0 + MAPTAC 36.33 mg/ml)이 상용 막 크로마토그래피 제품(28.38 mg/ml) 대비 높은 흡착 용량을 보였다.

이온교환수지에 의한 모나자이트중 우라늄의 분리, 회수에 관한 연구 (Separation and Recovery of Uranium from Korean Monazite Sand by Ion-Exchange resin)

  • 하영구
    • 대한화학회지
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    • 제27권5호
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    • pp.361-367
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    • 1983
  • 이온 교환수지에 의한 국산모나자이트 중에 함유된 우라늄을 분리, 회수하기 위하여 강염기성 이온교환수지(Amberlite IRA-900)에 S$O_4^{2-}$ 및 P$O_4^{3-}$ 이온을 흡착시켜 황산우라닐착이온, 인산우라닐착이온 형태로 우라늄을 흡착시켜 적당한 용리액(HN$O_3$ : N$NH_4NO_3$)으로 우라늄을 분리 회수하는 실험을 하였다. 표준우라늄을 사용하였을 때 황산형수지에서 99.3%, 인산형수지에서 99.2%까지 회수하였으며 모자나이트를 황산분해한 모나자이트 황산분해용액 중의 희토류원소들을 제거한 용액을 사용하였을 때는 약 92%까지 회수하였다. 모나자이트 중에 함유된 인산이온의 방해가 없는 것으로 나타났다. 인산형수지에서 우라늄의 회수율이 51% 정도인 것으로 보아 모나자이트를 황산으로 분해하였을 때는 대부분의 우라늄은 황산우라닐착이온으로 된다는 사실도 확인하였다.

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어류 알로부터 Protease Inhibitors의 크로마토그래피법에 의한 분획 (Chromatographic Fractionation of Protease Inhibitors from Fish Eggs)

  • 김진수;김기현;김현정;김민지;박성환;이현지;허민수
    • 한국수산과학회지
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    • 제46권4호
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    • pp.351-358
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    • 2013
  • A protease inhibitor from fish eggs was fractionated using chromatographic methods. The fractionation efficiency was evaluated in terms of specific inhibitory activity (SIA, U/mg), purity (fold), total inhibitory activity (TIA, U), and recovery (%). The protease inhibitor (PI) from egg extracts of skipjack tuna (ST Katsuwonus pelamis), yellowfin tuna (YT Thunnus albacares) and Alaska pollock (AP Theragra chalcogramma) was fractionated using Sephadex G-50 gel filtration and DEAE-Sepharose CL-6B anion exchange chromatography based on protein size exclusion and net charge, respectively. Fractions exhibiting strong inhibitory activity were contained in the 30-50 kDa fraction on gel filtration and in the range of 0.4-0.7 M NaCl gradient fraction on anion exchange chromatography. The respective TIA and percent recovery of the fraction obtained with gel filtration toward trypsin and $N{\alpha}$-benzoyl-L-arginine-p-nitroanilide (BAPNA) were 2,758.7 U and 29.6% for ST, 1,005.5 U and 25.6% for YT, and 1,267.5 U and 26.0% for AP. Gel filtration chromatography was more effective at fractionating PI than using ion exchange chromatography. These results suggest that fish eggs act as serine protease inhibitors and might be useful for protease inhibition in foodstuffs.

연료전지용 불소화 폴리벤즈이미다졸 양성자 교환 멤브레인 합성 및 특성평가 (Synthesis and Characterization of Fluorinated Polybenzimidazole Proton Exchange Membranes for Fuel Cell)

  • 김애란
    • 한국수소및신에너지학회논문집
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    • 제28권1호
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    • pp.24-29
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    • 2017
  • A fluorinated polybenzimidazole (FPBI) was synthesized from 3,3-diaminobenzidine (DAB) of tetraamine, 2,2-bis(4-carboxyphenyl)hexafluoropropane of aromatic biscarboxylic acid, and 4,4-sulfonyldibenzoic acid of aromatic biscarboxylic acid in polyphosphoric acid (PPA). A FPBI was easily cast and made into clear films. The structure of condensation polymers and corresponding membranes were analyzed using GPC (gel permeation chromatography), $^1H$-NMR ($^1H$ nuclear magnetic resonance) and FT-IR (fourier transform infrared). TGA (thermogravimetric analysis) analysis showed that the prepared membranes were thermally stable, so that elevated temperature fuel cell operation would be possible. The proton conductivity of the FPBI membranes increased with increasing temperatures in the polymer. A FPBI membrane has a maximum ion conductivity of 45 mS/cm at $90^{\circ}C$ and 100% relative humidity.

Protaetia brevitarsis가 생산하는 세균 유도성 항생황성물질, Protaecin (Bacteria-Induced Antibiotic Peptide, Protaecin from the White-Spotted Flower Chafer, Protaetia brevitarsis)

  • 박호용;박두상;박순식;오현우;신상운;이형규;주창경;홍순덕
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제22권1호
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    • pp.52-58
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    • 1994
  • The induced antibiotic peptides were isolatde from the white-spotted folwer chafer, Protaetia brevitarsis by injection of E. coli suspension to the larvae of the insect. The antibacterial activity of the peptides were assayed by the plate growth ingibition method, and were purified by ion-exchange chromatography, reversed-phase HPLC, ion-exchange HPLC and SDS-PAGE etc. The peptides were estimated as 9 kDa in molecular weight and named Protaecin I and Protaecin II, respectively. Protaecin I and II have strong antibacterial activities against Gram-positivie and/or Gram-negative bacteria, and they are stable in the heat treatment and in the range of pH 2-12.

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항산성균 항원분획의 혈청학적 활성 (Serological activity of fractions of mycobacterial antigens)

  • 배용수;김상재;배길한;이승호
    • 미생물학회지
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    • 제24권4호
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    • pp.377-384
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    • 1986
  • A study on the production of mycobacterial antogens has been made in order to improve immunological reactivity and specificity, which have long been explored for the better use of immunological diagnosis of mycobacterial infections. Instead of culture filtrate cell extract was used as a starting material for the production of antigens in this study. Cell extract was fractionated though several steps such as salting out, gel filtration and ion exchange column chromatography and reactivity and specificity of the fractions so produced were enaluated by the various serological methods. The result showed that the species-specific antigenic components distributed mostly in the fractions, Tc of M. tuberculosis, Kc of M. kansasii, Sa of M. scrofulaceum, Aa of M. avium and Fa, Fb, Fc (FF1) of M. fortuitum, which were fractionated by ion exchange column prior to concentrating by salting out and molecular sieving.

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Purification and Characterization of a Collagenolytic Protease from the Filefish, Novoden modestrus

  • Kim, Se-Kwon;Park, Pyo-Jam;Kim, Jong-Bae;Shahidi, Fereidoon
    • BMB Reports
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    • 제35권2호
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    • pp.165-171
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    • 2002
  • A serine collagenolytic protease was purified from the internal organs of filefish Novoden modestrus, by ammonium sulfate, ion-exchange chromatography on a DEAE-Sephadex A-50, ion-exchange rechromatography on a DEAE-Sephadex A-50, and gel filtration on a Sephadex G-150 column. The molecular mass of the filefish serine collagenase was estimated to be 27.0 kDa by gel filtration and SDS-PAGE. The purified collagenase was optimally active at pH 7.0-8.0 and $55^{\circ}C$. The purified enzyme was rich in Ala, Ser, Leu, and Ile, but poor in Trp, Pro, Tyr, and Met. In addition, the purified collagenolytic enzyme was strongly inhibited by N-P-toluenesulfonyl-L-lysine chloromethyl ketone (TLCK), diisopropylfluorophosphate (DFP), and soybean trypsin inhibitor.

Staphylococcal Enterotoxin A 의 분리 정제 (Purification of Staphylococcal Enterotoxin A)

  • 이정희;신현길;김종배;김태종;윤화중
    • 한국식품과학회지
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    • 제20권6호
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    • pp.780-786
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    • 1988
  • 본 실험은 Staphylococcus aureus로부터 생성되는 enterotoxin A의 분리를 위하여 각종 분리방법을 조사하였고 그 특성들을 상호 비교하였던 바 다음과 같은 결과를 얻었다. Amberlite 수지는 배지로부터 처음 toxin을 분리 하는 데에는 간편한 수지이나 정제도에 있어서는 약 70%수준으로 다른 방법들에 비해 낮은 편이었다. CM-cellu-lose수지는 0.2M phosphate buffer로 용출했을 때 75% 정도의 정제도를 가진 toxin을 분리할 수 있었으나 stepwise법으로 용출했을 때에는 80% 이상으로 정제도를 높일 수 있었고 Amberlite 수지와 함께 사용했을 때에는 90%정도의 toxin을 얻을 수 있었다. Amberlite나 CM-cellulose수지로 정제한 후 gel filtration을 실시하면 정제도를 더 높일 수 있었다. FPLC는 분리도와 정제도에서 가장 우수하였으며 FPLC의 결과에 따라 Amberlite 수지는 toxin 분획을 중심으로 앞의 분획을 그리고 CM-cellulose 수지는 뒤의 분획을 주로 제거 하는 특징을 가진다. 따라서 위의 column중 하나만 사용한 후 FPLC를 사용하면 95%이상의 toxin을 분리하는 것이 가능하였다.

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멸치액젓의 항산화효과 (Antioxidant Effects of Fermented Anchovy)

  • 박종옥;윤미선;조은정;김희숙;류병호
    • 한국식품과학회지
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    • 제31권5호
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    • pp.1378-1385
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    • 1999
  • 멸치액젓으로부터 항산화활성을 가지는 물질을 분리하기 위하여 용매추출 및 chromatography를 행하였다. 모든 용매분획들에 항산화활성이 있었으며 그 중 BuOH층과 수용액층이 소금을 함유하고 있었으나 항산화활성이 우수하였다. 수용액층을 투석막(MWCO 1000)으로 증류수에 대하여 투석하였을 때 투석막 내액의 항산화활성이 소실되었으므로 멸치액젓의 항산화성 물질은 분자량 1000이하의 분자량을 가진 것으로 추정하였다. Sephadex G-50 gel filtration chromatography에서 얻은 항산화물질 분획(tube No. 230-245)로 DE-52 anion exchange chromatography를 행한 결과 column에 결합하지 않고 흘러나온 분획(0 N NaCl용액) 및 0.05N NaCl용액으로 용출된 분획에서 항산화활성이 있었으나 $15\;{\mu}M$$Fe^{+++}\;ion$의 존재하에서 0 N NaCl 분획만 항산화활성이 유지되었다. Biogel P2 chromatography를 행한 결과 3번과 5번 분획의 항산화 활성이 특히 우수하였으며 TLC확인결과 아미노기가 풍부한 분자들임을 알 수 있었고 아미노산 조성을 분석하였을 때 다른 분획들보다 3번과 5번 분획에 소수성 아미노산이 많이 함유되어 있었다. TLC로 분리하여 항산화활성이 우수한 하나의 band를 HPLC의 C18 column으로 분석하였을 때 3개의 peak 중 항산화활성을 갖은 물질은 methionine 유도체이었으며 이는 멸치젓 수용액층의 많은 항산화물질 중 하나로 여러 아미노산 또는 oligopeptide의 유도체들의 상승효과가 멸치액젓의 항산화성을 유지하는 것으로 사료된다.

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해양방선균으로부터 Haloperoxidase의 검색과 특성 (Screening and Partial Purification of Haloperoxidase from Marine Actinomycetes)

  • 조기웅
    • 미생물학회지
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    • 제44권2호
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    • pp.116-121
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    • 2008
  • Haloperoxidase를 생산하는 미생물을 분리하기 위하여 국내 연근해와 남북극 등의 해양시료에서 분리된 방선균 균주를 대상으로 탐색을 수행하여 남해 백도 해조류 추출물로부터 분리된 한 종류의 방선균(#1460)에서 높은 haloperoxidase 활성이 확인되었다. 본 균주의 생리.생화학적 특성은 Streptomyces 속과 유사하며 생산되는 haloperoxidase는 세포 조 추출물로부터 ammonium sulfate precipitation, High-Q column chromatography, gel permeation chromatography, Hydroxyapetite chromatography 그리고 hydrophobic interaction chromatography를 통하여 42%의 수율과 purification fold 70으로 정제하였다. 본 효소의 최적 반응 pH는 7이고 pH 8에서 더 높은 안정성을 보여 $60^{\circ}C$에서 1시간 반응에 효소활성의 50%가 생존한다. 또 cyanide와 azide 이온에 의해 강한 저해현상을 보인다.