Purpose: Titanium implants are widely used in the treatment of dentition defects; however, due to problems such as osseointegration failure, peri-implant bone resorption, and periimplant inflammation, their application is subject to certain restrictions. The surface modification of titanium implants can improve the implant success rate and meet the needs of clinical applications. The goal of this study was to evaluate the effect of the use of porous titanium with a chitosan/hydroxyapatite coating on osseointegration. Methods: Titanium implants with a dense core and a porous outer structure were prepared using a computer-aided design model and selective laser sintering technology, with a fabricated chitosan/hydroxyapatite composite coating on their surfaces. In vivo and in vitro experiments were used to assess osteogenesis. Results: The quasi-elastic gradient and compressive strength of porous titanium implants were observed to decrease as the porosity increased. The in vitro experiments demonstrated that, the porous titanium implants had no biological toxicity; additionally, the porous structure was shown to be superior to dense titanium with regard to facilitating the adhesion and proliferation of osteoblast-like MC3T3-E1 cells. The in vivo experimental results also showed that the porous structure was beneficial, as bone tissue could grow into the pores, thereby exhibiting good osseointegration. Conclusions: Porous titanium with a chitosan/hydroxyapatite coating promoted MC3T3-E1 cell proliferation and differentiation, and also improved osseointegration in vitro. This study has meaningful implications for research into ways of improving the surface structures of implants and promoting implant osseointegration.
These experiments were carried out to investigate the effect of rabbit anti-bovine cumulus cell antibodies on in vitro maturation of bovine follicular oocytes. Antisera to bovine cumulus cell were produced Japanese Ginat rabbit by repeated immunization of intact or solubilized bovine cumulus cell and purified by ammonium sulfate precipitation and Sepharose CL-4B protein-A affinity chromatography. The bovine cumulus cell-specific antibodies were confirmed by indirect ELISA. The results obtained in these experiments were summarized as follows : 1. The titer of the antibodies to cumulus cell determined by indirect ELISA using intact or solubilized bovine cumulus cell coated plates was very high in both intact and solubilized cumulus cells. Namely, the optical density at 1:12,800 dilution of antibodies was still significantly higher than that of non-immunized control serum. 2. When the follicular oocytes were treated with antibody to intact cumulus cells, the maturation rate of cumulus compacted and removed oocytes was ranged 47.6 to 59.1%. These value is significantly lower(p<0.05) than that(78.8%) of follicular oocytes cultured without the antibody. 3. the maturation rate of cumulus compacted and removed oocytes treated with antibody to solubilized cumulus cells was ranged 46.7 to 59.1%, significantly lower(p<0.05) than that(82.1%) of ooyctes cultured in antibody free medium. From above mentioned results, it could be said that cumulus cells promote nuclear maturation of follicular oocytes and that the beneficial effect of cumulus cells to the oocyte maturation is inhibited by the action of antibody to cumulus cells.
Jongkeon Kim;Kwanho Park;Sang Yun Ji;Beob Gyun Kim
Journal of Animal Science and Technology
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제65권5호
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pp.1002-1013
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2023
The objectives of the present study were to determine the nutrient digestibility of fish meal, defatted black soldier fly larvae (BSFL), and adult flies and to develop equations for estimating in vitro nutrient digestibility of BSFL for pigs. In vitro digestion procedures were employed to mimic the digestion and absorption of nutrients in the pig intestine. Correlation coefficients between chemical composition and in vitro nutrient digestibility of BSFL were calculated. In Exp. 1, in vitro ileal digestibility (IVID) of dry matter (DM) and crude protein (CP) and in vitro total tract digestibility (IVTTD) of DM and organic matter in defatted BSFL meal were less (p < 0.05) than those in fish meal but were greater (p < 0.05) than those in adult flies. In Exp. 2, CP concentrations in BSFL were negatively correlated with ether extract (r = -0.91) concentration but positively correlated with acid detergent fiber (ADF; r = 0.98) and chitin (r = 0.95) concentrations. ADF and chitin concentrations in BSFL were negatively correlated with IVID of DM (r = -0.98 and -0.88) and IVTTD of DM (r = -1.00 and -0.94) and organic matter (r = -0.99 and -0.98). Prediction equations for in vitro nutrient digestibility of BSFL were developed: IVID of CP (%) = -0.95 × ADF (% DM) + 95 (r2 = 0.75 and p = 0.058) and IVTTD of DM (%) = -2.09 × ADF + 113 (r2 = 0.99 and p < 0.001). The present in vitro experiments suggest that defatted BSFL meal was less digestible than fish meal but was more digestible than adult flies, and nutrient digestibility of BSFL can be predicted using ADF as an independent variable.
The objective of this study was to evaluate an in vitro procedure to estimate the crude protein (CP) digestibility of feed ingredients and mixed diets in broiler chickens. The apparent ileal digestibility (AID) of the CP was measured using 23-d-old male broilers. Three experimental diets, containing three feed ingredients, namely soybean meal (SBM), canola meal (CM), and corn distiller's dried grains with solubles (DDGS), were used as the sole source of CP. A 2-step in vitro procedure was used to estimate in vivo CP digestibility; all the experiments were performed in triplicate. In step 1, the feed ingredient and mixed diet samples were incubated for 4 h at 40 °C with a pH 2.0 pepsin solution, and in step 2, the flasks were incubated for 12 h at 40 °C with a pH 6.8 pancreatin solution. Following incubation, all the samples were filtered; the undigested residues were collected and pooled together to analyze the undigested CP concentration. The in vitro CP digestibility of mixed diets and feed ingredients were 93.2% and 93.0% for SBM, 86.8% and 86.7% for CM, and 83.8% and 79.1% for DDGS, respectively. The coefficients of determination (R2) between the CP digestibility values for the feed ingredients and the in vitro CP digestibility values for the feed ingredients or respective mixed diets were 0.87 or 0.67. The results of the study demonstrated that the in vitro CP digestibility values obtained from the respective mixed diets were better estimates than the values obtained from the individual feed ingredients to predict the AID of CP in feed ingredients fed to broiler chickens.
본 실험은 돼지난포란의 체외성숙과 체외수정 효과를 높일 수 있는 방법을 찾기 위하여 시도되었으며 직경 1~2mm와 3~7mm 난포로부터 채란된 난자를 mKRB(-BSA)에 돼지발정혈청(ESS), FCS 또는 투석돼지난포액(DFF)을 첨가한 성숙배양에서 24~48시간, 37$^{\circ}C$에서 배양하였다. 성숙된 난포란은 정소상체 정자와 24시간 배양 후 전핵행성 여부를 조사하였다. 36~48시간 배양에서 50~60%의 난자가 metaphase II에 도달되었고 난포 크기(1~2mm와 3~7mm)간에 체외성숙율의 차이는 없었으나 3~7mm 난포란에서 성숙분열이 다소 빨랐다. 체외성숙배양액에 5% ESS, 15% FCS 및 DFF 첨가시 대조구보다 다소 성숙율이 높았다. 체외수정율(전핵형성)은 5% ESS와 15% FCS 첨가 성숙시킨 난포란과 체내 수정능획득 정자와의 수정에서 각각 높은 경향이 있었다. 따라서 돼지난포란의 체외성숙과 수정에 ESS, FCS 및 투석난포액이 유효한 요인이 됨을 알 수 있다.
Insulin, transferrin and selenium (ITS) complex is reported to improve in vitro development of oocytes and embryos. This study was carried out to investigate the effects of ITS during in vitro culture (IVC) of porcine parthenogenetic and nuclear transfer (NT) embryos on subsequent developmental capacity in vitro. The electrically activated oocytes were cultured in Porcine Zygote Medium (PZM-3) with various concentrations (0, 0.1, 0.5, and 1.0%) of ITS for 7 days. Also, the electrically activated reconstructed embryos were cultured in PZM-3 with various concentrations (0, 0.1, 0.5, and 1.0%) of ITS for 6 days. Addition of ITS to culture medium did not affect development of porcine parthenogenetic embryos in vitro. To test the effect of ITS on the in vitro development of porcine NT embryos, factorial experiments were also performed for in vitro maturation (IVM) medium (TCM-199) with or without 1% ITS and culture medium (PZM-3) with or without 0.5% ITS. Addition of 0.5% ITS to culture medium increased (p<0.05) the proportion of NT blastocysts compared with non-treated group. In contrast, addition of 1% ITS to culture medium was ineffective or had a detrimental effect. Also, addition of ITS only to maturation medium increased (p<0.05) the percentage of NT blastocysts formation compared with the control group. In conclusion, addition of ITS to IVM or IVC medium could improve subsequent blastocyst development of porcine NT embryos.
Two experiments in this study were designed to compare the potential for in vitro capacitation and in vitro fertilization of ejaculated sperm among individual rabbit bucks. In experiment 1, for in vitro capacitation, the ejaculated sperm were preincubated in DM for 12 hr or 18 hr after HIS treatment, then 12 hr -or 18 hr- preincubated sperm were incubated with superovulated rabbit ova in a 5% CO2 incubator for 36 hr at 38$^{\circ}C$, and a part of cleaved ova was transferred to the recipient does for implantation of embryo. In experiment 2, effect of lysolecithin addition to preincubation medium on induction of accelerated in vitro capacitation and in vitro fertilization of individual rabbit sperm was studied. Experiment 1; 1. Percent acrosome reaction of sperm, noted after staining, after 12 hr or 18 hr preincubation ranged from 52.5 to 76.0% and from 67.5 to 90.0%, respectively and sperm motility index of these sperm ranged from 20.0 to 47.5 for 12 hr-preincubated sperm and from 15.0 to 37.5 for 18 hr- preincubated sperm. There was no a certain relation between percent acrosome reaction and sperm motility index. 2. In vitro fertilization rate (cleavage rate) of in vitro capacitated sperm varied widely among individual bucks, ranging from 0 to 47.8% for 12 hr - preincubated sperm and from 0 to 60.9% for 18 hr -prein- cubated sperm. Cleavage rate of 18 hr - preincubated sperm was higher and faster than that of 12 hr - preincubated sperm. 3. Eight of 44 in vitro fertilized embryos transferred into 6 recipients were implanted in 4 recipients (66.7%) up to day 15 and implnatation rate was 18.2%. Experiment 2; 1. The percent acrosome reaction of sperm before and after 4 hr preincubation in DM without lysolecithin varied significantly among individual bucks, ranging from 0.4 to 18.4% and from 1.7 to 37.4%, respectively and percent acrosome reaction of sperm at 30 min after addition of 60${\mu}$g/ml lysolecithin also was significantly different among bucks, ranging from 19.2 to 67.1%. 2. Effect of accelerated acrosome reaction following lysolecithin addition was more considerable in the individuals showed less percent acrosome reaction before and after 4 hr preincubation. Percentage of motile sperm and motility score showed a trendency towards a decrease with increase of preincubation time and time after lysolecithin addition. 3. In vitro fertilization rate (cleavage rate) at 24 hr postinesmination with pooled sperm were treated to 60 $\mu\textrm{g}$/ml lysolecithin for 30 min after 4 hr preincubation was 24.6%, a higher rate than 13.2% for control. While 80 $\mu\textrm{g}$/ml lysolecithin-added sperm showed a lower cleavage than control and 60$\mu\textrm{g}$/ml-added sperm at both 24 hr and 48 hr postinsemination. These results from 2 experiments suggest that more useful preincubation time for the in vitro capacitation of ejaculated rabbit sperm is 18 hr in DM after HIS treatment, although there is wide variation in vitro capacitation and in vitro fertilization rate among individual bucks, and lysolecithin addition to at least 4 hr - preincubated sperm in DM can result in almost same in vitro fertilization rate as that of 18 hr - preincubated sperm in the experiment 1.
How did nature create the first set of genes at the beginning of life on Earth? One of the goals of molecular biology is to elucidate the fundamental rules governing how genes and, therefore, proteins were created. Through experiments carried out in the emerging field of "in vitro" or "benchtop" evolution studies, we are gaining new insights into the origins of genes and proteins as well as the origins of their functions (e.g., catalysis). In this review, I present an overview of recent experimental approaches to the question of the origin and evolution of genes. In addition, I will introduce a novel in vitro protein emergence system that was recently developed in my laboratory.
This paper presents the enhancement of oxygen transfer efficiency using the vibrating intravascular lung assist device (VIVLAD) in in-vitro experiments for patients having chronic respiratory problems. The test section was a cylinder duct with the inner diameter of 30 mm. The flow rate was controlled by the pump and monitored by a built-in flow meter. The vibration apparatus was composed of a piezo-vibrator, a function generator. and a power amplifier. The direction of vibration was radial to the fluid flow. Gas flow rates of up to 6 l/min through the 120-cm-Jong hollow fibers have been achieved by exciting a piezo-vibrator. The output of PVDF sensor were investigated by various frequencies in VIVLAD. The experimental results showed that VIVLAD would be enhance oxygen transfer efficiency.
To investigate the effect on the antimicrobial activity against S.aureus ATCC 6538, E.coli KCTC 1039 and cell toxic level against transformed mouse fibroblast L929 in formula added with various concentrations of UVB blockers commonly used in cosmetic products, these experiments were carried out by preservative efficacy testing methods and in vitro cytotoxicity methods. The results obtained were as follow ; 1) Octyl Dimethyl PABA had a broad antibacterial spectrum against the Gram (+) and the Gram(-) bacteria at 5.84 % concentration, but not Octyl Methoxycinnamate. 2) Antibacterial activity was decreased in a combined UVB blocker system of squalane base. Especially, Octyl Dimethyl PABA was inactivated by Octyl Methoxycinnamate at 5.84% concentration to a large extents , but not 4-Methylbenzylidene Camphor. 3) Within in vitro cytotoxicity by use of mouse fibroblast L929 on UV-B blockers, NR assay was more excellent than MTT assay on quantitative
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[게시일 2004년 10월 1일]
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