• 제목/요약/키워드: intracellular free amino acid

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INTRACELLULAR AMINO ACID PROFILE OF RUMEN BACTERIA AS INFLUENCED BY UREA FEEDING AND ITS DURATION

  • Kobayashi, Y.;Wakita, M.;Hoshino, S.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제6권4호
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    • pp.619-622
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    • 1993
  • Rumen bacterial amino acids in sheep on urea diet were monitored to assess a possible change in amino acid synthesis as a long term response to high rumen ammonia environment. A sheep was fed a semipurified diet with soybean meal, followed by a diet with urea as a main nitrogen source. Mixed rumen bacteria were harvested from ruminal fluid taken 3 h after feeding (twice in soybean meal feeding and 6 times in urea feeding) and fractionated as cell wall, proteins and protein-free cell supernatant of monitor amino acids in each fraction. Ruminal ammonia concentration at the sampling ranged from 5.7 to 39.5 mgN/dl. Cell wall and protein fractions of mixed rumen bacteria were stable in their amino acid composition regardless of nitrogen sources of diet and the feeding duration. However, protein-free cell supernatant fraction showed a higher alanine proportion with urea feeding (18.6 and 28.2 molar % of alanine for samples from sheep fed soybean meal and urea, respectively) and its duration (20.6 and 32.9 molar % for samples from sheep on urea diet for 1 and 65 days, respectively). Total free amino acid level of bacteria was depressed in the initial period of urea feeding but restored on 65th day of the feeding. These results suggest that an alanine synthesizing system may develop in rumen bacteria as urea feeding becomes longer.

이스라엘잉어의 연령별 근육단백질 조성의 비교 (Muscle Protein Compositions of Cultured Israeli Strain of Common Carp by Age)

  • 남택정
    • 한국수산과학회지
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    • 제16권3호
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    • pp.190-196
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    • 1983
  • 1년생과 3년생의 이스라엘잉어를 시료로 택하여 단백질의 조성과 육의 구성 및 유리아미노산조성의 차이를 비교 검토하였으며, 분획한 근형질단백질과 근원섬유단백질 및 세포내잔사단백질은 SDS-polya-crylamide gel 전기영동분석에 의하여 그 구성 subunit의 차이에 관하여도 검토하였다. 근육단백질의 조성을 분석한 결과, 1년생은 5년생에 비하여 근원섬유단백질의 양이 $6\%$정도 많았고, 근형질단백질과 세포내잔사단백질 및 기질단백질은 3년생이 1년생보다 조금 많았다. 그리고 전기영동상을 해석한 결과, 1년생과 3년생의 근형질단백질은 각각 11개와 10개의 subunit로 구성되어 있었고, 1년생의 분자량 210,000에 해당하는 subunit가 3년생에서는 검출되지 않는 점을 보였다. 근원섬유단백질에 있어서는 1년생과 3년생이 모두 $7.5\%$$10\%$ gel 전기영동가교를 사용했을 때의 분리된 subunit를 합하면 23개의 subunit로 구성되고 있었으며, 연령별에 따른 subunit 조성차이는 거의 없었다. 세포내잔사단백질에 있어서도 1년생과 3년생간에는 차이가 없음을 알았다. 한편, 육의 단백질구성아미노산을 분석한 결과, 두 연령별 시료간에 구성아미노산의 양적인 비율은 비슷하였다. 그리고 두 연령별의 시료가 모두 글루탐산, 아스팔트산 및 라이신을 어느 정도 많이 함유하고 있었다. 유리아미노산의 조성에 있어서도 3년생은 아스팔트산, 이소류신 및 페닐알라닌 등이 조금 많았고, 라이신, 히스티닌, 알기닌, 글루탐산등의 양은 조금 적었으며, 유리아미노산의 총양은 1년생이 3년생보다 많았다.

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2-(4-시아노페닐) 아미노 -1,4-나프탈렌디온-3-피리디니움 퍼클로레이트 (PQ5)의 항혈소판작용 (Antiplatelet Activity of 2-(4-Cyanophenyl) amino-1,4-naphthalenedione-3-pyridinium perchlorate (PQ5))

  • 김도희;이수환;최소연;문창현;문창현;김대경;유충규
    • 약학회지
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    • 제43권6호
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    • pp.809-817
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    • 1999
  • The effect of 2-(4-cyanophenyl)amino-1,4-naphthalenedione-3-pyridinium perchlorate (PQ5) on pla-telet aggregation and its action mechanisms were investigated with rat platelet. PQ5 inhibited the platelet aggregation induced by collagen ($6{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$), thrombin (0.4 U/ml) and A23187 ($3{\mu}M$) in concentration-dependent manner with $IC_{50}$ values of 5.50, 25.89 and $37.12{\;}{\mu}M$, respectively. PQ5 also significantly reduced the thromboxane $A_2$ (TXA2) formation in a concentration dependent manner. The collagen-induced arachidonic acid (AA) release in [-3H]-AA incorporated platelet, an indication of the phospholipase $A_2$ activity, was decreased by PQ5 pretreatment PQ5 significantly inhibited the activity of thormboxane synthase only at high concentration ($100{\mu}M$), but did not affect the cyclooxygenase activity at all. Collagen-induced ATP release was significantly reduced by PQ5. Calcium-induced platelet aggregation experiment suggests that the elevation of intracellular free $Ca^{2+}$ concentration ($[Ca^{2+}]_i$) by collagen stimulation is decreased by the pretreatment of PQ5, which is due to the inhibition of calcium release from intracellular store and influx from outside of the cell. PQ5 did not showed the effect of anticoagulation as prothrombin time (PT) or activated partial thromboplastin time (APTT). Form these results, it is suggested that PQ5 exerts its antiplatelet activity through the inhibition of the intracellular $Ca^{2+}$ mobilization and the decrease of the $TXA_2$ synthesis.

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세포주와 마우스 조직에서 타우린수송체의 발현분석 (Expression of Taurine Transporter in Cell Lines and Murine Organs)

  • 김하원;안희창;안혜숙;현진원;이은방
    • Biomolecules & Therapeutics
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    • 제10권2호
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    • pp.78-84
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    • 2002
  • Taurine (2-ethaneaminosulfonic acid, $^+{NH}_3{CH_2}{CH_2}{SO_3^{-}}$) is endogenous amino acid with functions as modulator of osmoregulation, antioxidation, detoxification, transmembrane calcium transport, and a free radical scavenger in mammalian tissues. Taurine transporter(TAUT) contains 12 transmembrane helices, which are typical of the $Na^+$- and $Cl^-$-dependent transporter gene family, and has been cloned recently from several species and tissues. To analyze the expression of TAUT mRNA, one step RT-PCR was performed from human and mouse cultured cell lines and from various mouse tissues. The primers were designed to encode highly conserved amino acid sequences at the second transmembrane domain and at the fourth and fifth intracellular domains. RT-PCR analysis showed both of the human intestine HT-29 and mouse macrophage RAW264.7 cell lines expressed mRNA of TAUT. To define the expression patterns of the TAUT mRNA in the murine organs, RT-PCR was performed to detect cDNA representing TAUT mRNA from seven different mouse tissues. The TAUT was detected in all of the mouse tissues analyzed such as heart, lung, thymus, kidney, liver, spleen and brain. A large amount of transcript was fecund from heart, liver, spleen, kidney, and brain, while lung contained a very small amount of transcript.

말쥐치육의 사후경과에 따른 단백질조성의 변화 (Change in Protein Composition of Filefish Muscle during Post-Mortem Lapse)

  • 변재흥;남택정
    • 한국수산과학회지
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    • 제14권1호
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    • pp.15-23
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    • 1981
  • 말쥐치 등육 골낙근을 $0^{\circ}C$로 유지하면서 사후경과중 선도의 변화에 따라 단백질의 조성과 단백질의 아미노산 조성 및 유리아미노산의 조성 등을 분석 검토하였다. 말쥐치의 육은 약 $20\%$의 단백질을 함유하고 있었으며, 이 단백질은 근원질단백질 $31\%$, 근원섬유단백질 $55\%$, 세포내잔사단백질 $10\%$, 그리고 기질단백질 $4\%$로 구성되어 있었다. 근원질단백질과 근원섬유단백질은 사후선도의 변화와 더불어 감소하여 갔고, 세포내잔사단백질은 상대적으로 증가하는 관계를 보였다. 근원섬유단백질과 세포내잔사단백질은 전기영동과 densitometry에 의하여 분석한 결과, 근원섬유단백질의 약 $70\%$가 액틴과 미요신, 약 $20\%$가 조절단백질, 그리고 $10\%$전후의 미지단백질로 구성되어 있었다. 세포내잔사단백질은 그 대부분이 근원섬유단백질을 구성하는 단백질로 이루어져 있었다. 한편, 사후경과와 더불어 근원섬유단백질을 구성하는 단백질중 트로포닌-T, 트로포닌-C 및 미요신의 light chain 2는 각각 감소하는 추세를 보였다. 죽인 직후의 말쥐치 육단백질의 아미노산 조성은 다른 어육의 그것과 비슷하였으나, 트?토판과 함황아미노산은 보다 부족하였다. 휘발성 염기질소양에비추어 부패초기에 해당하는 사후 18일이 경과했을 때는 프롤린과 시스테인이 두드러지게 줄었으며, 로이신과 이소로이신 및 페닐알라닌은 조금 증가하였다. 말쥐치육의 유리아미노산중에는 타우린이 특히 많이 함유되어 있었으며, 알라닌과 글리신 및 리신도 비교적 많았다. 사후 18일이 경과했을 때는 타우린, 히스티딘, 발린 및 메치오닌은 증가하였으나 리신, 아르기닌, 아스파르트산, 스레오닌, 세린, 로이신 및 이소로이신은 반대로 감소하였다.

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Rhizopus nigricans의 포자형성에 관한 생물학적 연구 (A physiological study on Sporulation of Rhizopus nigricans)

  • 윤경하;이영록
    • 미생물학회지
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    • 제17권2호
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    • pp.81-93
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    • 1979
  • The mycelium of Rhizopus nigricans was harvested at intervals during the sporulation periods, fractioned into various cell components and analyzed the con!eiits of various cell materials in order to clarify the optimum conditions of sporulation and some characteristics of the metabolism during tke sporulation periods. The changes in enzyme activities, such as amylase and protease, were also measured during the sporulation period,. 1. Mycelium in distilled water culture, as control, did not sporulate but mycelial mat cultured in Petridish without mutrient spourulated. Optimum temperature range for sporulation was $20{\sim}25^{\circ}C$. 2. During the sporulation and maturation periods, proteins, especially alkali-labile protein were decreased remarkably but free amino acid and ninhydrin reactive substances in acid soluble fraction were increased, compared with control. 3. Acid solable polyphosphate was decreased but acid insoluble polyphosphate was increased, during the sporulation. 4. Carbohydrate and hexosamine in acid soluble fraction were increased, while carbohydrate in alkali insoluble residual fraction was decreased during the sporulation periods. 5. Amounts of UV-absorbing material in deoxyribonucleic acid fraction was increased a little but those in ribonucleic acid fraction was decreased, compared with control. 6. Intracellular amylases and proteases activities insporulating mycelial mat were increased continuously during the sporulation and maturation periods.

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질소고정균의 성장과 질소고정력에 대한 osmoprotectant의 영향 (Effects of Osmoprotectants on the Growth and Nitrogenase Activity of Rhizobium and Azospirillum under Osmotic Stress)

  • 갈상완;최영주
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제41권1호
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    • pp.53-59
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    • 1998
  • 수종의 두과작물과 수도에서 분리한 Rhizobium 및 Azospirillum들의 내염성을 조사하고 salt stress에 의하여 유도되는 균주의 생리적 특성 및 식물이나 미생물에서 osmoprotectant 로 작용하는 proline, glycine betaine 및 glutamate가 질소고정균의 생육이나 질소고정력에 미치는 영향을 연구하였다. 분리된 대부분의 질소고정균들은 0.6 M NaCl 농도에서 생육이 현저히 감소되었지만 Acacia rhizobia sp86 은 1.4 M NaCl 농도에서도 생육이 가능하였다. Osmotic stress에 의하여 증가되는 intracellular 유리아미노산은 Rhizobium 및 Azospirillum에서 glutamate 였으며, 특히 Acacia rhizobia sp86은 salt stress에 의하여 5배정도 glutamate를 축적하였다. Osmoprotectant (proline, glycine betaine, glutamate)를 배지내에 1 mM 첨가함으로서 salt stress에 의하여 감소되는 질소고정균의 생육과 질소고정력을 방지하였으며, glycine betaine이 가장 효과적이었다.

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동면 전ㆍ후 짱뚱어의 육단백질 및 아미노산 조성의 변화에 관한 연구 (The Study in the Composition Changes of Muscle Proteins and Amino Acids in the Hibernant Fish-Mudskipper (Boleophthalmus pectinirostris) before and after Hibernation)

  • 박일웅
    • 한국식품영양학회지
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    • 제16권3호
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    • pp.209-217
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    • 2003
  • 동면어 짱뚱어에 대해 월동전ㆍ후(성숙기: 8월, 동면직전: 11월, 동면직후: 4월) 육단백질과 유리아미노산 조성 등을 각 시기별로 비교, 검토하였다. 조단백질 함량은8월 17.8%, 11월 17.5%, 4월 16.9%이었고 근원질 단백질은 육단백질 전체의 19.2~20.4%, 근원섬유 단백질은 58.8~61.3%, 세포내 잔사단백질과 기질단백질은 각각 11.2~13.2%와 7.5~8.3%를 차지하였다. 단백질 조성을 시기별로 비교한 결과 11월까지는 거의 차이가 없으나 4월은 기질단백질을 제외한 근원질과 근원섬유단백질 2종이 소량 줄었고 조성비로 근원질단백의 감소가 조금 더 큰 것으로 파악되었다. 근원질단백 구성 subunit는 총 14종이 검출되었고 구성 subunit 중 30kDa와 46kDa등의 조성이 11월보다 4월에 소폭 증가하였고 35kDa, 65kDa 등은 소폭 감소하였으나 기타 대부분은 거의 차이가 없었다. 근원섬유단백질은 총 13개의 subunit가 검출되었고 대부분의 subunit 조성이 11월까지는 거의 비슷하였으나 4월은 동면전보다 myosin heavy chain 조성이 3% 정도 늘어난 반면 actin은 3%정도 줄어들었다. 단백질 구성 아미노산 조성은 전기간에 걸쳐 일정하였고 주요 유리아미노산은 glycine과 alanine이었으며 두드러진 특징은 arginine함량이 8월보다 11월이 2배, 4월은 4배 이상 늘었고 glycine도 8월보다 4월이 2배 함량으로 모든 아미노산 중 양적 증가가 가장 현저하였다. 기타 alanine, glutamic acid, serine 및 aspartic acid와 valine 등도 동면기간 상당폭으로 증가하였고 lysine, histidine 등의 필수아미노산 함량도 유의적으로 증가하였다.

Effects of amino acids on ethanol metabolism and oxidative stress in the ethanol-perfused rat liver

  • Park, Yeong-Chul;Oh, Se-In;Lee, Mee-Sook;Park, Sang-Chul
    • 한국환경성돌연변이발암원학회지
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    • 제16권1호
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    • pp.13-18
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    • 1996
  • One mechanism of free-radical production by ethanol is suggested to be through the intracellular conversion of XDH to XO by increased ratio of NADH to NAD. The major mechanism for physiological compensation of cytosolic NADH/NAD balance is the malate/aspartate shutfie. Therefore, it is important to develop the method to improve the efficiency of malate/aspartate shuttle in ethanol metabolism. In the present study, various amino acids and organic acid involved in the shuttle were tested for their functional efficiency in modulating shuttle in the ethanol-perfused rat liver. The rate of ethanol oxidation in the liver perfused with aspartate alone or aspartate in combination with pyruvate, respectively, was increased by about 10% compared to control liver, but not in the tissues perfused with glummate, cysteine or pyruvate alone. Though glummate, cysteine and pyravate did not affect the ethanol oxidation significanfiy, they showed some suppresive effect on the ethanol-induced radical generation monitored by protein carbonylation analysis. Among the tested components, aspartate is confirmed to be the most efficient as a metabolic regulator for both ethanol oxidation and ethanol-induced oxidative stress in our perfusion system. These effects of aspartate would result from NAD recycling by its supplementation through the coupled aspartate aminotransferase/malate dehydrogenase reactions and the malate-aspartate shuttle.

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방어 보통육과 혈합육의 단백질 및 아미노산조성의 사후변화 (Changes Occurred in Protein and Amino Acid Compositions during Postmortem Aging of White and Dark Muscle of Yellowtail at $2^{\circ}C$)

  • 김장양;최영준;변재형
    • 한국수산과학회지
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    • 제15권2호
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    • pp.123-136
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    • 1982
  • 방어의 배육 보통육과 측육 혈합육을 $2^{\circ}C$에 보장하여 두고 선도변화 총계별로 단백질의 조성과 각축의 구성 및 유리아미노산의 조성을 분석하였으며, 건향질단백질과 근원섬유단백질에 대하여는 구성단백질의 분포변화를 확인하기 위하여 $NaDodSO_4$변한 다음, polyacrylamide겔 전기영동상을 비교 해석함으로써 적색육어류의 선도변화와 보통육 및 혈합육의 단백질조성 변화와의 관련성을 검토하였다. K-값과 휘발성염기질소 및 pH값으로 판정했을 때, 혈합육은 보통육에 비하여 선도변화가 빨랐다. 사후 선도변화와 더불어 근원질단백질과 노원섬유단백질은 감소하는 반면, 세포내잔사단백질은 상대적으로 증가하였으며, 이러한 변화는 보통육에 비하여 혈합육이 훨씬 심한 편이었다. Sodium dodecyl sulfate 화한 단백질을 polyacrylamide겔 전기영동함으로 분석한 결과, 보통육의 근원질단백질은 16개 성분, 그리고 혈합육의 근원질단백질은 12개 성분으로 구성되어 있었으며, 보장 10일째부터 보통육의 근원질단백질은에는 41,000dalton과 18,000dalton의 양분이 조금씩 증가하였고, 26,000 dalton과 23,500 dalton 및 23,000 dalton되 각 성분은 점차 감소하였다. 혈합육의 근원질단백질에 있어서는 49,000 dalton의 성분은 감소하였고 47.000 dalton의 성분은 새로이 형성되었으며, 26,000 dalton의 성분은 소감하였다. 근원섬유단백질의 전기영동분석결과에 의하면, 보통육의 근원섬유단백질은 17개 성분, 그리고 혈합육의 근원조직단백질은 16개의 성분으로 구성되어 있었다. 보장 10일에부터 보통육의 근원섬유단백질중에는 40,000 dalton의 성분이 증가하였고, 37,500 dalton의 성분은 점차 감소하였으며, 32,000 dalton의 성분은 새로히 출현하였다. 혈합육의 근원섬유단백질은 보장 9일째부터 58,000 dalton과 64,000 dalton의 성분은 그 농도가 단가하였으며, 17,500의 light chain-2 단백질은 소감하였고, 32,000 dalton의 성분은 새로이 출현하였다. 이 같은 전기영동상의 변화는 근원질단백질이 근원섬유단백질에 비하여 빨랐으며, 근원섬유단백질의 경화에 있어서는 혈합육쪽이 보통육에 비하여 빨랐다. 양 육의 단백질을 구성하는 아미노산을 분석한 결과, 즉살한 방어의 보통육 단백질은 글루탐산, 아스팔트산, 류신. 알기닌, 알라닌 등은 그 양이 어느 정도 많았고, 프롤린과 트?토판은 그 양이 적었으며, 혈합육에 있어서도 비슷한 경형이었다. 그리고 10일이 경과한 보통육에 있어서는 글루탐산과 아스팔트산이 현저히 감소하였으며, 9일이 경과한 혈합육에 있어서는 알라닌, 글리신, 그리고 알기닌이 현저히 감소하였다. 유리아미노산의 조성을 분석 결과, 즉살한 방어의 보통육중에는 히스티딘이 총유리아미노산의 약 $63\%$를, 그리고 혈합육중에는 타우린이 총유리아미노산의 약 $67\%$를 차지하는 양을 보였다. 그리고 $2^{\circ}C$에서 10일이 경과했을 때, 보통육에서는 히스티딘, 발린, 타우린이 증가하였으며, 알라닌, 류신 및 글리신 등은 조금 감소하였다. 같은 온도에서 9일이 경과한 혈합육에서는 타우린, 페닐알라닌, 글리신은 증하였으며, 히스티딘, 알라닌, 세린 등은 감소하였다.

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