• 한국생물물리학회:학술대회논문집
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• 한국생물물리학회 2003년도 정기총회 및 학술발표회
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• pp.43-43
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• 2003

Large-conductance $Ca^{2+}$-actived $K^{+}$ channels ($BK_{Ca}$ channels) play a key role in setting the pace of contractile activity in muscle and are involved in the regulation of neurotransmitter release in neuron. $BK_{Ca}$ channels are activated by depolarizing membrane potential and the elevated level of intracellular calcium. Using yeast-two hybrid assay, we have identified a novel protein interacting with the cytosolic carboxyl terminus of rSlo, the brain isoform of rat large-conductance $Ca^{2+}$-activated $K^{+}$ channel $\alpha$-subunit. The novel gene encodes 51 kDa protein and is named as SIRK(rSlo-interacting RGS-like protein). SIRK is expressed in various tissues and localized in the cytosolic and the membrane fraction. Biochemical and immunological studies indicated that SIRK physically interacted with the cytosolic region of rSlo. To investigate whether SIRK can modulate the activity of rSlo, GFP-fused SIRK and rSlo were transiently transfected into COS-7 cells and the effects of SIRK was studied using electrophysiological means. We concluded that the overexpression of SIRK alters the surface expression of rSlo channel with only a limited effect on the biophysical characteristics of the channel.the channel.

• 농업과학연구
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• 제45권4호
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• pp.769-777
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• 2018

The fermentation of Panax ginseng yields many compounds including ginsenosides that have various biological functions. The objective of this study was to investigate the modulation of nitric oxide (NO), Interleukin (IL)-6 and tumor necrosis factor $(TNF)-{\alpha}$ in Raw 264.7 cells treated with ginseng fermented by Penibacillus MBT213. Nitric oxide production in the Raw 264.7 cells treated for 24 hours with fermented ginseng at 3, 7, and 14 days after the treatment decreased to 74, 43, and 36%, respectively, compared with the positive control. The production of IL-6 was inhibited in all the cells treated with fermented ginseng at 3, 7, and 14 days after the treatment except for the positive control. The $TNF-{\alpha}$ production in the Raw 264.7 cells treated with fermented ginseng for 6 hours at 3, 7, and 14 days after the treatment was about 40,000, 85,000 and 65,000 pg/mL, respectively. Moreover, the $TNF-{\alpha}$ production in the Raw 264.7 cells treated with fermented ginseng for 24 hours at 7 and 14 days after the treatment was about 160,000 and 180,000 pg/mL, respectively. However, $TNF-{\alpha}$ production was inhibited in the Raw 264.7 cells at 6 and 12 hours after the treatment with fermented ginseng. herefore, it was confirmed that the immunological activity of the Raw 264.7 macrophages was affected by the treatment with fermented ginseng. It was concluded that ginseng fermented by Paenibacillus MBT213 possesses a potential anti-inflammatory activity and could be used as an ingredient in functional foods and pharmaceutical products.

• 대한본초학회지
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• 제28권3호
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• pp.107-113
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• 2013

Objective : The purpose of this study was to investigate the effect of fermented Artemisiae Argyi Folium(AAF) on some activities of human hepatoma cell, HepG2. Method : To investigate the effect of fermented Artemisiae Argyi Folium(AAF) activity on the human hepatoma cells, AAF extracts was fermented by Lactobacillus pentosus K34(AFL) and Sacchromyces cerevisiae STV89(AFS). And the effects of AFL or AFS on the activities of HepG2 cell, such as cell viability, nitric oxide(NO) production and reactive oxygen species(ROS) production, were tested. Result : Human Hepatoma Cells were incubated each for 3 hours and 24 hours. Human Hepatoma Cells treated with the extract was measured with MTT assay. Then AFL was found to be non-toxic at concentrations of 10 ug/mL(3h), 100 ug/mL(24h) or more. AFS was the same result at concentrations of more than 10 ug/mL. The extract increased ROS generation in Human Hepatoma Cells. AFL increased at concentrations of 100 ug/mL more (3h, also 10 ug/mL more) and 50 ug/mL(24h) and AFS increased both 50 ug/mL. In point of NO generation, AFL inhibited at concentrations of 10 ug/mL(3h) and 100 ug/mL(24h) more (3h, also 10 ug/mL more) and AFS also inhibited 50 ug/mL or more. Conclusion : AFL and AFS, obtained from Artemisiae Argyi Folium extracts by fermentation, reduced the NO production and increased ROS production in HepG2 cell, without cytotoxicity on HepG2 cell. The results suggested that AFL and AFS increased the immunological effects of Artemisiae Argyi Folium extracts.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제15권18호
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• pp.7965-7970
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• 2014

One of the goals of tumor immunotherapy is to generate immune cells with potent anti-tumor activity through in vitro techniques using peripheral blood collected from patients. However, cancer patients generally have poor immunological function. Thus using patient T cells, which have reduced in vitro proliferative capabilities and less tumor cell killing activity to generate lymphokine-activated killer (LAK) cells, fails to achieve optimal clinical efficacy. Interleukin-2 (IL-2) is a potent activating cytokine for both T cells and natural killer cells. Thus, this study aimed to identify optimal donors for allogeneic LAK cell immunotherapy based on single nucleotide polymorphisms (SNP) in the IL-2 and IL-2R genes. IL-2 and IL-2R SNPs were analyzed using HRM-PCR. LAK cells were derived from peripheral blood mononuclear cells by culturing with IL-2. The frequency and tumor-killing activity of LAK cells in each group were analyzed by flow cytometry and tumor cell killing assays, respectively. Regarding polymorphisms at IL-2-330 (rs2069762) T/G, LAK cells from GG donors had significantly greater proliferation, tumor-killing activity, and IFN-${\gamma}$ production than LAK cells from TT donors (P<0.05). Regarding polymorphisms at IL-2R rs2104286 A/G, LAK cell proliferation and tumor cell killing were significantly greater in LAK cells from AA donors than GG donors (P<0.05). These data suggest that either IL-2-330(rs2069762)T/G GG donors or IL-2R rs2104286 A/G AA donors are excellent candidates for allogeneic LAK cell immunotherapy.

• 대한한방내과학회지
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• 제23권1호
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• pp.123-131
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• 2002

Objective : It is well known that modern chemotherapy against cancer has side effects to a living body, especially hemopoietic and immunologial disfunctions. However, there are no effective ways to reduce them. Recently, traditional Korean herb medicine has been reported to have some biological modifying responses. Therefore, we hypothesized that additional application of herb medicine during chemotherapy is more effective to reduce its side effects. While we were studying the effects, we have observed the inhibitory effect of Soamgudamikgitang on formation of side effects derived from Cyclophosphamide, it has been used in clinical practice at Kyung Hee Medical Center. Methods : We injected 200mg/kg of Cyclophosphamide, one time, to an experimental group, consisting of ten mice. We divided them into eight groups: normal, CPX, SAKT 2mg, SAKT 10mg, SAKT 50mg, SAKT 2mg, CPX, SAKT 10mg+CPX, SAKT 50mg+CPX. We injected Soamgudamikgitang seven days, five days, three days, and one day before we injected CPX. One day, three days, and five days after CPX injection, we injected Soamgudamikgitang again and then killed all the mice. The parameters determined in this experiment were daily body weight liver and spleen weight, RBC, WBC, and platelet for hemopoietic dysfunction and AST, ALT for hepatotoxicity, BUN, creatine for renal toxcity, lymphocyte proliferation activity and lymphocyte subsets for immunological toxcity. Results : We have found that Soamgudamikgitang has inhibitory effects on the formation of Cyclophosphamide's side effects. Significant differences between the group, which contained Cyclophosphamide, and the other group, which contains Cyclophosphamide and 2, 10, 50mg of Soamgudamikgitang respectively were observed. Platelets(2mg of Soamgudamikgitang, p<0.05 ;10mg, p<0.01 ;50mg, p<0.001), liver weight(50mg, p<0.01), spleen weight(10mg, p<0.05), AST(all groups, p<0.01), ALT(2mg, p<0.01 ;10mg, p<0.05 ;50mg, p<0.01), BUN(2mg, p<0.01 ;50mg, p<0.05). Although immunological in both lymphocyte proliferation and its subsets were not observed, which shows that Soamgudamikgitang has a strong effect on T cell activities. Conclusions : From the above results, we can expect that the combined therapy of Soamgudamikgitang and Cyclophosphamide is more effective for treating cancer patients.

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제46권2호
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• pp.183-192
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• 2004

급성 기 반응중인 육계에서 사료 중 크릴 밀의 생산성과 SOD 활성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 크릴 밀 A와 B를 이용한 실험 1과 크릴 밀 A를 이용한 확인 실험 2가 실시 되었다. 실험사료는 옥수수 대두박 위주의 기초 사료 와 기초 사료 중 대두박과 2.0%의 크릴 밀 A(수입) 또는 크릴 밀 B(수입)를 대치한 사료이다. 실험 사료를 1 일령 육계 병아리에 급여하여 Salmonella typhymurium lipopolysaccharide (LPS)를 복강 내 주입하여 급성 기 반응을 발생시킨 2 주령 육계의 생산성과 Superoxide dismu- tase(SOD) 활성에 미치는 영향을 Saline을 주입한 대조와 비교하였다. 증체량, 사료 섭취량 및 사료효율은 크릴 밀 A와 크릴 밀 B 사료를 급여한 육계사이에 차이가 있었다. 크릴 밀 사료를 급여한 육계에서 급성기 반응은 간장과 비장 무계를 높였다. 그리고 급성기 반응은 크릴 밀 사료를 급여한 육계 병아리의 간장과 적혈구 세포액의 MnSOD와 Cu/ZnSOD 활성을 높였다. PHA-p 반응에 미치는 크릴 밀 사료의 영향은 없었다. 크릴 밀 B는 면역반응 후 회복중인 육계의 생산성을 향상시켰으나 크릴 밀 A에서는 이러한 영향이 없었다. 이상과 같이 크릴 밀의 종류에 따라 급성기반응시 와 회복시의 생산성은 SOD 활성의 변화로부터 산화 스트레스의 영향을 받고 있다는 것을 시사하고 있다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제21권4호
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• pp.353-366
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• 1992

본 연구는 참치의 석유 에텔 추출물로 부터 항암 효과가 있는 활성 성분을 분리 정제하고, 흰생쥐의 임파모 세포인 LI210 과 P388, 인체 장암세포인 HCT-48, HT-29 및 HRT-18를 대상으로 단계별로 얻어지는 성분의 항암 활성올 측정하고, 그 물질의 생체내에서의 작용 기전을 밝히기 위해 여러가지 면역학적 실험을 수행하였다. In vitro배양액에서의 인체 결장암세포인 H HCT-48에 대해, crude extract는 배양액 1ml강 $60\mu\textrm{g}$ 첨가시 증식이 2배로 억제되었으며(1 unit), 이를 column chromatography 수행하여 얻은 fraction D의 1 unit은 $2 22\mu\textrm{g}$이며, 다시 TLC를 하여 얻은 Spot I 의 1 unit은 $9\mu\textrm{g}$으로서 정제 했을때 277배 증가하였다. Spot I 은 GC/ M5에 의해 7가지 성분이 섞여있는 혼합물로서 이 중 4가지 생분은 $C_{14:0},\;C_{16:0},\;C_{17:1},\;및\;C_{18:0}$인 지방산으로 확인이 되었으며, 나머지 3가지는 지방 성분으로 분자식은 확인되지 않았다. 다른 인체 장암 세포인 HT-29과 HRT-18에 대한 crude extract의 1 unit은 $64\mu\textrm{g}\;및\;54\mu\textrm{g}$이었으며 frattion D의 1 unit에 해당하는 양은 두 세포 모두 약 $34\mu\textrm{g}$이었다. 또한, 생쥐의 백혈병 성 임파모 세포인 L1210과 P388의 경우 crude extract의 1 unit에 해당하는 양은 $2-2.5\mu\textrm{g}$이며, fraction D의 경우는 $1.2-1.4\mu\textrm{g}$으로서 참치 추출물의 세포 종식 억제력은 백혈병성 임파모세포에서 인체 장암세포보다 높았으며, 암세포의 종류에 따라 효과의 차이가 있었다. 참치 추출물(fraction D)을 첨가한 배양액에서 배양한 HCT-48 세포획 크기 분포도는 배양시간이 경과함에 따라 세포의 크기가 작아지며, 현미경 사진에서 보면 본래의 형태가 위축되거나, 세포의 주위가 흐트러지면서 사면 현상을 보였다. 참치 석유 에텔 추출물에는 DHA가 18.8%를 차지 하며 EPA는, 3.25% 포함되어 있었다. 대조군 생쥐에 비해 S-180을 접종한 후 참지 추출물을 투여한 생쥐에서 용혈반 형성 세포수와 혈청 단백질 중 immunoglobulin의 relative %가 현저히 증가되었다. 그러나 비장의 자연 살해 세포의 활성에는 변화를주지 않았다. 이상의 결과로 보아, 참치의 석유 에델 추출물중에 in vitro에서 인체 장암세포 및 백혈병성 임파모세포의 증식 억제 및 생체내에서 면역 증강 효과를 나타내는 성분이 존재함을 알 수 있다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제45권2호
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• pp.174-180
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• 2016

본 연구에서는 산양유 발효유(F-GM)의 급여가 면역 활성과 체력증진에 미치는 영향을 조사하였다. F-GM을 경구 투여한 마우스의 비장세포는 림프구 유사분열 촉진인자인 ConA와 LPS에 대한 증식반응의 상승을 나타내었다. ConA를 처리한 비장세포로부터 분비되는 cytokine을 ELISA법에 의해 정량한 결과 F-GM 투여에 의해 IL-2와 IFN-${\gamma}$의 생성은 유의하게 증가하였으나, IL-4 및 IL-10의 생성은 별다른 변화를 보이지 않았다. 또한 RT-PCR을 이용한 이들 cytokine mRNA의 정량실험에서도 F-GM 투여로 IL-2와 IFN-${\gamma}$의 mRNA가 증가하는 것을 확인하였다. 한편 KLH(20 mg/mouse)를 정상 대조군 마우스 혹은 F-GM을 급이한 마우스에 각각 면역하고 5주째에 KLH에 대한 항체가를 측정한 결과 F-GM을 급이한 마우스에서 항체가가 유의하게 상승하는 것으로 나타났다. KLH에 대한 항체의 isotype을 조사한 실험에서는 KLH에 대한 IgG1, IgG2a 그리고 IgM 특이항체의 상승이 관찰되었다. F-GM 경구 투여가 세포성 면역에 미치는 영향을 측정하기 위하여 면역개시 7주째의 마우스를 이용하여 KLH에 대한 지연형 과민반응(DTH)을 측정하였다. 그 결과 F-GM을 경구 투여한 마우스에서 DTH의 유의한 상승효과가 확인되었다. 한편 수영시험을 통해 F-GM의 경구 투여가 체력증강에 미치는 영향을 측정한 결과 F-GM을 투여한 마우스에서 매우 유의한 수영시간의 연장 효과가 관찰되었다. 이들 결과로부터 F-GM은 면역세포의 활성화를 통한 면역력 강화는 물론 체력을 증가시키는 생리활성을 갖는 것으로 확인되었다.

• 동의생리병리학회지
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• 제16권4호
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• pp.801-809
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• 2002

CSBHT is known to improve immunological response in mice and humans. In this study, CSBHT effect was examined in the context of CD4+ T cells' survival and TCR/CD3 induced activation responses. Spleen cells from 8 week BALB/c mice were cultured in CSBHT containing medium without activation for 24, 48 hr. The MTS assay and revealed that CSBHT did not stimulate spleen lymphocytes as mitogen. Spleen lymphocytes were treated with anti-CD3e/anti-CD28 antibodies for 48hr. Flow cytometry revealed that activity of T cell decreased with CSBHT concentration. CD4+ T cells were isolated and cultured ,in CSBHT containing medium for 48 hr. CSBHT did not affect survival of sorted CD4+ T cells without any involvement of APC. In order to evaluate the direct effect of CSBHT on helper T cells's proliferative capacity prior to activation, CD4+ T cells are isolated after 24hr of culture in CSBHT containing medium and activated with and without anti-CD3e/anti-CD28 activation for 48hr. A higher level of CD69 was observed in 1 ㎍/㎖ of CSBHT treatment than control using flow cytometry. But low CD69 expression was observed in 5㎍/㎖ of CSBHT treatment. Expression of mRNA for cytokines in CD4+ T cell revealed that IL-2 expression was increased in 1 ㎍/㎖. The expression of IL-2R α, INF- γ were increased with concentration. On the other hand mRNA of IL-4 was decreased in dose dependent manner. Results suggest that CSBHT may be desirable for CD4+ T cell's activity in immune responses. Further more, CSBHT may relatively activate Th1 and inactivate Th2.

• 대한화장품학회지
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• 제40권1호
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• pp.29-36
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• 2014

철피석곡은 중국에서 전통의약식물로 잘 알려진 난과 식물 중 하나이다. 본 연구에서는 생물반응장치를 이용하여 조직 배양된 철피석곡에 대하여 화장품 성분으로써 응용 가치를 평가하였다. 이미 몇몇 보고된 논문에서 철피석곡은 항암, 상처 치유 그리고 면역기능증진 등의 약리학적 활성에 대한 연구가 진행되었다. 본 연구에서는 생물반응장치를 이용하여 조직 배양된 철피석곡의 원괴체상구체 및 다신초에 대하여 화장품 성분으로서 효능, 효과를 자연에서 자란 철피석곡과 비교 평가하였다. 항산화 활성 비교 실험 결과 철피석곡의 원괴체상구체는 조직배양된 다신초 및 철피석곡 지하부 및 지상부보다 항산화 효과가 우수하였다. 조직배양된 원괴체상구체의 총 페놀 및 총 플라보노이드 성분 또한 다른 다신초나 자연에서 자란 철피석곡 추출물보다 함유량이 높음을 알 수 있었다. 다른 한편으로는 피부 미백과 관련한 효과를 비교 조사한 결과, 조직 배양된 다신초가 자연에서 자란 철피석곡 지상부, 지하부 및 조직 배양된 원괴체상구체보다 타이로 시네이즈 활성 억제 및 멜라닌 생성 억제 효과가 우수하였다. 이러한 결과들은 피부개선을 위한 화장품 성분으로서 조직배양체의 부분별 응용 가능성을 제공할 수 있을 것으로 사료된다.