Potato kimchi, fermentation was carried out at $10^{\circ}$C for 15 days using various ratios of potato to kimchi (2.5%, 5%, 10%). The samples were determined according to the fermentation time, pH, acidity and growth of lactic acid bacteria in potato kimchi. The addition ratio of potato to kimchi had little effect on the pH, acidity or growth of lactic acid bacteria in potato kimchi. In comparison to baechu kimchi and mul-kimchi, the pH, acidity and growth of lactic acid bacteria was better in potato kimchi than in the other kimchi samples. The in vitro anticancer effect of potato kimchi was investigated using human cancer cells, AGS human gastric adenocarcinoma cells and HT-29 human colon adenocarcinoma cells. MTT assay revealed that the methanol extract of potato kimchi showed the highest anticarcinogenic effects.
Aloe의 추출 시료들 중 혈관생성을 촉진하는 물질이 G1M1D1M1 분획에 있음을 chorioallantoic-membrane(CAM) assay, in vitro angiogenesis assay, u-PA, PAI, u-PAR, 및 matrix metalloprotease(MMP)의 유전자 발현조사, gelatin zymogram assay, modified CAM assay를 하여 확인 하였다. 그런 다음 G1M1D1M1 분획을 다시 분리하여 단일 성분인 NY932와 3종의 분획들을(U>3,000, 3,000>U>1,000, U<1,000) 얻었다. 이들 각각에 대한 혈관 생성 촉진 작용을 CAM assay 방법으로 조사한 결과 순수단일 성분인NY932가 혈관 생성 촉진 활성을 가장 높게 나타났다. 즉 NY932의 농도를 100ng, 2, 10, 35, 60 $\mu$g으로 투여하였을 때, 각각 2/18($11\%$), 4/10($49\%$), 16/22($73\%$), 15/17($88\%$), 9/9($100\%$)의 혈관생성 촉진 효과를 보였다. 따라서 순수 단일 성분인 NY932의 혈관 생성 촉진 작용기전을 규명하기 위하여 혈관 생성에 관련된 효소들[matrix metalloprotease(MMP)s, urokinase-plasminogen activator(uPA) 등]과 그 저해제들(TIMPs, PAI)의 유전자 발현을 조사하였으며, wounding migration assay등을 수행하였다.
Objective : The purpose of this study was to investigate effect of Gungguitakli-San(GTS) on the anti-tumor, immunocytes. Methods : This study estimated the proliferation of L1210 and S-180 cell lines, mouse splenocytes and thymocytes in vitro, and estimated the proliferation of L1210 cell, S-180 cell, thymocytes and splenocytes and body weight in S-180 cells-transplanted mice. The cytotoxicity and proliferation of cells were tested using a colorimetric tetrazoliun assay(M1T assay). Results : The results of this study were obtained as follow ; 1. GTS was significantly increased in the proliferation of thymocytes and splenocytes In vitro. 2. GTS was significantly showed cytotoxicity on the L1210 cell lines and 8-180 cell lines in vitro. 3. GTS was significantly showed cytotoxicity on the L1210 cell lines in vivo. 4. GTS was significantly increased in the weight of mice and decreased weight of sarcoma, in S-180 cells transplanted mice. 5. GTS was significantly increased in the period of survive, in S-180 cells transplanted mice. Conclusions : The author thought that GTS had action of anti-cancer by becoming immunocytes activity and by cytotoxicity of cancer cells.
This study investigated the estrogenicity of 4-nonylphenol (NP) and diethylstilbestrol (DES) in vitro during oocyte maturation in the marine fish, Tridentiger obscurus, using steroid hormone assays and GVBD assay. Vitellogenic (0.53mm diameter) and fully vitellogenic (0.75mm diameter) oocytes were in vitro exposed to NP (0.045 453.82 nM and DES (0.037 372.62 nM). In vitellogenic oocytes, 45.38 and 453.82nM NP and 3.73 372.62nM DES increas the estradiol-$17{\beta}$ (E2)/testosterone (T) ratio. In fully vitellogenic oocytes, 0.45, 45.38 and 453.82nM NP and 3.73nM DES increased E2/T. In the GVBD assay, 0.45 and 4.54nM NP and 0.037, 3.73 and 37.26nM DES inhibited GVBD. These results suggest that NP and DES have estrogen-agonistic effects in oocyte maturation in T. obscurus. In addition, NP and DES have different sensitivity according to the oocyte developmental stage, and the estrogenagonistic effects of DES were greater than were those of NP.
Objectives : Anticancer and immune-modulating effects of several Korean medical prescriptions including Yukgunja-tang, Bohwa-tang, Sogam-Won, and Kamiboa-tang were investigated. Methods : In vitro anti-cancer effects were measured by cytotoxicity MTT assay using SNU-1 gastric cancer cell lines, In vivo anti-cancer effects were measured by increased life span of S-180 sarcoma-injected ICR mouse. Immune-modulating effects were analyzed by measuring hemagglutinin titer, appearance of rosette forming cells, lymphocyte proliferation, and phagocytic index in methotrexate-pretreated mice. Results : In vitro assay showed that only Sogam-won showed cytotoxic effect with $IC_{50}$ of 87.9 ${\mu}g/ml$. All other prescriptions showed no cytotoxic effects against SNU-1 gastric cancer cell line. However, in vivo assay showed that Sogam-won showed lowest anti-cancer effects in contrast to its highest cytotoxic effects, Kamiboa-tang, which showed no cytotoxic effect, showed the highest in vivo anticancer effects, with increased life span of 140%. Kamiboa-tang showed significant immune-enhancing activities by significantly increasing rosette forming cells, lymphocyte proliferation, and phagocytic index in methotrexate-pretreated mice (P<0.05). Conclusion : The anticancer effect of Kamiboa-tang is not mediated by direct inhibition of cancer cells but is mediated by improving immune reactions against cancer cells.
Metabolism study of the dye, benzidine, was performed by gas chromatography-mass selective detector (GC/MSD) in the urine of rats orally administered 100 mg/kg benzidine. Urine samples were collected in metabolic cages for 0-24, 24-48, and 48-72 hrs. Ten ml of the urine was extracted with XAD-2 resin and the XAD-2 column was eluted with methanol. After evaporation, benzidine and its metabolites were extracted with diethyl ether (for non-conjugated fraction). For conjugated metabolites, $\beta$-glucu-ronidase was added to the aqueous layer that was incubated for 1 hr at 5$0^{\circ}C$ and the aqueous layer was extracted as in non-conjugated fraction. Aliquot of trimethylsilylated derivatives was applied to the GC/MSD. The mutagenicity of benzidine and its acetylated metabolites was tested by histidine/reversion assay. Five metabolites observed and confirmed either by electron impact and chemical ionization modes of the GC/MSD, or authentic compounds were monoacetyl-, diacetyl-, hydroxyacetyl-, hydroxydiacetyl-, and hydroxy-benzidine. Monoacetyl-benzidine was more potent than benzidine in histidine/reversion assay. This data indicates that monoacetylation of benzidine may be one of the metabolites produced in metabolic activation process.
Aralia elata seeds were successively extracted with water, methanol, ethanol, acetone and chloroform. The crude extracts were investigated for antioxidant and antidiabetic activities. The antioxidant properties of various extracts were evaluated by antioxidant tests, such as DPPH free radical-scavenging activity, hydroxyl radical-scavenging assay, metal-chelating activity, lipid peroxidation inhibition activity and reducing power assay. The 70% methanol extract exhibited the highest activity in the in vitro models of DPPH free radical-scavenging activity, metal-chelating activity, and reducing power assay. Acetone extract showed good effects on lipid peroxidation inhibition and hydroxyl radical-scavenging assay at a low concentration. In addition, the $\alpha$-glucosidase inhibition assay showed that 70% methanol extract had the highest activity. These results indicate the high possibility of using A. elata seeds for medical application due to their efficient antioxidant properties.
Three synthetic chemicals, benzoyl chloride, 2-propyn-l-ol, and 2-phenoxy ethanol were selected for genotoxicity testing, based on production quantity and available genotoxic data. In our previous report, benzoyl chloride induced chromosomal aberrations in Chinese hamster lung (CHL) fibroblast in vitro with and without metabolic activation, while 2-propyn-l-ol and 2-phenoxy ethanol induced only with metabolic activation. To compare the genotoxicity of chromosome aberration assay, the single cell gel electrophoresis (comet) assay subjected using CHL cells. As a result, statistically significant differences of tail moment values of benzoyl chloride, 2-propyn-1-ol, and 2-phenoxy ethanol were observed compared with control values on almost all concentrations with S9 or without S9 metabolic activation system. This results suggest that genotoxic results of the comet assay and the chromosome aberration assay show correlationship of genotoxicity in the CHL fibroblast. In summary, the positive result of chromosome aberration of benzoyl chloride, 2-propyn-l-ol, and 2-phenoxy ethanol was also induced DNA damages in comet assay with same cell line. Consequently, comet assay will be useful and more accurate tool to detect and to confirm the genotoxicity especially DNA damages in CHL fibroblast.
The comet assay, also called single-cell electrophoresis (SCGE) assay, is a potential sensitive monitoring tool for DNA damage in cells. The primary objective of this study was to use comet assay to ascertain if the blood cells of flounder (Pleuronichthys olivaceus) and muscle cells of clam (Saxidomus purpurata) are suitable for genotoxicity screening. This was achieved by initially exposing blood and muscle cells under in vitro conditions to the reference genotoxin hydrogen peroxide ($H_2O_2$); strong correlation between $H_2O_2$ concentration and comet values were found. Subsequently, the identification of DNA damage in isolated cells from flounder and clam was performed under in vivo exposure to benzo(a)pyrene (BaP) and tributyltin (TBT). Flounder and clam were exposed to different concentrations (1, 10, 50, 100 ${\mu}g/L$) of BaP or TBT for 4 days. Regardless of treated chemicals, blood cells of flounder were more prone to DNA breakage compared to muscle cells of clam. In conclusion, in vivo genotoxicity of BaP and TBT can be biomonitored using the comet assay. This study suggests that flounder and clam do show potential as mediums for monitoring genotoxic damage by comet assay.
The antioxidant potency of methanolic extract Clerodendrum infortunatum Linn. (MECI), which are widely used in the Indian indigenous system of medicine for different purposes, was studied. The antioxidant potential was evaluated using different established in vitro antioxidant tests viz. determination of total amount of polyphenolics compounds, DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical scavenging, nitric oxide scavenging, superoxide anion radical scavenging, hydroxyl radical scavenging and reductive power assay. It was found that MECI contain a high amount of polyphenolics and possesses significant free radical scavenging activity in all the assay. The higher activity was may be due to presence of richest amount of polyphenolics and flavonoids in it.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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