온라인 고체상 추출을 이용한 LC/MS/MS를 사용하여 carbaryl과 유기인계 농약 7 종을 동시에 분석하는 방법을 확립하였다. 분석 대상농약은 carbaryl, diazinon, methyl-demeton, fenitrothion, malathion, parathion, phenthoate, EPN 등 8 종이다. 본 연구에서는 온라인 고체상 추출과 LC/MS/MS의 ESI positive mode로 전처리 없이 물 시료 $500{\mu}L$를 직접 주입하여 10분안에 분석하였다. 농약 8 종의 회수율은 86.8~100 % 였고, 정확도는 90.6~98.8 %로 90 %이상이었고, 정밀도는 1.3~5.2 %로 나타났으며 검출한계 및 정량한계는 각각 $0.05{\sim}0.28{\mu}g/L$, $0.16{\sim}0.89{\mu}g/L$ 였다. $0.5{\mu}g/L$에서 $8.0{\mu}g/L$까지 다섯 개의 농도로 검량선을 작성한 결과 모든 물질의 상관계수(r2)가 0.99이상을 나타냈다. 방법의 유효성 평가를 한 결과 모든 내용에서 적합하므로확립한 분석방법으로 수질 시료에서 농약을 조사한 결과 모두 검출되지 않았다.
신경흥분독성과 간질발작발현은 glutamate 수용체활성과 연관이 있다고 알려져 있다. a-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionate (AMPA), kainate 수용체에 대한 glutamate 활성을 포함하는 다양한 기전을 가진 항전간제인 Topiramate는 신경보호작용을 가진다는 증거가 제시되어 Topiramate가 간질발작 후 해마의 glutamate 수용체 발현에 미치는 효과를 관찰하였다. 흰쥐에 kainate를 복강 내 주사하여 간질중첩증을 유발시킨 후 Topiramate를 1주일 주사하였다 Apop tag in situ detection kit를 이용하여 세포손상을 관찰한 결과 kainate 유발 간질중첩증 1주일 후 해마의 CA1, CA3에서 심각한 세포사를 보였으나, Topiramte 처리 군에서는 세포사가 현저히 감소하였다. 간질중첩증 이후 NMDA 수용체 아형 1,2a, 2b 발현이 현저히 증가했으나 Topiramate 처치에 의해 NMDA수용체의 발현에는 뚜렷한 변화가 없었다. AMPA수용체에서는 GluR1이 간질중첩증 이후 현저히 상향 조정되었고 GluR2는 현저히 하향조정 되었다 Topiramate 1주일 처리 시 간질중첩증으로 인해 변화된 CluR1과 GluR2의 발현이 역전되었다. 결론적으로 Topiramate는 간질중침증에 의한 CluR1/CluR2 발현비의 증가로 유발되는 흥분성 신경세포사를 억제시킴으로써 신경보호작용이 있는 것으로 보인다.
연안지역의 해수침투대에서 투수성 파쇄대 및 고염분 지하수가 유입되는 구간의 탐지를 위하여 공내수 치환 전기전도도검층을 수행하였다. 공내수 치환 전기전도도검층은 시추공 내의 지하수를 전기적으로 다른 성질을 갖는 지하수로 치환하고 일정 양수 또는 자연 상태에서 시간에 따른 전기전도도의 변화를 측정하는 것으로 시추공과 교차하는 투수성 파쇄대 또는 다공성의 대수층에서 시추공 내로 유입되는 지층수 전기전도도의 변화 특성을 측정하면 지하수가 유입되는 구간의 확인이 가능하다. 현장 시험에 적용한 공내수 치환 시스템은 주입과 양수, 유량측정이 가능하며 내경이 작은 모니터링 PVC 케이싱이 설치된 시추공에도 적용이 가능하도록 제작하였다. 전남 영광의 연안지역에 위치하는 3개 시추공에서 공내수 치환기법을 적용하여 전기전도도의 변화 특성을 측정한 결과, 연구지역의 고염분 지하수는 균열암반을 통한 해수침투로 확인되었다. 공내수 치환 전기전도도검층법은 연안지역에서 수리상수 추정, 최적의 양수설계, 해수침투 특성 평가 등에 활용될 것으로 예상된다.
이 연구의 목적은 실험적으로 유발한 면역매개성 사구체 질환이 신증후군으로 진행하는 과정과 치유과정에서 단백뇨 배설에 근거한 조기진단 및 치유과정의 감시에 대한 평가를 하는 것이다. 두당 endotoxin 1 $\mu$g과 native bovine serum albumin 5mg 을 9두의 건강한 개에 정맥주사하여 감작시키고, 그 후 1주일부터 양이온화한 bovine serum albumin 120mg을 주 5회 반복 정맥주사한 결과 5두에서 면역매개성 사구체신염과 신증후군이 발생하였다. 사구체신염이 발생한 실험동물에서는 요단백질/ 크레아티닌 비의 증가 (>1.0), 저알부민혈증 (< g/이), BUN 증가 (>40 mg/dl), 부종 등이 나타났다. 이것은 임상병리학적으로 평가 가능한 면역매개성 사구체시염 및 신증후군 모델견이 제작되었음을 제시하는 것이었다. 사구체신염의 유발과 신증후군의 진행과정에 요단백질/크레아티닌 비의 증가가 저알부민혈증, BUN 증가, 고콜레스테롤혈증보다 1-4주 먼저 출현하였다. 사구체신염에 의해 신증후군이 유발된 실험동물 모두에서 prednisolone 을 2.2 mg/kg씩 1일 2회 경구투여한 결과 혈중 알부민 농도의 증가와 콜레스테롤 농도의 감소가 먼저 일어나고, 그 후 1-4 주에 요단백질/크레아티닌 비가 감소하기 시작하였다. 종합적으로 볼때, 면역매개성 사구체신염성 신증후군의 조기진단에는 요 단백질/크레아티닌 비가 유리한 지표로, 그리고 초기 치유과정의 감시에는 혈청 알부민, 콜레스테롤이 더 유리한 임상 지표로 이용될 수 있음을 확인하였다.
Most of the diagnostic methods currently used for the detection of neoplastic masses provide indirect evidence. To obtain greater specificity in the interpretation of neoplasias by in vivo methods, the immunological approach appears to be most promising. Two problems that interfered with progress in this field were the lack of tumor specific antigen and the lack of well-defined and reproducible antibodies. To improve the sensitivity and specificity of radioimmunoscintigraphy as a technique for tumor localization, the use of monoclonal antibodies, fragments of antibodies and single photon emission computerized tomography (SPECT) are reasonable. The obvious advantages of monoclonal antibodies are their homogeneity, their specificity for the immunizing antigen and the reaction with a single determinant-thus no large immunecomplexes with antigen are formed. Monoclonal antibody technique has recently provided an opportunity to reevaluate the role of nuclear medicine for the diagnosis of malignant diseases by using the immunological approach. Out first results by means of radioimmunoscintigraphy of CEA and CA 19-9 producing tumors using a cocktail of fragments F $(ab')_2$, of mocolonal antibodies to CA 19-9 and CEA labeled with $^{131}I$ (IMACIS-1) are reported. The aims of this investigation was to evaluate the role of immunoscintigraphy in patients with colorectal and other cancers for diagnosis of local recurrences and metastasis. This report contains results of the first 8 colorectal and pancreas cancer patients with the elevation of the level of serum CEA and/or CA 19-9. IMACIS-1 was injected intravenously during 30 minutes in 100 ml saline solution after skin test. Planar scintigrams were recorded 3, 5 and 7 days after the injection of the IMACIS-1. Anterior, lateral and posterior views of the liver as well as anterior and posterior views of the pelvis were obtained in each patients as an $^{131}I-antibody$ image. We were able to localize exactly the malignant process with the double-nuclide double-compound $^{99m}Tc\;^{131}I$ (Tc+l) scintigrams. In Tc & I double-nuclide scintigraphy, computer subtraction display provided more clear localization of the tumor. We compared the results of radioimmunoscintigraphy with CT, ultrasonograms, conventional scintigrams. The results were as follows: 1) The sensitivity and specificity of radioimmunoscintigraphy using the fragments $F(ab')_2$ of the cocktails of CEA and CA 19-9 monoclonal antibodies were 80% and 100% respectively. 2) Tumor detection rate was not proportionated to the level of serum tumor markets. 3) Second tracer technique was essential for tumor localization as an anatomic landmark using double-nuclide scintigraphy. 4) A slow infusion of the antibodies was necessary to prevent the formation of large immune complexes. 5) Tumor/non-tumor radioactivity was most elevated at 7 days delayed imaging. 6) Using planar scintigraphic technique of $^{131}I$ labeled monoclonal antibodies are possible for imaging most of the tumors.
Miguel-Cruz, Erika Elizabeth;Mejia-Villanueva, Octavio;Zarco, Luis
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제32권11호
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pp.1673-1685
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2019
Objective: To evaluate the efficacy of treatments based on gonadotrophin-releasing hormone (GnRH), GnRH-prostaglandin $F2{\alpha}$ ($PGF2{\alpha}$), and/or intense exposure to novel rams to induce fertile estrus without the use of steroid hormones in seasonally anestrous Suffolk ewes. Methods: In the first experiment, ewes were treated with one injection of GnRH, two injections of GnRH administered 7 days apart, or a sequence of GnRH-$PGF2{\alpha}$-GnRH (GPG). In the second experiment anestrous ewes were exposed, for 36 days starting on the day of weaning, to groups of four rams of three different breeds that were alternated every day. Besides exposure to the male effect (ME), the ewes were injected with saline solution (ME group, n = 20), with GnRH (ME-GnRH group, n = 20) or with a sequence of GnRH-$PGF2{\alpha}$-GnRH (ME-GPG group, n = 20). The rams used for male-effect were fitted with aprons to prevent mating, and ewes detected in estrus were bred to selected fertile rams. Ovarian activity was monitored by progesterone determinations in both experiments. Results: In the first experiment sustained induction of ovarian activity was not achieved and no ewe was detected in estrus. In the second experiment induction of sustained ovarian activity was achieved in all groups. Most of the ewes were detected in estrus, 76.7% of the ewes were mated during a 36-d breeding period and 71.7% of all the ewes became pregnant during that period. No significant differences between groups were found for any of these variables. However, estrus detection efficiency was higher in the ME-GnRH group than in the ME group (p<0.05). Conclusion: An intense male-effect, that included the continuous presence and frequent alternation of several rams of different breeds, was sufficient to induce ovarian activity and fertile estrus in Suffolk ewes during the period of deep anestrus without the use of hormones, although addition of GnRH improved the efficiency of estrus detection.
After single fraction of 2, 5, 10 Gy irradiation on submandibular gland of 40 male rats, weighing 150gm, respectively, these animal were sacrificed two hours after 0.1㎎/g bromodeoxyuridine (Sigma) peritoneal injection in 1, 3, 7, 15 hours, 1, 3, 7 days after irradiation. And excised submandibular gland were fixed in Carnoy's and Bouin's solution for 2 hours. Paraffin sections were stained with H&E, and PAS for the observation of the change of salivary gland tissue, and with Feulgen for the study of the DNA distribution, and immunohistochemically stained with anti-bromodeoxyuridine (Sanbyo Co.) for detection of DNA synthetic cells in order to study the distribution of DNA synthetic cells of salivary gland tissue and endothelium after irradiation in 5 different sites of 6 slides on X 200 high power field. The results were as followings. 1. In PAS staining 3 days after 5Gy irradiation, decreased mucine secretion of serous cells were found, and 7 days after l0Gy irradiation, decreased mucine secretion of mucous cells were found. 2. In histopathologic features, degeneration of serous cells were found in 3 days after 2 Gy irradiation and there was little change in mucous cells and excretory duct cells. 3. In Feugen staining, 3 days after 2 Gy, 5 Gy irradiation, more high percentage of DNA synthetic cells were found in intercalated duct cells, striated duct cells and excretory duct cells than in BrdU staining. 4. In immunohistochemical features, DNA synethsis of serous cells and granular convoluted tubular cells abruptly decreased in early period after irradiation and showed no recovery in 7 days after irradiation but there was an increase in DNA synthesis of intercalated duct cells, striated duct cells and excretory duct cells, which have less S-phase cells comparatively, in 7 days after 2 Gy, 5 Gy irradiation. 5. In immunohistochemical features, the DNA synthesis of endothelial cells was continuously decreased after irradiation but showed slight increase in 7 days after 2 Gy and S Gy irradiation.
"The Act on Medication Treatment of Sexual Impulse of Sex Offenders" known as chemical castration has been effective since July 2011 in Korea. According to the law, monitoring of male sex hormone in urine is enforced to request National Forensic Service more than once a month after injection of medicine designed to reduce sex impulse. We established a rapid and sensitive method for the monitoring of testosterone (T) and epitestosterone (E) in human urine by liquid chromatography with tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). Three mL of urine was pretreated by solid-phase extraction for purification and performed enzymatic hydrolysis. The pretreated samples were extracted twice with 2 ml of ethyl acetate and n-hexane (2 : 3). The separation was applied on Thermo Hypersil GOLD C18 column ($1.9{\mu}m$, $100{\times}2.1mm$). A gradient elution of methanol and water of 0.1% formic acid were used as mobile phase and the retention time was less than 10 min. LC-MS/MS system coupled with an electrospray ionization source was performed in multiple reaction monitoring mode. The transitions of the analytes executed as following: m/z $289{\rightarrow}97$, 109 for T and E, m/z $292{\rightarrow}109$ for $T-d_3$ and $E-d_3$ as internal standards. The validation results of the method were satisfactory. The limits of detection were 0.05 ng/ml and the limits of quantification were 0.1 ng/ml. This method was successfully applied to real human urine sample. The developed method will be useful for monitoring T/E ratio in urine of sex offenders.
Objective : The purpose of this study was to establish the simultaneous analysis for six compounds in Gumiganghwal-tang (GMGHT, Jiuweiqianghuo-tang) and to investigate the anti-atherosclerotic effects of GMGHT in vitro. Methods : The column for separation of six compounds was used Luna $C_{18}$ column and maintained at $40^{\circ}C$. The mobile phase for gradient elution consisted of two solvent systems, 1.0% acetic acid in water and 1.0% acetic acid in acetonitrile. The analysis was carried out at a flow rate of 1.0 mL/min with pothodiode array (PDA) detection at 254, 280, and 320 nm. The injection volume was 10 ${\mu}L$. The antioxidant activities of GMGHT were evaluated by measuring free radical scavenging activities on 2,2'-Azinobis-3-ethyl-benzothiazoline-6-sulfonic acid (ABTS) and 1-1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH). The inhibitory effects on low-density lipoprotein (LDL) oxidation were evaluated by the formation of thiobarbituric acid relative substances (TBARS), relative electrophoretic mobility (REM), and fragmentation of apolipoprotein B (ApoB)-100. Results : Calibration curves were acquired with $r^2{\geq}0.9998$. The contents of liquiritin, ferulic acid, baicalin, baicalein, glycyrrhizin, and wogonin in GMGHT were 1.784, 1.693, 37.899, 0.258, 1.869, and 0.034 mg/g, respectively. The GMGHT showed the radical scavenging activity in a dose-dependent manner. The concentration required for 50% reduction ($RC_{50}$) against ABTS and DPPH radicals were 72.51 ${\mu}g/mL$ and 128.49 ${\mu}g/mL$. Furthermore, GMGHT reduced the oxidation properties of LDL induced by $CuSO_4$. Conclusion : HPLC-PDA is considered as an available and convenient method for quality control and standardization of GMGH and GMGHT has potentials on anti-atherosclerosis by anti-oxidative effect and suppressive effect on LDL oxidation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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