Interactions of both feminizing and masculinizing chemicals inducing imposex in gastropod were investigated with a long-term exposure experiment. Imposex-free rock shell(Thais-clavigera)was exposed to TBT and other antagonistic chemicals (nonylphenol and DDT), P450 inducer (phenobarbital) and natural sex hormone (estrogen) mixtures for 60 days. None of imposexed-females were found in control, sham (ethanol) and testosterone exposure group, on the other hand imposex was induced in the TBT and all the TBT+antagonist mixture groups. After 60-day exposure, frequency of imposexed-female ranged from 31-68%. Female mean penis length (FMPL) of imposexed-female ranged from 0.87-2.58 mm, and relative penis length indices were from 7.2 to 21.2%. However, the degrees of imposex were different among the exposure groups. The FMPLS of three exposure groups (TBT+estrogen, + DDT and +nonylphe- not) were less than that of the TBT exposure group. Ethoxyresorufin-O-deethylase (EROD) activities in gastropod decreased in the TBT and all the TBT+antagonist ekposure groups compared to the control group. A negative correlation was abtained between TBT body residue and EROD activity, while a positive relationship was obtained between 737 body residue and the degree of imposex except for the TBT +DDT exposure group. Although 737 concentration was relatively high in the TBT+DDT exposure group, the TBT +DDT exposure group demonstrated low EROD activity and low degree of imposex. These results indicate that a certain antagonistic effect of DDT occurred in induction of imposex by TBT.
제주 항 내에 서식하는 대수리 Thais clavigera를 조직학적 방법을 이용하여 1998년 3월부터 1999년 2월까지 생식소 발달과 생식주기 그리고 imposex 현상에 대해 조사하였다. 조직학적 관찰 결과, 배우자형성은 암,수 모두 10월에 처음 시작 되었고, 성숙한 알들은 주로 5월에서부터 7월 사이에 관찰되었다. 생식소단면적 지수 역시 알이 성숙하는 5월과 7월 사이 급격히 증가하였으며, 8월에 급격히 낮아져, 7월과 8월 사이에 집중적인 산란이 있었던 것으로 사료되었다. 유기주석화합물에 의한 imposex 현상의 진행 정도를 나타내는 RPSI는 월 평균 59.5-173.4%로 다른 지역에 비하여 비교적 높게 나타났으며, 이는 제주 항 내의 유기주석화합물에 의한 것으로 추정되었다.
Butyltin compounds (BTs) in seawater, sediments and organisms (Thais clavigera, Liolophura japonica and Cellana nigrolineata), were quantitatively determined to evaluate their distribution inside Songsan Harbor of Cheju Island. In addition, imposex in T. clavigera was used to assess the effect on organisms of BTs. Analysis of the samples collected in seawater, sediments (March, June and August) and organisms (May, July and August) in 1998, confirmed the contamination of BTs in the aquatic environment inside Songsan Harbor. The main BTs species in seawater and sediments was monobutyltin (MBT), tributyltin (TBT), respectively, irrespective of survey time. In oranisms, TBT and dibutyltin (DBT) were detected in similar concentrations for T. clavigera and L. japonica, but for C nigrolineata, DBt concentration was the highest. TBT, the most toxic to aquatic organisms among BTs, was found at concentrations which were sufficient to have a serious effect on the sensitive organisms upon chronic exposure, The relatively high correlations (r>0.83) between BTs indicated that DBT and MBT were mainly degraded from TBT based on antifouling paint and their sources were negligible. The sedimentary organic matters did not have influence on the distribution of BTs in marine environment, and lipid content in T. clavigera did not show a correlation with TBT concentrations. The rate of occurrence of imposex in T. clavigera was 100%, and the relative penis length index (RPLI) and the relative penis size index (RPSI) which represent the degree of imposex were 79.7%, 58.1%, respectively. Measurement of imposex in T. clavigera was expected to be a very helpful tool for preliminary survey of BTs prior to trace analysis of BTs.
Sex ratio of a population is a key factor to determine reproductive rate of the population. If the population has skewed sex ratio to the male, the population size may decline gradually at an area which it inhabits, and, furthermore, if a species plays an ecologically important role in its community (e.g., a keystone species in Paine, 1966), its potential reproductive rate will be to form a characterized community because community structure is strongly influenced by the abundance of the ecologically important species (Hughes, 1986). A number of workers (e.g., Bryan et al., 1986 in Nucella lapillus; Spence et al., 1990 in Thais haemastoma) suggested that high frequency and/or late stage of imposex might affect the female mortality and normal reproduction adversely. Consequently, the imposex could affect sex ratio of natural population of some neogastropod including thaisid species. (omitted)
The persistent and ubiquitous environmental contaminant, tributyltin chloride (TBT), induces not only imposex in gastropods but also the differentiation of adipocytes in vitro and increases adipose mass in vivo in vertebrates. TBT is a nanomolar affinity ligand for retinoid X receptor (RXR) in the rock shell(Thais clavigera) and for both the RXR and the peroxisome proliferator activated receptor $\gamma(PPAR\gamma)$ in the amphibian (Xenopus laevis), mouse, and human. The molecular mechanisms underlying induction of imposex by TBT have not been clarified, though several hypotheses are proposed. TBT promotes adipogenesis in the murine 3T3-L1 cell model and perturbs key regulators of adipogenesis and lipogenic pathways in vivo primarily through activation of RXR and $PPAR\gamma$. Moreover, in utero exposure to TBT leads to strikingly elevated lipid accumulation in adipose depots, liver, and testis of neonate mice and results in increased adipose mass in adults. In X. laevis, ectopic adipocytes form in and around gonadal tissues following organotin, RXR or $PPAR\gamma$ ligand exposure. TBT represents the first example of an environmental endocrine disrupter that promotes adverse effects from gastropods to mammals.
Tributyltin (TBT) and its degradation products, dibutyltin (DBT) and monobutyltin (MBT) were quantitatively determined in surface sediments and two molluscan species, Pacific oyster (Crassostrea gigas) and rock shell (Thais ctavigera), from Gwangyang Bay, Korea. Butyltin compounds were detectable in almost all sediment and biota samples. Tributyltin concentrations in surface sediment ranged<2∼33 ng g$\^$-1/, which is at a lower end of TBT concentrations in industrialized bays in Korea. However, TBT levels in sediments were related to boating activities around the bay. In biota samples, TBT concentrations were in the range of 178∼2,458 ng g$\^$-1/ toy oyster and 47∼236 ng g$\^$-1/ for rock shell. Relatively high TBT concentrations in biota were found near wharves for fisherboats and harbor areas. About 90∼100% of the female T. clavigera displayed imposex, and relative penis length index of the imposexed-female was in the range of 20.9∼107.9%. Furthermore, TBT body residue had a significant positive relationship with degree of imposex in T. clavigera. Overall, TBT concentrations in Gwanyang Bay were much lower than other major bays in Korea.
Butyltin compounds in seawater, sediments and organisms inside Jeju Harbor of Jeju Island, Korea, were quantitatively determined to assess the extent of contamination and to evaluate the bioaccumulation in Thais clavigera (gastropod), Liolophura japonica and Cellana nigrolineata. In addition, imposex in T. clavigera was used to assess the sublethal effect of tributyltin compounds and its usage as a specific biomarker for these compounds was also studied. The main species in seawater was tributyltin (TBT) in March and June, monobutyltin (MBT) in August, but in sediments and organisms it was dibutyltin (DBT) and TBT, respectively, irrespective of survey time. TBT, the most toxic to aquatic organisms among BTs, was found at concentrations which were sufficient to have a serous effect on the sensitive organisms upon chronic exposure. The high correlations (r>0.7) between BTs indicated that DBT and MBT were mainly degraded from TBT based on antifouling paints and their sources were negligible. The sedimentary organic matters have little influence on the distribution of BTs in marine environment and the lipid content in T. clavigera showed a significant correlation with TBT concentrations. Measurement of imposex T. clavigera was expected to be a very helpful tool for preliminary survey of BTs prior to trace analysis of those.
In aquatic invertebrates, particularly marine gastropods, organotin compounds induce irreversible sexual abnormality in females, which is termed imposex, at very low concentrations. Organotin compounds are agonists for nuclear receptors such as RXRs and $PPAR{\gamma}$. However, the imposex phenomenon has not been reported to act as an antagonist on estrogen receptors in other species, including vertebrates and invertebrates. In order to gain insights into the antagonistic activity of organotin compounds on estrogen receptors (ERs), we examined the inhibitive effect of these compounds on estradiol-dependent ${\beta}$-galactosidase activity using the yeast two-hybrid detection system consisting of a combination of the human estrogen receptor ($hER{\beta}$) ligand-binding domain and the co-activator steroid receptor co-activator-1 (SRC1). Tributyltin-hydroxide (TBT-OH) and triphenyltin-chlorine (TPT-Cl) exhibited an inhibitive effect on $E_2$-dependent transcriptional activity, similar to antagonistic chemicals such as 4-hydroxytamoxifen (OHT) or ICI 182,780, at a very low concentration of $10^{-14}$ M TBT or $10^{-10}$ M TPT, respectively. The yeast growth and transcriptional activity with transcriptional factor GAL4 did not exhibit any effect at the tested concentration of TBT or TPT. Moreover, the yeast two-hybrid system using the interaction between p53 and the T antigen of SV40 large did not describe any effect at the tested concentration of OHT or ICI 182,780. However, the interaction between p53 and T antigen was inhibited at a TBT or TPT concentration of $10^{-9}$ M, respectively. These results indicate that TBT and TPT act as inhibitors of ER-dependent reporter gene transcriptional activation and of the interaction between $hER{\beta}$ LBD and the co-activator SRC1 in the yeast two-hybrid system. Consequently, our data could partly explain the occurrence of organotin compound-induced imposex on the endocrine system of mammals, including humans.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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