Proceedings of the Polymer Society of Korea Conference
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2006.10a
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pp.261-261
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2006
Membranes are a central feature of all biological systems and their ability to control many cellular processes is critically important. As a result, a better understanding of how molecules bind to biological membranes is an active area of research. In this report, the interaction between our biomimetic structures and different biological membranes is reported using both model vesicle and in vitro bacterial cell experiments. These results show that lipid composition is more important for selectivity than overall net charge. An effort is made to connect model vesicle studies with in vitro data and naturally occurring lipid compositions.
Three experiments were conducted with follicular oocytes, to compare some somatic cells, growth factors and media for in vitro maturation of bovine oocytes. In the first experiment, the type of somatic cells had no effects on in vitro maturation of bovine follicular ooctyes. In the second experiment, oocytes were matured in TCM199 su, pp.emented with growth factors on IVM of bovine follicular oocytes, then all were co-cultured with cumulus cells. The proportion of used oocytes that developed to expanding blastocysts was 22.2%, 20.2%, 17.7%, 22.2%, 24.4% and 20.2% after maturation in TCM199 su, pp.emented with control, insulin, IGF-I, IGF-Ⅱ, FGF and EGF, respectively. In the third experiment, oocytes were matured in BO, Ham's F10 and TCM199, then all were fertilized in BO, and embryos cultured in BO, Ham's F10 and TCM199, respectively. Cleavage rates in BO were 90%, had higher than in Ham's F10(80%) or in TCM199(64%). But production of expanding blastocysts in TCM199(21%) or Ham's F10(20.6%), had higher than in BO(4.6%).
In order to anticipate the physiological function of dietary fibers, glucose and bile acid retarding effects were experimented by using in vitro methods based on dialysis for commercial fibers and dietary fiber residue of food samples. The glucose retarding effect in commercial fibers increased in the order of alginic acid, guar gum, CM-cellulose, citrus pectin > apple pectin > $\alpha$-cellulose and the effect in food fiber residues increased in the order of sea mustard > Korean cabbage, apple > rice bran, barley, soybean, and tangerine. The bile acid retarding effect in commercial fibers increased in the order of citrus pectin, guar gum > CM-cellulose, alginic acid > apple pectin > $\alpha$-cellulose and the effect in food fiber residues increased in the order of barley, rice bran > sea mustard > tangerine > Korean cabbage, soybean > apple. The higher the retarding effect of glucose movement through the dialysis membrane, the more effective the control of the human blood glucose level. As the retarding effect of bile acid movement across the dialysis membrane increased, the human serum cholesterol level correspondingly reduced. Consequently these in vitro methods can be used as a preceding test before undertaking animal and human experiments to predict the physioloical effects of fiber residues from diverse food samples as well as commercially refined fibers.
Kim, Se-Woong;Park, Jong-Im;Jung, Yeon-Gil;Roh, Sangho
Reproductive and Developmental Biology
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v.38
no.4
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pp.143-146
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2014
Antioxidants, as reactive oxygen species scavengers, are one of the beneficial additives in serum-free defined culture medium. In this study, three separate experiments were performed to determine the effects of 3-hyroxyflavone added to the culture medium on the developmental competence of follicular bovine oocytes during in vitro maturation (IVM) and/or in vitro culture (IVC). The rate of blastocyst developed from oocytes cultured in IVM medium with 3-hyroxyflavone was significantly higher than that from control oocytes (39.0% vs. 26.3%, p<0.001), respectively. However, oocytes cultured in the medium with addition of 3-hyroxyflavone only at IVC period did not show significance in the blastocyst development when compared with control. When 3-hyroxyflavone was added to both IVM and IVC media, the rate of blastocyst formation was even significantly lower (21.1%) than control (26.5%; p<0.05). The present findings suggested that antioxidative activity of 3-hydroxyflavone added to only IVM medium beneficially affected the developmental competence of follicular bovine.
These experiments were undertaken to investigate the rate of in vitro fertilization of bovine follicular oocytes treated with glycosaminoglycans(GAGs). Bovine follicular oocytes were obtained from the ovary of slaughtered animal and matured in media containing the various concentrations of hydluronic acid, chondroitin sulfate or heparin for 26 hours. Epididymal spermatozoa were capacitated and insemination was made by introducing about 10~15 matured oocytes into the suspension of spermatozoa. Six hour after insemination the eggs were transferred to TCM-199 supplemented with FCS(10%) and then examined the embryo development. After in vitro insemination, percentages of ova fertilized were 61.3 or 48.3%, respectively, for the cumulus intact or removed in the percentages of GAGs. However, in case of cumulus-free oocytes treated with GAGs, the fertilization rates were 58.8, 62.1, 58.8, and 61.8%, respectively, showing significant effect compared to 48.3% in cumulus-free oocytes. Our findings suggest that cnondroitin sulfate and heparin are superior to hyaluronic acid in the fertilizatin and pronuclear formation of bovine oocytes.
The studies on the carried out to investigate the effects of co-culture with uterine fluids and uterine epithelial cells on the in-vitro fertilization and developmental rate of porcine follicular oocytes. The ovaries were obtained from slaughtered swine. The follicular oocytes surrounded with cumulus cells were recovered by aspirating follicular fluids from the visible follicles of diameter 3~5 mm. The follicular oocytes were cultured in TCM-199 medium containing hormones and 10% ECS for 46~48 hrs in a incubator with 5% $CO_2$ in air at 38.5$^{\circ}C$ and then matured oocytes were again cultured for 12~18 hrs with motile capacitated sperm by preincubation of heparin. The results obtained in these experiments were summarized as follows ; 1.The in-vitro maturation and fertilization rate of porcine oocytes co-cultured with uterine fluids in TCM-199 medium were 68.0% arid 55.7%, the rates were higher than of control, 56.5% arid 38.7%. 2. When the in-vitro fertilized oocytes were co-cultured with porcine uterine epithelial cells, the fertilization rate was 60.3%, the rates were higher than that of control, 35.7%. 3. When the in-vitro fertilized oocytes were co-cultured with porcine uterine epithelial cells, the development rate to be blastocyst was 12.4%, the rates were higher than that of control, 9.2%(p<0.05).
Ru, Y.J.;Glatz, P.C.;Miao, Z.H.;Swanson, K.;Falkenberg, S.;Wyatt, S.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.15
no.6
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pp.800-805
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2002
Two experiments were conducted to compare digestibility of 12 diets in sheep, red and fallow deer. No differences (p>0.05) between sheep, red and fallow deer in digestibility of dry matter, organic matter and digestible energy content for all diets were found except for the sorghum diet and medic hay. Sheep and fallow deer digested the sorghum diet better than red deer. An in vitro study showed that sheep had a lower in vitro dry matter digestibility and digestible energy content than both red and fallow deer, with a significant interaction between animal species and feed ingredient. Deer digested straws and hays better (p<0.05) than sheep. In vitro digestibility was lower (p<0.05) than in vivo digestibility, but significantly correlated with in vivo digestibility for red and fallow deer. The in vitro method for digestibility estimation has potential as a rapid feed evaluation system for deer, but needs further validation.
The effects of mushrooms such as Lentinus edodes and Pleurotus ostreatus on anti-cancer activity through in vivo and in vitro experiments were powders of protein-bound polysaccharides in mushrooms were solubilized in 0, 5, 25 mg/kg saline, respectively and were used in vitro experiments. The in vivo experiments were carried out as followed: i) anti-cancer activities on Leukemia $(L_{1210})$, Hepatlicus cancer $(H_{22})$ and Sarcoma180/(S180), and ii) the effect on immune system through changes in intestine weight and the number of hemolytic plague forming cells. Protein-bound polysaccharides of all showed anti-cancer activity on $L_{1210}$ and fruit body of Lentinus edodes 25 mg/kg treatment group showed the highest inhibition rate (86%). Pleurotus ostreatus mycelial in medium of cultivate 25 mg/kg treatment. Fruid body of Lentinus edodes 25 mg/kg treatment group showed the highest inhibition rate (86% and 71%, respectively) on $H_{22}$ among them. The inhibition rates of fruit body and mycelial of Lentinus edodes 25 mg/kg treatment groups on S180 were 33.9% and 30.9%, respectively. Each samples of 50, 100, 200, $400\;{\mu}g/{\mu}L$ on in vitro cell toxicity test did not show significantly different cell death rates at P<0.05. In immune test, weights of liver and spleen were increased according to increase in conc. but were not significantly different at P<0.05. The weights of thymus were heavy in fruit body and mycelial of Lentinus edodes treatment group but were not significantly different at P<0.05. Hemolytic plague forming cells with antibody formation capability were significantly high in fruit body and mycelial of Lentinus edodes treatment samples.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2002.11b
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pp.6-7
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2002
The goal of this research was to develop the effectiveness of in vitro culture method for A. formosanus and study the environment in vitro conditions affecting on growth. The first series of experiments were examined to investigate the response of three different basal media, MS (Murashige and Skoog, 1962), Knudson (KC; Knudson, 1946) and modified hyponex on growth and multiplication during in vitro culture. Multiple shoot proliferation was induced in shoot tip explants on Hyponex (H3) media supplemented with BA (1 mg1$^{-1}$) or TDZ (1-2 mg1$^{-1}$). Addition of activated charcoal (1%) to the TDZ containing medium promoted rapid shoot tip proliferation (11.1 shoots per explant) but the same medium had an opposite effect resulting in poor proliferation in the nodal explants. However, the regenerated shoots had slow growth rate and failed to elongate. This problem was overcome by transferring the shoot clumps to a hormone free H3 media supplemented with 2% sucrose and 0.5% activated charcoal. Using bioreactor culture for scaling up was also shown the best way for multiple shoot induction and growth of this plant.(중략)
In vitro phosphorylation experiments with a cell extract of Streptomyces coelicolor A3(2) M130 in the presence of ${\gamma}-[^32P]$]ATP revealed the presence of multiple phosphorylated proteins, including the AfsR/AfsK kinases which control the biosynthesis of A-factor, actinorhodin, and undecylprodigiosin. Phosphorylation of AfsR by a cell extract as an AfsK source was significantly inhibited by Ser/Thr protein kinase inhibitors, staurosporine and K-252a, at concentrations giving 50% inhibition ($IC_50$) of $1{\mu}M\;and\;0.1{\mu}M$, respectively. Further in vitro experiments with the cell extracts showed that phosphorylation of multiple proteins was inhibited by various protein kinase inhibitors with different inhibitory profiles. Manganese and calcium ions in the reaction mixture also modulate phosphorylation of multiple proteins. Manganese at 10 mM greatly enhanced the phosphorylation and partially circumvented the inhibition caused by staurosporine and K-252a. A calcium-activated protein kinase(s) was little affected by these inhibitors. Herbimycin and radicicol, which are known as tyrosine kinase inhibitors, did not show any significant inhibition of AfsR phosphorylation. Consistent with the in vitro effect of the kinase inhibitors, they inhibited aerial mycelium formation and pigmented antibiotic production on solid media. On the contrary, when assayed in liquid culture, the amount of actinorhodin produced was increased by staurosporine and K-252a and greatly decreased by manganese. All of these data clearly show that the genus Streptomyces possesses several protein kinases of eukaryotic types which are involved in the regulatory network for morphogenesis and secondary metabolism.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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