본 연구의 목적은 발광 다이오드 (LED)을 인간 피부 각질 세포에 조사 시 콜라겐, 프로 콜라겐의 증식 발현을 조사하기 위해 실시되었었다. LED 조사 시 안전하게 인간의 피부에 적용할 수 있는지 여부를 결정하기 위해, LED 조사의 증식 효과는 인간 표피 각질세포에서 MTS 분석으로 결정하였다. 470nm의 파장 조사는 세포 독성 없이 mRNA의 콜라겐의 발현, 프로 콜라겐을 증가시켰으며, 이 결과는 470nm LED 조사가 피부각질세포 증식 효과와 콜라겐 합성에 영향을 미칠 수 있음을 시사한다. 또한 LED 조사시 독성 효과는 인간 피부 섬유 아세포 (HDF)에서 MTS 분석으로 결정 한 결과 세포 증식에 독성을 나타내지 않았다. 470nm LED 조사시 시험 관내 콜라겐 합성 활동을 증가시킴으로 피부미용 및 융복합적인 부분에 활용할 수 있는 기초 자료로 활용이 가능하다고 사료된다.
Collagen, which accounts for one-third of human protein, is reduced due to human aging, and much attention is focused on making collagen into food to prevent such aging. Gel permeation chromatography with Reflective Index (RI) detection (GPC/RI) was chosen as the most suitable instrument to confirm molecular weight distribution, and we explored the use of this technique for analysis of collagen peptide molecular sizes and distributions. Data reliability was verified by matrix-assisted laser desorption/ionization coupled to time-of-flight (MALDI-TOF) mass spectrometric analysis. The data were considered meaningful for comparative analysis of molecular weight distribution patterns.
An experimental study was performed for the preparation of living skin-equivalent by the using collagen gel contraction with human fibroblasts as neodermls and cultured human keratinocytes as neoderm is . The results were as follows ; 1) The rate of collagen gel contraction was dependent on the number of fibroblasts into the lattice and collagen contraction was progressed according to the increment of the number of the cells. 2) The rate of collagen gel contraction was progressed according to the decrement of the contraction of the collagen. 3) The rate of gel contraction was progressed according to the increment of serum concentration in the fixed concentration of the fibroblasts and collagen. 4) The lattice contraction was decreased according to the increment of the population doublings of the fibroblasts. 5) Macroscopically, the artificial dermis was gray white in color and tissue-like consistency and elas- ticity. 6) Microscopically, three dimensionally contracted artificial dermis showed more dense fibroblasts and its newly formed collagen fibrils in the matrix than one dimensionally contracted one. 7) Finally prepared skin-equivalent showed good attachment of living stratified keratinocytes to the dermal equivalent microscopically. It has been proposed that newly formed skin-equivalent is suitable for the graft of extensively and deeply burned patients. Shortening of the manufacturing period of skin-equivalent and development of conservation technique as a readily usable state are to be solved for our ongoing works.
Retinoids are essential regulators of spithelial cell growth and celluar differentiation. They are also known to be effective in photoaging. It was reported that topical application of retinoic acid improves facial wrinkle carsed by collagen synthesis reduction in photodamaged skin. Collagen synthesis by retinoic acid may contribute to the wrinkle effacement. Since celluar retinoic acid binding protein II is slsctively induced in human skin and dermal fibroblasts in vitro by retinoic acid, this response can be used to mesure retinoids potency and activity. In order to know the activity of retinoids and their relations with collagen synthesis, we treated dermal fibroblasts with retinoids for 48 hours at 10-6-10-7M and measured CRABPII mRNA level by quantitative Nortern blotting. We also measured the rate of collagen systhesis by retinoids using 3-dimensional dermal equivalent. CRABPII mRNA level was increased 3-fold by retinoic acid, 2.1-fold by retinol and 1.4-fold by retinaldehyde. Collagen systhesis was increased 34% by all-trans retinioc acid, 26% by retinol, 17% by retinaldehyde and 7% by retinyl palmitate. From the above results, retinoids were found to be a potent indecers of CRABPII mRNA and collagen synthesis. Though retinoic acid was the most effective, its use has been restricted because of the side effects. Instead, retinol can be a best candidate in cosmetics for the treatment of photodamaged skin in terms of efficacy and safety.
Collagen-induced arthritis (CIA) is a model for some types of human autoimmune rheumatoid arthritis (RA). In this study, we examined whether ethanol extract of potato (Solanum tuberosum) is efficacious against CIA in mice. Potato extracts (100 and 200 mg/kg) were orally administered to DBA/1J mice once daily for 49 day after initial immunization with type II collagen. Clinical assessment of disease and measurement of paw edema were conducted throughout the study. The production of CIA-related rheumatoid factor, anti-type II collagen antibody, and cytokines were examined in DBA/1J mice. Serum levels of AST, ALT, creatinine, and lipids were measured, and antioxidant enzyme activity in the spleen was also determined. The arthritis score and paw edema were markedly suppressed in the groups treated with potato extract. Levels of rheumatoid factor, anti-type II collagen antibody, interleukin (IL)-1, IL-6, LDL-cholesterol, and malondialdehyde in sera were also reduced by potato extract treatment. The activities of glutathione peroxidase and glutathione reductase were increased in the spleens of CIA mice treated with potato extract. These findings suggest that potato extract has suppressive effects on type II collagen-induced arthritis, an animal model for human RA.
To understand the cause of the high light transmittance of the human eye, the optical effects of the collagen fibers of the stroma layer, which constitute the majority of the cornea, were analyzed. These collagen fibers, approximately 20 nm in diameter, have a regular arrangement. Accordingly, the optical properties of the collagen fibers and the fiber layer were analyzed by simulation. A standing wave was formed in the incident space by the overlapping incident light and the light reflected by the plate. In addition, it was confirmed that when the collagen fibers are arranged in a layer, the light transmittance periodically changes, depending on the number of fiber layers. The standing wave was formed in the incident space, and the light's intensity distribution was changed by the nanoscale collagen fibers in the section with the collagen layer, which affected the transmittance. To explain this phenomenon, the collagen fiber was defined as a second light source, and an attempt was made to describe the simulation results in terms of overlap of the incident light with the light emitted from the collagen fiber.
Kim, Dong-Gyun;Kim, Eun-Young;Kim, Yu-Ri;Kong, In-Soo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제25권1호
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pp.119-126
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2015
Among the various human growth factors, epidermal growth factor (hEGF, consisting of 53 amino acids) has various effects on cell regeneration, stimulation of proliferation, migration of keratinocytes, formation of granulation tissues, and stimulation of fibroblast motility, which are important for wound healing. Owing to their multiple activities, EGFs are used as pharmaceutical and cosmetic agents. However, their low productivity, limited target specificity, and short half-life inhibit their application as therapeutic agents. To overcome these obstacles, we fused the collagen-binding domain (CBD) of Vibrio mimicus metalloprotease to EGF protein. About 18 or 12 amino acids (aa) (of the 33 total amino acids), which were essential for collagen-binding activity, were combined with the N- and C-termini of EGF. We constructed, expressed, and purified EGF (53 aa)-CBD (18 aa), EGF (53 aa)-CBD (12 aa), CBD (18 aa)-EGF (53 aa), and CBD (12 aa)-EGF (53 aa). These purified recombinant proteins increased the numbers of cells in treated specimens compared with non-treated specimens and control hEGF samples. The collagen-binding activities were also evaluated. Furthermore, CBD-hybridized hEGF induced phosphorylation of the EGF receptor. These results suggested that these fusion proteins could be applicable as small therapeutic agents in wound tissue healing.
The purpose of this study was to regenerate human dental pulp tissues similar to native pulp tissues. Using the mixture of type I collagen solution, primary cells collected from the different tissues (pulp, gingiva, and skin) and NIH 3T3 ($1{\;}{\times}{\;}10^5{\;}cells/ml/well$) were cultured at 12-well plate at $37^{\circ}C$ for 14 days. Standardized photographs were taken with digital camera during 14 days and the diameter of the contracted collagen gel matrix was measured and statistically analyzed with student t-test. As one of the pulp tissue engineering, normal human dental pulp tissue and collagen gel matrix cultured with dental pulp cells for 14 days were fixed and stained with Hematoxyline & Eosin. According to this study, the results were as follows: 1. The contraction of collagen gel matrix cultured with pulp cells for 14 days was significantly higher than other fibroblasts (gingiva, skin) (p < 0.05), 2. The diameter of collagen gel matrix cultured with pulp cells was reduced to 70.4% after 7 days, and 57.1% after 14 days. 3. The collagen gel without any cells did not contract, whereas the collagen gel cultured with gingiva and skin showed mild contraction after 14 days (88.1% and 87.6% respectively). 4. The contraction of the collagen gel cultured with NIH 3T3 cells after 14 days was higher than those cultured with gingival and skin fibroblasts, but it was not statistically significant (72.1%, p > 0.05). 5. The collagen gel matrix cultured with pulp cells for 14 days showed similar shape with native pulp tissue without blood vessels. This approach may provide a means of engineering a variety of other oral tissue as well and these cell behaviors may provide information needed to establish pulp tissue engineering protocols.
Objective : Skin aging is commonly observed in patients with diabetes mellitus, which can be accessed by the amount of skin collagen and matrix metalloproteinase-1 (MMP-1). In the present study, anti-skin-aging effects of Root Cortex of Paeonia Suffruticosa Andrews (PSA), which has been widely used to treat diabetes mellitus, are investigated. Methods : Streptozotocin (STZ) was intraperitoneally injected to rats to induce diabetes. Body weights, feed intake, organ weights, blood glucose, and other biochemical index are determined in both normal and diabetic rats. In order to study the effect of PSA on skin aging, the amount of skin collagen was measured in diabetic rats after PSA treatments. Also, MMP-1 synthesis in UVB-irradiated human skin fibroblasts was investigated. Results : 1. When PSA was administered to STZ-induced diabetic rats, feed intake was significantly increased and blood glucose and total cholesterol were decreased in a dose-dependent manner. However, there are no differences in individual organ weights, GOT, and GPT. 2. A decrease of skin collagen in diabetic rats was significantly suppressed when PSA was treated. 3. PSA also inhibited MMP-1 synthesis in UVB-irradiated normal human skin fibroblasts, similar to retinoid, a well-known effective anti-skin-aging substance. Conclusion: PSA suppressed a collagen decrease in diabetic rats and inhibited MMP-1 synthesis in UVB-irradiated human skin fibroblasts. Therefore, the treatment of PSA is very effective to slow down the skin aging process.
In vitro inhibitory effect of aspalatone ((3-(2-methyl-4-pyronyl)]-2-acetyloxybenzoate) on collagen-, ADP-, and epinephrine-induced platelet aggregation in human platelet rich plasma (PRP) was compared with the effects of reference drugs (acetylsalicylic acid, cilostazol and ticlopidine). Aspalatone inhibited time and dose dependently human platelet aggregation induced by collagen; relative potency was in the order of cilostazol>acetylsalicylic acid>aspalatone>ticlopidine. Aspalatone, like acetylsalicylic acid, potently inhibited only the secondary phase of ADP-and epinephrine-induced aggregation. Thromboxane $B^2$ production evoked by collagen in human PRP was inhibited significantly and concentration-dependently by aspalatone and acetylsalicylic acid. These results were in agreement with the earlier studies in which the antiplatelet action of aspalatone was indicated to be due to the inhibition of platelet cyclooxygenase activity (Han et al., Arzneim. Forsch./Drug Res. 44(II), 1122, 1994; Suh and Han, Yakhak Hoeji 39, 565, 1995). In addition, the inhibitory activity of aspalatone on the platelet aggregation appears to be inversely related to the rate of nonspecific deacetylation of the drug in plasma.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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