• 제목/요약/키워드: inactivation of E. coli

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Methanol 자화 방선균으로부터 Aminoglycoside 내성 저해물질의 정제 및 특성 (Purification and Characterization of Aminoglycoside-Resistant inhibitior from methylotrophic Actinomycetes)

  • 김현수;신재욱
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제27권3호
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    • pp.215-222
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    • 1999
  • Methylotrophic actinomycetes No. 155 produced an aminoglycoside antibiotics(AG)-resistant inhibitor. We have previously reported that the inhibitor shows strong inhibition to sisomicin-resistant strain. In order to understand the functions of inhibitor and sisomicin-resistance, characterizations and purification of inhibitor were investigated. Strain No. 155 was tentatively identified as Nocardiopsis sp. based on morphological and some physiological characteristics. In the antimicrobial activity test, the addition of inhibitor to sisomicin showed a reduction effect of MIC on the test strains such as Gram(+), Gram(-) bacteria and yeasts. The combination of the inhibitor and various antibiotics revealed synergistic against E. coli K-12 and B. subtilis PCI 219. The induced intracellular proteins from sisomicin-resistant strain exhibited the sisomicin inactivation by invitro test. And the induced intracellular proteins were inactivated by addition of the inhibitor. The inhibitor compound was purified by anion exchange chromatography(Dowex-1) and HPLC using Asahipak ES-502C column. The purified inhibitor compound was detected in a single peak(above 98.5% purity) through the HPLC analysis.

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유전체 방벽 방전 콜드 플라즈마 기술을 이용한 양파 분말 미생물 안전성 향상 및 품질 보존 (Helium dielectric barrier discharge-cold plasma treatment for microbiological safety and preservation of onion powder)

  • 원미연;최하영;이광식;민세철
    • 한국식품과학회지
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    • 제48권5호
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    • pp.486-491
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    • 2016
  • DBD 방식의 콜드 플라즈마 처리는 양파 분말에 접종된 E. coli O157:H7, S. Enteritidis, L. monocytogenes를 효과적으로 저해시켰다. 콜드 플라즈마 처리에 의한 식중독균 억제 효과는 콜드 플라즈마 전압 증가에 따른 유의적인 차이를 보이지 않았지만, 콜드플라즈마 처리 시간에 따라 억제 효과가 유의적으로 증가함을 알 수 있었다. 또한, 양파 분말의 수분활성도가 높은 것과 입자 크기가 큰 것이 콜드 플라즈마를 이용하여 미생물을 억제 시키는데 유리하다는 것을 규명하였다. 본 연구에서 사용된 처리 조건에서의 DBD-CPT는 처리 시간과 관계없이 양파 분말의 비타민C 함량, 쿼세틴 함량, 그리고 색도에 영향을 주지 않았다. 따라서 DBD-CPT는 양파 분말의 이화학적 특성에 영향을 미치지 않으면서 CP 처리 시간, 양파 분말의 수분활성도와 크기 조절을 통해 식중독균을 효과적으로 억제 시킬 수 있음을 알 수 있었고 이로써 DBD-CPT가 양파 분말 식중독균 저감화에 사용 될 수 있는 비가열 살균 기술임을 확인 할 수 있었다.

코리네박테리움 디프테리아 티올 특이성 항산화단백 DirA의 발현 및 특성 (Expression and Characterization of Thiol-Specific Antioxidant Protein, DirA of Corynebacterium diphtheriae)

  • Myung-Jai Choi;Kanghwa Kim;Won-Ki Choi
    • 대한의생명과학회지
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    • 제4권1호
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    • pp.1-9
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    • 1998
  • 효모의 티올특이성 항산화단백과 아미노산 서열상 상동성을 보이는 50종류의 단백은 새로운 항산화 단백군을 형성하며 또한 병원성 미생물에도 널리 분포하고 있으나 이들 단백의 생화학적 및 생리적인 기능은 거의 알려져 있지 않은 실정이다. 본 연구는 병원성 미생물의 티올특이성 항산화단백의 기능에 관한 연구로서 Saccharomyces cerevisiae의 TSA 및 Salmonella typhimurium alkcyl hydroperoxide reductase의 AhpC subunit와 상동성을 나타내는 Corynebacterium diphtheriae의 DirA 유전자를 PCR 방법으로 클로닝하고 대장균에 발현시킨 후 정제하여 항산화 특성을 조사하였다. 정제된 DirA는 티올을 함유하는 금속촉매 산화계인 DTT/Fe$^{3+}$를 선택적으로 억제하였으며 티오레독신 의존성 과산화물 분해활성을 나타내었다. DTT/Fe$^{3+}$ 금속촉매 산화계에 의한 효소의 불활성화를 50% 억제 하는 DirA의 농도는 0.12 mg/ml로 효모 TSA 항산화활성의 약1/4 수준이었으며, 효모의 티 오레 독신계와 반응시켰을때 과산화물 분해활성은 0.02 unit/mg로서 효모 TSA의 티오레독신 의존성 과산화물 분해활성의 1/20수준이었다. 정제된 단백질을 이용하여 항체를 제조하였으며 이항체를 이용하여 Corynebacterium diphtheriae에서 발현됨을 확인하였다. 이러한 결과를 통하여 Corynebacterium diphtheriae의 병원성은 숙주세포의 방어기전인 백혈구에 의하여 생성되는 과산화수소 또는 다른 활성산소종을 제거하는 DirA작용과 연관이 있는 것으로 사료된다.

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고강도 광원을 이용한 새싹 채소의 살균 (Sterilization of Rapeseed Sprouts by Intense Pulsed Light Treatment)

  • 박희란;차경희;신정규
    • 한국식품과학회지
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    • 제48권1호
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    • pp.36-41
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    • 2016
  • 비가열 살균 기술 중 하나인 광펄스 기술을 이용하여 신선편이 식품 중 하나인 새싹채소에 존재하는 미생물의 저감 효과를 검토하였다. 새싹 채소에 존재하는 미생물의 오염도는 총균수 $1.2{\times}10^7CFU/g$, 대장균군 $3.3{\times}10^6CFU/g$, E. coli O157:H7, Staphylococcus aureus, Salmonella 및 Listeria는 각각 $2.1{\times}10^5CFU/g$, $4.9{\times}10^5CFU/g$, $1.7{\times}10^5CFU/g$, $4.3{\times}10^4CFU/g$이었다. 펄스 수 5 pps, 광원과 시료 사이의 거리 6.7 cm의 동일한 조건에서 빛의 세기를 달리하여 처리하였을 경우 빛의 세기가 강할수록 사멸율은 증가하였으며, 빛의 세기 1000 V에서 일반세균은 1.0 log CFU/g, 대장균군은 1.6 log CFU/g, 병원성 대장균은 1.8 log CFU/g의 사멸율을 보였다. 광원과 시료 사이의 거리에 따른 사멸효과는 거리가 짧을수록 사멸율은 증가하여, 광원과 시료 사이의 거리 6.7 cm, 빛의 세기 1000 V, 펄스 수 5 pps에서 일반세균 0.9 log CFU/g, 대장균군 0.8 log CFU/g, 병원성대장균 1.9 log CFU/g의 사멸율을 나타내었다. 광펄스 처리 전후 새싹채소의 수분함량과 비타민 C의 함량변화는 처리 후의 시료가 감소하는 경향을 보였으나 유의적인 차이를 나타내지는 않았다. 새싹채소의 살균에 있어 광펄스 기술은 처리 조건에 따라 90-99%의 사멸율을 나타내어 신선편이 식품의 비가열 살균 기술로서의 적용 가능성을 보였다.

회전식 부착 바실러스를 이용한 하수고도처리 공정에서의 총대장균군 제거 특성 (Removal Characteristics of Total Coliforms in a Rotating Activated Bacillus Contactor Process)

  • 김응호;조연제;박성주;신광수;임수빈;박현주
    • 한국물환경학회지
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    • 제21권1호
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    • pp.73-78
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    • 2005
  • This study was performed to examine the disinfection capability of a Rotating Activated Bacillus Contactor (RABC) system, in which the predominant species, Bacillus sp. was expected to have a removal or inactivation effect of total coliforms. In a settling test with mixtures of E. coli and Bacillus sp., a high removal of E. coli was observed at $20{\sim}40^{\circ}C$, while insignificant removal at $10^{\circ}C$. In a batch test, a 4.5% addition of Bacillus sp. to activated sludge considerably enhanced the removal effect of total coliforms, indicating Bacillus sp. played an important role in improving the settlability of the sludge and coliforms. In a pilot scale RABC system, the concentration of total colifroms reduced remarkably in the settling tank, suggesting that total coliforms in the RABC process were eliminated through coagulation and precipitation, probably due to extracellular polymeric substance (EPS) of Bacillus sp. The fraction of Bacillus sp. in the total cell count in the RABC process was in the range of 4.5%~6.3%. The majority (75%) of the Bacillus sp. in the RABC process was Bacillus subtilis which is known to enhance coagulation and precipitation by producing EPS. Hence, an adoption of a RABC process might be able to eliminate the disinfection unit process from a wastewater treatment system.

Vibrio parahaemolyticus collagenase 불활성화 돌연변이체의 제조 및 특성 (Construction and Characterization of the Vibrio parahaemolyticus Collagenase Inactivated Mutant)

  • 이재원;전인준;강호영;차재호
    • 생명과학회지
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    • 제14권2호
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    • pp.362-367
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    • 2004
  • 장염비브리오균의 숙주 내 감염을 일으키는 기작을 이해하기 위하여 세포외 효소 중의 하나인 콜라겐분해효소의 유전자가 불활성화된 돌연변이체를 제작하였다. 콜라겐분해효소의 유전자인 vppC 유전자에 항생제 내성 유전자인 nptII를 삽입하여 제작된 재조합 DNA를 suicide vector인 pDMS197에 클로닝하여 pVCM03이라 명명하였다. 재조합 suicide 플라스미드 pVCM03을 E. coli 7213에 형질전환하여 접합을 통하여 원 균주인 V. varahaemolyticus 04에 전달하였다. 전달된 pVCM03 유래의 재조합 vvpC::npfII DNA는 homologous recombination에 의해 wild-type allele와 교환되어 돌연변이체를 형성하게 되고, 돌연변이체는 10% sucrose가 함유된 TCBS 배지에서 선별되었다. Allele exchange는 PCR에 의한 증폭된 DNA의 크기 비교로 확인하였다. 돌연변이체인 V. parahaemolyticus CM은 원 균주와 비교하였을 때 약 4배정도 낮은 콜라겐 분해 활성을 나타내었고, vero cell을 이용한 MTT assay에서도 원 균주에 비하여 낮은 세포독성을 보였다.

An aluminum-based reflective nanolens array that enhances the effectiveness of a continuous-flow ultraviolet disinfection system for livestock water

  • Changhoon Chai;Jinhyung Park
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제65권1호
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    • pp.258-270
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    • 2023
  • Climate change has worsened droughts and floods, and created conditions more likely to lead to pathogen contamination of surface water and groundwater. Thus, there is a growing need to disinfect livestock water. Ultraviolet (UV) irradiation is widely accepted as an appropriate method for disinfecting livestock water, as it does not produce hazardous chemical compounds and kills pathogens. However, UV-based disinfection inevitably consumes electricity, so it is necessary to improve UV disinfection effectiveness. Aluminum-based reflective nanolens arrays that enhanced the effectiveness of a continuous-flow UV water disinfection system were developed using electrochemical and chemical processes, including electropolishing and two-step anodization. A continuous UV disinfection system was custom designed and the parts were produced using a three-dimensional printer. Electropolished aluminum was anodized at 40 and 80 V in 0.3 M oxalic acid, at 120 and 160 V in 1.0 M phosphoric acid, and at 200 and 240 V in 1.5 M citric acid. The average nanolens diameters (D) of the aluminum-based reflective nanolens arrays prepared using 40, 80, 120, 160, 200, and 240 V anodization were 95.44, 160.98, 226.64, 309.90, 296.32, and 339.68 nm, respectively. Simple UV reflection behind irradiated water disinfected Escherichia coli O157:H7 in water more than did the non-reflective control. UV reflection and focusing behind irradiated water using an aluminum-based reflective nanolens array disinfected E. coli O157:H7 more than did simple UV reflection. Such enhancement of the UV disinfection effectiveness was significantly effective when a nanolens array with D 226.64 nm, close to the wavelength of the irradiated UV (254 nm), was used.

Effect of Scutellariae Radix as a Novel Antibacterial Herb on the ppk(Polyphosphate Kinase) Mutant of Salmonella typhimurium

  • Hahm, Dae-Hyun;Yeom, Mi-Jung;H.Lee, Eun-Joo;Shim, In-Sop;Lee, Hye-Jung;Kim, Hong-Yeoul
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제11권6호
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    • pp.1061-1065
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    • 2001
  • The antibacterial effects of water extracts of Scutellariate Radix (a dried root of Scutellaria baicalensis GEORGI) and its major flavonoid components, Baicalin and Baicalein, on Salmonella typhimurium, a representative enteric pathogen, were studied. Through a Kriby-Bauer disc analysis, the growth-inhibition activity of Scutellariae Radix against. S. typhimurium was found to be compatible with commercial antibiotics, such as ampicillin, chloramphenicol, and streptomycin. In contrast, the growth of a nonpathogenic E. coli strain was unaffercted by Scutellariae Radix. To examine the effect of polyphosphate kinase (ppk), a putative virulence factor, on the antibacterial activity of Scutellariae Radix, the growth profile of a ppk mutant of S. typhimurium was investigated in a tryptic soy broth containing different concentrations of water extracts of Scutellariae Radix. The ppk mutant was able to grow in 6 mg/ml of water extracts of Scutellariae Radix, whereas in 6 mg/ml of water extracts of Scutellariae Radix, whereas the wild-type could not, implying that the inactivation of ppk made S. typhimurium more resistant to the antibacterial activity of Scutellariae Radix. No enhanced resistance was observed in a ppk mutant of S. typhimurium complemented with a ppk expression vector. The attenuation of the virulence by ppk inactivation was also observed in a virulence assay using BLAB/c mice. Neither Baicalin nor Baicalein exhibited any growth-inhibition activity against S. typhimurium. The water extracts of Scutellariae Radix stimulated the transcription of ppk, especially in the early growth-stage of S. typhimurium.

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초고압을 이용한 신선초 녹즙의 살균 및 갈색화 효소의 불활성화 (Inactivation of Microorganisms and Browning Enzymes in Angelica keiskei Juice Using High Hydrostatic Pressure)

  • 이동언;박지용;이윤범;여익현
    • 한국식품과학회지
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    • 제27권6호
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    • pp.991-996
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    • 1995
  • 비열처리공법 중 하나로 새롭게 주목받고 있는 초고압처리를 신선초 녹즙에 적용하여 미생물의 살균정도 및 갈변효소의 불활성화정도를 살펴보았다. 실험에는 $3800\;kg_f/cm^2{\sim}6700\;kg_f/cm^2$ 범위의 압력에서 $3{\sim}17\;min$동안 처리하였으며 반응표면분석법(RSM)을 이용하여 미생물 및 효소 불활성화의 최적조건을 구하고자 하였다. 반응표면분석결과 $5700\;kg_f/cm^2$ (558.6 MPa)에서 7.16 min 처리할 때 3.44 log cycles의 총균수 감소효과를 얻을 수 있을 것으로 예상되었다. 대장균의 경우, 모든 처리 조건에서 완전살균이 가능하였다. Peroxidase나 PPO와 같은 갈색화효소는 초고압처리에 의해서 쉽게 불활성화 되지 않았으며, 미생물이나 효소의 불활성화는 처리시간보다는 압력에 더욱 의존함을 알 수 있었다.

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고온호기산화장치의 고온미생물 첨가에 의한 병원성 미생물의 불활성화 (Inactivation of Pathogenic Bacteria by Addition of Thermophilic Bacteria in the Thermophilic Aerobic Oxidation(TAO) System)

  • 이원일;;;이명규
    • 한국축산시설환경학회지
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    • 제10권2호
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    • pp.111-118
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    • 2004
  • 본 연구는 양돈 분뇨를 고온호기산화장치(TAO)를 이용하여 처리하였을 때, 고온 미생물 의 첨가에 의한 온도 상승과 시스템의 내부 미생물 변화 그리고 유해 미생물의 불활성화에 대하여 연구하였다. 실험은 총 용량 $18 m^3(3.0\times2.5\times2.4 m)$의 반응기에 양돈 분뇨 $6 m^3$을 투입하고 5$\~$7일간 운전하였다. 대조구는 양돈 분뇨만을 투입하였고 처리구는 6 $\iota$의 고온 미생물(Bacillus. sp)을 투입하였다. 반응기의 내부 미생물의 변화를 검토하기 위해서 호기성 중온균, 고온균 그리고 일반 세균을 분석하였다. 또한, 유해 미생물의 불활성화를 검토하기 위하여 E. coil, Salmonella. sp, Crytosporidium parvum, Giardia lamblia를 분석하였다. 대조구와 처리구의 운전기간 동안 반응기 내부의 온도 범위는 $18\~66^{\circ}C$$55^{\circ}C$ 이상의 높은 온도를 유지하였다. 미생물 변화에 있어서 대조구의 중온균과 고온균은 $3.1\times10^6\~1.2\times10^2$ CFU/ml, $1.0\times10^4\~8.0\times10^1$ CFU/ml로 감소하였으나 처리구의 경우, 중온균은 $3.0\times10^8\~8.6\times10^5$ CFU/ml로 감소하였으나 고온균은 $2.0\times10^6\~1.2\times10^8$ CFU/ml로 증가하는 경향을 보였다. Salmonella와 Giardia는 처리 전$\cdot$후에 검출되지 않았으며 E. coil와 Crytosporidium은 처리전 양성반응을 나타내었으나 처리 후 불활성화 되었다. 이상의 결과를 통해서, 우리는 TAO system에 고온 미생물을 첨가함으로써 유해한 미생물이 사멸된 액상비료를 생산할 수 있었고 분뇨로부터 기인하는 2차 오염을 방지할 수 있을 것으로 판단된다.

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