• 제목/요약/키워드: hybridoma cell

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T 세포 하이브리도마에 의한 ${\alpha}2-Macroglobulin$의 생산 (Production of ${\alpha}2-Macroglobulin$ by a T Cell Hybridoma)

  • 이종길;한성순
    • 약학회지
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    • 제38권6호
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    • pp.715-720
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    • 1994
  • ${\alpha}2-macroglobulin$ $({\alpha}2-M)$ has been shown to have a variety of activities. One of those activities is the suppression of immune response. Characterization of the immunosuppressive factor secreted by a T cell hybridoma showed that ${\alpha}2-M$ was produced and secreted from the T cell hybridoma. ${\alpha}2-M$ was produced abundantly from the T cell hybridoma when cultured as ascites. The isolation and identification of the ${\alpha}2-M$ were studied using affinity chromatography and N-terminal amino acid sequencing. The extended observations were that the ${\alpha}2-M$ produced by the T cell hybridoma suppresses mixed lymphocyte reaction.

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폐디스토마에 대한 Mmonoclonal Antibody생산 세포주개발에 대한 연구 (Characterization of Mouse Hybridoma Producing Monoclonal Antibody Paragonimus westermani)

  • 고광삼;이숙영;이근배
    • 미생물학회지
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    • 제23권1호
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    • pp.64-68
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    • 1985
  • 페디스토마 성충의 단백질을 정제하여 이를 항원으로 면역시킨 mouse의 spleen cell과 myeloma cell을 세포융합 시킨 결과 융합율은 56% 이었고. 3차 cloning한 후의 항체생산율은 89% 이였으며, 이들 융합세포로 부터 IgM을 생산하는 hybridoma clone과 IgG을 생산하는 hybridoma clone을 얻었다. IgM을 생산하는 hybridoma clone의 supernate는 antibody titer가 희석농도 1 : 64까지 양성이었고. IgG을 생산하는 hybridoma clone의 supernate는 1 : 256까지 양성이었다.

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Kinetic Analysis of the Effect of Cell Density on Hybridoma Cell Growth in Batch Culture

  • Lee, Eun-Yeol
    • Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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    • 제7권2호
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    • pp.117-120
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    • 2002
  • The effect of cell density on cell growth was investigated in a suspension batch culture of hybridoma cells. The specific growth rate was found to increase with increasing initial cell density and then to decrease with further increases in initial cell density. In order to quantitatively describe the dependence of specific growth rate on cell density, a kinetic model is proposed, which satisfactorily represents the experimental data.

하이브리도마 세포배양에서 암모늄 이온의 영향 및 고정화 흡착제에 의한 암모늄 이온의 동시제거 (Ammonium Ion Effects and Its In Situ Removal by Using Immobilized Adsorbent in Hybridoma Cell Culture)

  • 정연호;이해익
    • KSBB Journal
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    • 제11권3호
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    • pp.329-339
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    • 1996
  • The effects of ammonium ion on cell growth kinetics, monoclonal antibody productivity, and cell metabolism of hybridoma cells were investigated. The mouse-mouse hybridoma cell line VlIIH-8 producing mouse IgG2a was used as a model system. Ammonium ion showed an inhibitory effect on cell growth and monoclonal antibody production. New immobilized adsorbents were developed for the reduction of the inhibitory effect of ammonium ion. The ammonium ion selective zeolite, Phillipsite-Gismondine was entrapped in calcium alginate bead or in dialysis membrane and applied to the hybridoma cell culture system for the in situ removal of ammonium ion from culture media. The effects of ammonium the both serum supplemented and serum free media on the cell growth were studied by applying immobilized adsorbents of calcium alginate bead type. The results demonstrated a substantial enhancement in cell growth. Applying immobilized adsorbents of dialysis membrane type to serum supplemented media also resulted in the stimulation of cell growth, cell viability and monoclonal antibody production.

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Monoclonal antibody의 대량 생산을 위한 hybridoma cell의 생존능 증가에 관한 연구

  • 하성진;임선하;이종원;조무환
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2003년도 생물공학의 동향(XII)
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    • pp.561-562
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    • 2003
  • Monoclonal antibody를 대량으로 생산하기 위한 hybridoma cell의 생존능 개선을 위한 실험에서 각각의 항생제에 대해서 G418은 10ug/ml(figure 1), ciprofloxacin 은 lug/ml 또는10ug/ml 그리고 minocycline은 1ug/ml정도에서 가장 효과가 높아보였다. 다양한 산소 농도에서 실험과 각각 항생제의 monoclonal antibody 생산에 미치는 영향을 실험하여서monoclonal antibody를 가장 경제적으로 대 량 생산할 수 있는 조건을 찾을 수 있을 것으로 사료된다.

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Fractionated Aged Black Garlic Extracts Enhance Growth of Anti-My-10 Hybridoma Cells and Production of IgG1 Antibody

  • Lee, Ji Young;Chung, Namhyun;Lee, Yong Kwon
    • Journal of Applied Biological Chemistry
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    • 제57권1호
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    • pp.61-63
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    • 2014
  • Aged black garlic (ABG) was extracted with 20% ethanol and water (crude extracts) and fractionated into three categories (>10, 3-10, and <3 kDa). The effect of crude extract supplements on anti-My-10 hybridoma cell growth and IgG1 antibody production was investigated in suspension culture with a chemically defined protein-free medium. We observed that supplementation of ABG to the cell culture medium stimulated anti-My-10 hybridoma cell growth and production of IgG1 antibody, particularly with fractionated ABG of low molecular weight. The stimulation depended upon the concentration and the size of the fractionated ABG. We also found that the growth-promoting activity was not correlated with high antibody production. These results suggest that fractionated ABG is a novel and promising alternative as an animal cell culture supplement.

소나무재선충[Bursaphelenchus xylophilus (Steiner and Buhrer) Nickle]의 GaLectin에 대한 특이적인 단클론 항체 제작과 진단에의 활용 (Development of Monoclonal Antibodies Specific to Galectin of Pine Wood Nematode, Bursaphelenchus xylophilus (Steiner and Buhrer) Nickle and Their Utilization for Detection of Pine Wood Nematodes)

  • 김아영;김영하;최보혜;트랑뉴겐;윤경재;이시혁;한혜림;고영호
    • 한국응용곤충학회지
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    • 제57권1호
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    • pp.7-13
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    • 2018
  • 소나무재선충(pine wood nematode, PWN) 감염 소나무를 현장에서 신속하게 진단을 할 수 있는 방법은 현재 없다. 본 연구에서는 PWN특이적인 항원으로 알려진 PWN-GaLectin을 baculovirus발현체계로 발현시켜서 총 1,464개의 fusion hybridoma 세포 주 라이브러리를 제작 하는 항원으로 이용하였다. 총 1,464개의 fusion hybridoma 세포 주 중, PWN-GaLectin에 대한 높은 반응을 보이는 62개의 fusion hybridoma 세포 주를 선별했다. 이들 중, 표준 PWN 감염소나무 PBS추출물과 PWN 단백질 추출물에 강한 반응을 보이는 세포 주 12개를 선별하여 단클론 항체(monoclonal antibody, Mab) 분비세포 주 확립을 위한 limited dilution을 실시하였다. Mab분비세포 주 확립을 위해서 표준 PWN 감염소나무 추출물에 대한 반응이 표준 정상 소나무 추출물 보다 높은 세포 주들을 선별했다. 그리고 추가로 PWN 단백질 추출물에 대해서 3종의 비 병원성 선충 단백질 추출물 보다 높은 반응을 보이는 세포 주들도 선별, 확립했다. 본 연구에서 확립된 Mab들을 우리는 현장과 실험실에서 사용할 수 있는 신속진단키트의 개발에 이용할 수 있을 것이다.

Function of Nitric Oxide in Activation-Induced Cell Death of T Lymphocytes

  • Park, Yuk-Pheel;Paik, Sang-Gi;Kim, Young-Sang
    • Animal cells and systems
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    • 제4권4호
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    • pp.381-388
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    • 2000
  • Using a murine T cell hybridoma, activation-induced cell death (AICD) was studied. As an in vitro model system for the AICD, 1 cell hybridoma expressing TCR/CD3 complex was incubated onto the immobilized purified anti-CD3 antibody. The immobilized anti-CD3 antibody induced AICD effectively up to 40%. At 1-100 $\mu$M range of SNP, an exogenous source of nitric oxide (NO), the cell proliferation was not affected, but at 1 mM SNP, cell proliferation was significantly reduced. The AICD of T cell hybridoma was inhibited by exogenous NO at non-cytotoxic concentration, In the cells undergoing AICD, the expressions of caspase-3 and FasL were detected, but not iNOS. Similar result was recognized in the apoptosis induced by dexamethasone, an apoptosis-inducing agent. However, the conversion from the inactive form of caspase-3 (32 kDa) to the active form (17 kDa) was significantly reduced in the cells in AICD induced by anti-CD3 antibody, With the result of increased PARP cleavage in the cells, we propose that another PARP cleavage pathway not involving caspase-3 may function in the anti-CD3 antibody induced AICD in the T cell hybridoma.

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Hybridoma 세포의 세포성장, 항체생산 및 세포대사에 미치는 Glucose의 영향 (Glucose Effects on Cell Growth, Antibody Production, and Cell Metabolism of Hybridoma Cells)

  • 정연호
    • KSBB Journal
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    • 제10권3호
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    • pp.323-334
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    • 1995
  • Hybridoma 세포의 세포 성장 속도, monoclo nal antibody의 생산성 및 세포 대사에 미치는 glucose의 영향이 조사되었다. IgG2,를 생산하는 m mouse-mouse hybridona VIII H-8 세포가 모델로 이용되었다. Glucose 농도에 따른 바성장속도의 변화는 기질저해형식 (substrate inhibition type) 의 성장모델로 나타낼 수 있었다. 초기 glucose 농도 4g/f까지는 최대 세포밀도의 증가를 보여 주었다. Glucose는 세포사망속도에 큰 영향을 나타내었고 glucose 농도와 비사망속도 간에는 반비례의 관계가 성립됨을 보였다. Glucose 농도가 증가될수록 세포의 생존율과 monoclonal an tibody의 생산이 증가되었다. Glucose 놓도가 증가될수록 glucose의 비소비속도가 증가되 었고, 초기 glucose 농도의 증가는 lactate의 총괄 비 생산속도의 증대를 가져왔다. 암모늄 이온의 총괄비 생산속도는 초기 Glucose의 농도에 의존하 였지만 암모늄 이온의 전반적인 생성속도는 초기 glucose 농도에 거 의 무관함을 보여 주었다.

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웅담이 mammalian세포의 생육에 미치는 영향 (Effect of bear's gall on mammalian cell growth)

  • 주현규;김연욱;박동기
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제34권3호
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    • pp.231-234
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    • 1991
  • 동물세포에 미치는 웅담의 영향을 조사하기 위해서 원숭이 kidney cell 유래의 COS-7 cell과 hybridoma cell(murine myeloma cell과 rat의 spleen cell을 융합)을 가지고 이들 세포의 생육과 단백질 발현기작에 미치는 영향을 조사했다. COS-7 cell과 hybridoma cell을 웅담이 첨가된 10% FCS DMEM complete medium에서 78시간 배양한 결과 COS-7 cell에는 거의 영향을 미치지 않았으나 myeloma cell과 spleen cell과의 융합세포는 48시간내에 거의 모든 세포가 사멸됐다. 또한 cDNA를 COS-7 cell에 transfection에서 발현되는 단백질양을 조사한바 웅담이 첨가된 배지에서의 단백질 생산량이 첨가되지 않은 배지에서 보다 $30{\sim}40%$ 감소되었다.

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