The ultrastructure of the pars distalis of the adenohypophysis was studied in the female Korean native goat ($10{\sim}16kg$, B.W.) by electron microscopy. Six granular cells and one agranular cell were recognized according to the characteristic patterns of secretory granules and cell organelles. Type I cells were. large, round or oval and contained the largest granules of 290 to 490 nm in diameter, Their endoplasmic reticula were well developed and packed with parallel lamellae close to nuclear membrane. Type II cells were elongate or polygonal. They contained granules of 220 to 390 nm in diameter and well developed Golgi complex. Type III cells were round, oval or angular and contained granules of 150 to 300 nm in diameter. Their endoplasmic reticula were coarsely scattered among the granules and provided an intracellular compartment for segregation in groups. Type IV cells were oval or round and contained granules of 120 to 280 nm in diameter. Their endoplasmic reticula were arranged at one pole of cytoplasm. Type V cells were round or polygonal and contained small granules of 110 to 140 nm in diameter Their endoplasmic reticula were packed with regularly parallel lamellae. Type VI cells were stellate and irregular in shape and had cytoplasmic processes projecting between the neighboring cells. Their granules were less than 130 nm in diameter, the smallest among the cells of the pars distalis. Agranular cells had no granules or a few, if any. They were stellate or irregular in shape.
Kim, Hee Ju;Kim, Joonki;Kang, Ki Sung;Lee, Keun Taik;Yang, Hyun Ok
Biomolecules & Therapeutics
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제22권4호
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pp.275-281
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2014
Autophagy is a series of catabolic process mediating the bulk degradation of intracellular proteins and organelles through formation of a double-membrane vesicle, known as an autophagosome, and fusing with lysosome. Autophagy plays an important role of death-survival decisions in neuronal cells, which may influence to several neurodegenerative disorders including Parkinson's disease. Chebulagic acid, the major constituent of Terminalia chebula and Phyllanthus emblica, is a benzopyran tannin compound with various kinds of beneficial effects. This study was performed to investigate the autophagy enhancing effect of chebulagic acid on human neuroblastoma SH-SY5Y cell lines. We determined the effect of chebulagic acid on expression levels of autophagosome marker proteins such as, DOR/TP53INP2, Golgi-associated ATPase Enhancer of 16 kDa (GATE 16) and Light chain 3 II (LC3 II), as well as those of its upstream pathway proteins, AMP-activated protein kinase (AMPK), mammalian target of rapamycin (mTOR) and Beclin-1. All of those proteins were modulated by chebulagic acid treatment in a way of enhancing the autophagy. Additionally in our study, chebulagic acid also showed a protective effect against 1-methyl-4-phenylpyridinium ($MPP^+$) - induced cytotoxicity which mimics the pathological symptom of Parkinson's disease. This effect seems partially mediated by enhanced autophagy which increased the degradation of aggregated or misfolded proteins from cells. This study suggests that chebulagic acid is an attractive candidate as an autophagy-enhancing agent and therefore, it may provide a promising strategy to prevent or cure the diseases caused by accumulation of abnormal proteins including Parkinson's disease.
The purpose of this study was to provide basic information on sexual maturity and reproductive biology for the management of biological resources in abalone Haliotis discus hannai. The nucleus of the oogonium occupied about 42% of the cytoplasm, and had a distinctive basophilic chromatin. The cytoplasm of previtellogenic oocytes was homogeneous and the size of nuclear pores increased. Fine granular and vacuolar yolk granules were observed in the cytoplasm of the initial vitellogenic oocyte. In this stage, the egg stalk and jelly membrane began to develop. The nucleus of the active vitellogenic oocyte was located near the animal pole. Yolk granules were strongly acidophilic. Lampbrush chromosomes were observed in the nucleus and rough endoplasmic reticulum. Annulate lamellae developed in the cytoplasm. The shape of the ripe oocyte was rounded polygonal. The size of ripe oocytes was 202.9±21.40×142.1±18.82 ㎛ and the thickness of the jelly membrane was 10.1±1.52 ㎛. These results show that yolk accumulation in H. discus hannai is based on two methods: exogenous accumulation, through the egg stalk, and endogenous accumulation, through intracellular organelles. Management of biological resources will be necessary when oocytes predominate after the active vitellogenic stage.
Hydrocephalus is induced experimentally in prenatal and suckling animals following an injection of 6-aminonicotinamide (6-AN). The most remarkable characteristic of these animals is aqueduct stenosis caused by swellings of the ependymal cells and subependymal cells in the periaqueductal gray matter and the central canal of the spinal cord. The present study was undertaken to investigate the morphological changes of the ependymal cells in the central canal of the spinal cord of 3.5 months old hamster after treatment with 6-AN. Intraperitoneal administrations of 6-AN (10 mg/kg body weight) every two days gave rise to partial central canal stenosis of the spinal cord after 27-29 days (13-l4th injection), but cilia and microvilli were located in the strictural area of the con#rat canal. The vacuolations in the ependymal cells were not observed and degenerating changes of intracellular organelles of the ependymal cells did not occur, so that the ependymal cells lining the central canal of the hamster spinal cord were not affected by 6-AN. But the present study demonstrate that 6-AN causes to create numerous vacuoles in the subependymal area of the central canal. Although the vacuoles were well developed in the neuroglial cells and the neuropils of the subependymal area, the neurons were not affected by 6-AN. These results strongly suggests that partial central canal stenosis occurred by 6-AN was due to vacuolations and swellings of the neuroglial cells and nueropils in the subependymal area.
Autophagy is a process of cytoplasmic degradation of endogenous proteins and organelles. Although its primary role is protective, it can also contribute to cell death. Recently, autophagy was found to play a role in the activation of host defense against intracellular pathogens. The aims of our study was to investigate whether host cell autophagy influences Toxoplasma gondii proliferation and whether autophagy inhibitors modulate cell survival. HeLa cells were infected with T. gondii with and without rapamycin treatment to induce autophagy. Lactate dehydrogenase assays showed that cell death was extensive at 36-48 hr after infection in cells treated with T. gondii with or without rapamycin. The autophagic markers, LC3 II and Beclin 1, were strongly expressed at 18-24 hr after exposure as shown by Western blotting and RT-PCR. However, the subsequent T. gondii proliferation suppressed autophagy at 36 hr post-infection. Pre-treatment with the autophagy inhibitor, 3-methyladenine (3-MA), down-regulated LC3 II and Beclin 1. The latter was also down-regulated by calpeptin, a calpain inhibitor. Monodansyl cadaverine (MDC) staining detected numerous autophagic vacuoles (AVs) at 18 hr post-infection. Ultrastructural observations showed T. gondii proliferation in parasitophorous vacuoles (PVs) coinciding with a decline in the numbers of AVs by 18 hr. FACS analysis failed to confirm the presence of cell apoptosis after exposure to T. gondii and rapamycin. We concluded that T. gondii proliferation may inhibit host cell autophagy and has an impact on cell survival.
농어의 피부는 크게 상피층과 진피층으로 구분된다. 상피층은 지지세포와 단세포선들로 구성된다. 지지세포는 표면세포, 중간세포 및 기저세포로 구분된다. 선세포는 점액분비세포와 곤봉상세포로 구분되는데, 이들의 분포밀도는 곤봉상세포가 더 높다. 표면세포는 편평형 또는 입방형이며 세포질에는 조면소포체가 잘 발달되어 있으며, microridge가 뚜렷하다. 표면세포들은 membrane interdigitation구조와 부착반에 의해서 다른 세포들과 연결되어 있다. 중간세포는 난형이며, 전자밀도는 다른 지지세포 보다 높다. 기저세포는 입방형이며, 세포소기관의 가운데 미토콘드리아의 발달이 현저하며, membrane interdigitation 구조들이 발달되어 있다. 점액분비세포는 막으로 싸인 다수의 분비과립들을 함유한다. 곤봉상세포의 세포질은 수질부와 피질부로 구분되는데, 수질부에서는 핵, 세포소기관, 중심공포가 관찰되며, 피질부에서는 발달된 장미세섬유들이 관찰된다. 곤봉상세포들은 잘 발달된 membrane interdigitation구조와 부착반에 의해서 다른 세포들과 연계되어 있다.
꼬막 소화맹낭의 해부학적 구조와 미세구조를 광학 및 전자현미경을 이용하여 기재하였다. 소화맹낭은 생식소 위쪽에 위치하며, 일차소관으로 위와 연결되어 있었다. 소화맹낭은 다수의 소화선세관들로 구성되며, 각각의 소화선세관은 단층 상피층으로 호염기성세포와 소화세포들로 이루어져 있었다. 호염기성세포는 원주형으로 소화세포에 비해 전자밀도가 높았다. 세포질에는 잘 발달된 조면소포체, 관상의 미토콘드리아, 골지체 및 전자밀도가 높고 막을 가진 분비과립들을 함유하고 있었다. 소화세포는 세 가지 종류 (A, B, C) 로 구분 할 수 있었는데 이들 소화세포들은 세포형태, 전자밀도, 세포소기관의 발달 차이를 보였으나 자유면에서 섬모와 미세융모의 발달 및 세포질의 용해소체는 세 가지 상피세포에서 동일하게 관찰되었다. 본 연구에서 이러한 결과는 소화선세관의 호염기성세포와 소화세포는 각각 세포외 소화와 세포내 소화에 적당하게 분화되었음을 의미한다.
Cilia are highly specialized antennae-like organelles that extend from the cell surface and act as cell signaling hubs. Intraflagellar transport (IFT) is a specialized form of intracellular protein trafficking that is required for the assembly and maintenance of cilia. Because cilia are so important, mutations in several IFT components lead to human disease. Thus, clarifying the molecular functions of the IFT proteins is a high priority in cilia biology. Live imaging in various species and cellular preparations has proven to be an important technique in both the discovery of IFT and the mechanisms by which it functions. Live imaging of Drosophila cilia, however, has not yet been reported. Here, we have visualized the movement of IFT in Drosophila cilia using time-lapse live imaging for the first time. We found that NOMPB-GFP (IFT88) moves according to distinct parameters depending on the ciliary segment. NOMPB-GFP moves at a similar speed in proximal and distal cilia toward the tip (${\sim}0.45{\mu}m/s$). As it returns to the ciliary base, however, NOMPB-GFP moves at ${\sim}0.12{\mu}m/s$ in distal cilia, accelerating to ${\sim}0.70{\mu}m/s$ in proximal cilia. Furthermore, while live imaging NOMPB-GFP, we observed one of the IFT proteins required for retrograde movement, Oseg4 (WDR35), is also required for anterograde movement in distal cilia. We anticipate our time-lapse live imaging analysis technique in Drosophila cilia will be a good starting point for a more sophisticated analysis of IFT and its molecular mechanisms.
Cathepsin B is abundantly expressed peptidase of the papain family in the lysosomes, and closely related to the cell degradation system such as apoptosis, necrosis and autophagy. Abnormal degradation of organelles often occurs due to release of cathepsin B into the cytoplasm. Many studies have been reported that relationship between cathepsin B and intracellular mechanisms in various cell types, but porcine embryos has not yet been reported. Therefore, this study evaluated the effect of cathepsin B inhibitor (E-64) on preimplantation developmental competence and quality of porcine embryos focusing on apoptosis and oxidative stress. The expression of cathepsin B mRNA in porcine embryos was gradually decreased in inverse proportion to E-64 concentration by using real-time RT-PCR. When putative zygotes were cultured with E-64 for 24 h, the rates of early cleavage and blastocyst development were decreased by increasing E-64 concentration. However, the rate of blastocyst development in $5{\mu}M$ treated group was similar to the control. On the other hand, both the index of apoptotic and reactive oxygen species (ROS) of blastocysts were significantly decreased in the $5{\mu}M$ E-64 treated group compared with control. We also examined the mRNA expression levels of apoptosis related genes in the blastocysts derived from $5{\mu}M$ E-64 treated and non-treated groups. Expression of the pro-apoptotic Bax gene was shown to be decreased in the E-64 treated blastocyst group, whereas expression of the anti-apoptotic Bcl-xL gene was increased. Taken together, these results suggest that proper inhibition of cathepsin B at early development stage embryos improves the quality of blastocysts, which may be related to not only the apoptosis reduction but also the oxidative stress reduction in porcine embryos.
세포 내 수송 및 축삭 수송은 kinesin 및 cytoplasmic dynein과 같은 미세소관 의존성 모터단백질에 의해 운반된다. Kinesin은 미세소관을 따라 미세소관의 플러스 쪽 끝으로 이동하고, dynein은 미세소관의 마이너스 쪽 끝으로 이동한다. Kinesin-1은 kinesin superfamily protein (KIF)중에서 처음으로 확인된 kinesin으로, 카복실(C)-말단 영역과 cargo간 결합을 통해 세포내 소기관, 신경전달물질 수용체 및 mRNA-단백질 복합체를 포함한 다양한 cargo의 세포내 수송 기능을 수행한다. Kinesin-1은 다양한 cargo들을 수송하지만, kinsin-1과 cargo 사이를 매개하는 어댑터/스캐폴더 단백질은 아직 완전히 확인되지 않았다. KIF5A의 C-말단 영역과 상호 작용하는 어댑터 단백질을 규명하기 위해 효모 2-하이브리드 스크리닝을 하여, cyclin-dependent kinase 2-associated protein 1 (CDK2AP1)를 확인하였다. CDK2AP1은 KIF5A의 C-말단 영역에 결합하고 KIF3A, KIF5B, KIF5C 및 kinesin light chain 1 (KLC1)과는 결합하지 않았다. CDK2AP1의 C-말단 영역은 KIF5A와의 결합에 필수적이었다. HEK-293T 세포에 CDK2AP1 및 kinesin-1은 동시 발현하여 면역침강하면 CDK2AP1 및 kinesin-1은 같이 면역침강하였다. 그리고 CDK2AP1 및 kinesin-1은 세포내에서도 같은 위치에 발현하였다. 이러한 결과들은 KIF5A-CDK2AP1결합은 kinesin-1이 cargo를 운반할 때 kinesin-1과 cargo 사이를 연결하는 어댑터 단백질 역할을 시사한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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