Objectives The purpose of this study is to evaluate the bone healing effect of Dohongsamul-tang (Taohongsiwu-tang; DH) on femur fractured mice. Methods Mice were randomly divided into 4 groups (naive, control, positive control and DH). All groups except naive group were subjected to bone fracture on both hind limb femurs. Naive group received no treatment at all. Control group was fed with normal saline, and positive control group was orally medicated with tramadol. DH-treated group was orally medicated with DH. We analysed the levels of BMP2, COX2, Col2a1, Sox9, Runx2, and Osterix genes on 3, 7 and 14 days after fracture. Alkaline phosphatase, aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, blood urea nitrogen, creatinine, total cholesterol, and triglyceride levels were measured for safety assessment. Results In morphological, histological analysis, callus formation process of DH-treated group was faster than the control group. BMP2, Sox9 gene expression were significantly increased at 7 days after fracture compared to the control group. COX2, Col2a1 gene expression were significantly increased at 14 days after fracture compared to the control group. Total cholesterol was significantly increased by DH at 3 days. Triglyceride was significantly decreased by DH at 3, 7 days after fracture compared to the control group. Conclusions Dohongsamul-tang promoted bone healing process after fracture by stimulating the bone regeneration factors. And DH shows no hepatotoxicity, nephrotoxicity and serum lipid abnormality. In conclusion, it seems that DH helps to promote fracture regeneration after bone fracture by regulating gene expressions related to bone repair.
Cho, Hee-Yeon;Baik, Young-Ae;Jeon, Suyeon;Kwak, Yoon-Hae;Kweon, Hae Yong;Jo, You Young;Lee, Kwang Gill;Park, Young Hwan;Kang, Dongchul
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.27
no.2
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pp.303-311
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2013
In this study, we compared the efficiency of osteoblast differentiation media (ODM) containing three distinct reagent combinations in osteoblastic differentiation of human bone marrow-derived mesenchymal stem cells (hBMSCs) in monolayer culture. In addition, we analyzed growth and differentiation of hBMSCs on silk scaffolds and examined the bone-forming activity of a nanofibrous silk scaffold in a tibia diaphysis defect model of a rat hind limb with intramedullary nailing. Although all three ODM increased alkaline phosphatase activity to a comparable extent, the ODM containing bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) was found to be significantly less effective in promoting mineral deposition than the others. Growth of hBMSCs on sponge-form silk scaffolds was faster than on nanofibrous ones, while osteoblastic differentiation was apparent in the cells grown on either type of scaffold. By contrast, bone formation was observed only at the edge of the nanofibrous scaffold implanted in the tibia diaphysis defect, suggesting that use of the silk scaffold alone is not sufficient for the reconstitution of the long bone defect. Since silk scaffolds can support cell growth and differentiation in vitro, loading MSCs on scaffolds might be necessary to improve the bone-forming activity of the scaffold in the long bone defect model.
Kim, Jong-Yeop;Choi, Il-Hwan;Hong, Yo-Han;Lim, Sabina
Korean Journal of Acupuncture
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v.27
no.3
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pp.97-108
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2010
Background : The location of acupoints on rat, which may differ from that of human body due to anatomical structure, is defined variously among researchers, which may cause the problem of low repeatability and objectivity. Design : The measurement of hind limb consist of measuring the distance between knee joint and tibia tubercle in order to set the knee joint as common criteria. Based on it, the three mostly referred location of ST36 were represented with the knee joint as a datum point and compared. The electroacupuncture stimulation was administrated after the abdominal pain was induced by acetic acid. And the analgesic activity of each ST36 acupoint was evaluated by measuring the number of writhing reflex, in order to observe the differences of treatment effect in accordance with the location of ST36 acupoints. Results : The result of measurement confirmed the differences in the acupoint location of ST36 among researchers. The writhing reflex test using the acetic acid-induced abdominal pain stimulated with electroacupuncture of 100Hz showed that there were statistically significant differences in the analgesic effect between control group and three ST36 groups (P<0.05). However there were no differences observed among three mostly referred location of ST36 acupoints (P>0.05). Conclusions : We recommend "the point located 6.5 mm below the knee joint at the anterior tibial muscle" as a standard ST36 acupoint location qualified by the WHO Standard Acupuncture Point Locations in 2008.
An encephalomyocarditis virus (EMCV-CBNU) was isolated from an aborted swine fetus in October 2005. To investigate the genetic origin and virulence of the EMCV-CBNU strain, we determined the complete sequence of the virus and tested its virulence in mice. Genetic characterization revealed that the RNA genome was composed of 7,713 nucleotides with a single open reading frame (2,292 amino acids), coding 12 proteins. The EMCV-CBNU had the shortest poly(C) tract, consisting of 10 C's ($C_{10}$), compared with all the other EMCV strains reported in GenBank. Amino acid and phylogenetic analyses showed that EMCV-CBNU had the highest genetic identity with strain 2887A (99.7%), which was originally isolated from a fetus in a pig breeding farm that had a history of reproductive failure. Because rodents are the natural host of EMCV, we investigated the virulence of EMCV-CBNU in mice. Surprisingly, all mice inoculated with more than $1{\times}10^2\;TCID_{50}/0.1ml$ of EMCV-CBNU showed symptoms of hind limb paralysis and eventually died during 3 and 8 days postinoculation (DPI). Furthermore, when we inoculated the virus into pregnant mice, all dams and their fetuses died in 6 DPI. This is the first report on a full genomic analysis of swine EMCV in Korea, which exhibits high virulence in mice.
Kim, Joo-Ho;Lee, Jong-Il;Lee, Hae-Beom;Heo, Su-Young;So, Kyoung-Min;Ko, Jae-Jin;Chon, Seung-Ki;Lee, Cheol-Ho;Kim, Nam-Soo
Journal of Veterinary Clinics
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v.24
no.2
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pp.280-283
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2007
A 6-year-old male dog was referred to Animal Medical Center, Chonbuk National University with large distal extremity abrasion wound to the hind limb by automobile accident. The wound was reconstructed with an autogenous, full-thickness skin mesh graft. The graft was harvested from the ventrolateral abdominal wall and transplanted to the wound. The skin mesh graft survived successfully without any noticeable complications. Successful grafting requires asepsis, an adequately prepared recipient bed through the surgical debridement and lavage, proper harvesting and preparation of the graft. Full-thickness skin mesh graft has lesser skin contraction which prevents formation of scar. Meshing the graft provides more graft flexibility over uneven, convex and concave surfaces and allows adequate drainage. The full-thickness skin mesh graft can be successfully used for the treatment of large distal skin wounds in dogs.
A Korean water deer was rescued with non-weight-bearing lameness of the right hind limb. Clinical and radiographic examination revealed a craniodorsal coxofemoral luxation. The cause of the right coxofemoral luxation (CL) was unknown. We performed minimally invasive arthroscopic-assisted reduction with toggle pin fixation (mini TightRope$^{(R)}$). Craniodorsal CL in the water deer was reduced and stabilized successfully. At 60 days after admission, the water deer was successfully released back into the wild. This minimally invasive surgical technique can be used to correct coxofemoral luxation in wild animals.
Wii® balance board (WBB) is a device that can measure and record body sway. This study was conducted to evaluate the reliability of WBB in small sized dog as inexpensive, portable and convenient tool. The center of pressure path length (CPPL) and 95% confidence ellipse area (Area 95) were evaluated with only two plates of WBB. The parameters were evaluated between no load (0 kg) and mass group (0.25-4 kg on each one plate). 23 dogs (2.3-7.3 kg) were evaluated for with hindlimb standing for 10 seconds. The mass group showed a significant value in comparison to the no load during the measurement. And intra-class correlation coefficients (ICCs) between CPPL and Area 95 revealed very high both mass and dog group. In the evaluation of medial patellar luxation (MPL) as a diagnostic tool, 80 dogs with MPL and 23 non-affected dogs were used. In studies of CPPL and Area 95, significant differences were found between non-affected and MPL groups for 10 and 30 seconds, respectively. The WBB can be used as a valid tool for evaluating hind limb standing balance and can be useful as an objective tool to present clinical results in small sized dog with MPL.
The present study explored the therapeutic potential of hydrogen sulfide (H2S) in restoring aging-induced loss of cardioprotective effect of remote ischemic preconditioning (RIPC) along with the involvement of signaling pathways. The left hind limb was subjected to four short cycles of ischemia and reperfusion (IR) in young and aged male rats to induce RIPC. The hearts were subjected to IR injury on the Langendorff apparatus after 24 h of RIPC. The measurement of lactate dehydrogenase, creatine kinase and cardiac troponin served to assess the myocardial injury. The levels of H2S, cystathionine β-synthase (CBS), cystathionine γ-lyase (CSE), nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2), and hypoxia-inducible factor (HIF-1α) were also measured. There was a decrease in cardioprotection in RIPC-subjected old rats in comparison to young rats along with a reduction in the myocardial levels of H2S, CBS, CSE, HIF-1α, and nuclear: cytoplasmic Nrf2 ratio. Supplementation with sodium hydrogen sulfide (NaHS, an H2S donor) and l-cysteine (H2S precursor) restored the cardioprotective actions of RIPC in old hearts. It increased the levels of H2S, HIF-1α, and Nrf2 ratio without affecting CBS and CSE. YC-1 (HIF-1α antagonist) abolished the effects of NaHS and l-cysteine in RIPC-subjected old rats by decreasing the Nrf2 ratio and HIF-1α levels, without altering H2S. The late phase of cardioprotection of RIPC involves an increase in the activity of H2S biosynthetic enzymes, which increases the levels of H2S to upregulate HIF-1α and Nrf2. H2S has the potential to restore aging-induced loss of cardioprotective effects of RIPC by upregulating HIF-1α/Nrf2 signaling.
Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) is a T-cell-mediated autoimmune central nervous system disease characterized by inflammation with oxidative stress. The aim of this study was to evaluate an anti-inflammatory effect of Ishige okamurae on EAE-induced paralysis in rats. An ethanolic extract of I. okamurae significantly delayed the first onset and reduced the duration and severity of hind-limb paralysis. The neuropathological and immunohistochemical findings in the spinal cord were in agreement with these clinical results. T-cell proliferation assay revealed that the ethyl-acetate fraction of I. okamurae suppressed the proliferation of myelin basic protein reactive T cells from EAE affected rats. Flow cytometric analysis showed $TCR{\alpha}{\beta}^+$ T cells was significantly reduced in the spleen of EAE rats with I. okamurae treatment with concurrent decrease of inflammatory mediators including tumor necrosis $factor-{\alpha}$ and cyclooxygenase-2. Collectively, it is postulated that I. okamurae ameliorates EAE paralysis with suppression of T-cell proliferation as well as decrease of pro-inflammatory mediators as far as rat EAE is concerned.
Study Design: Olfactory ensheathing cells (OECs) from rat olfactory mucosa were cultured, characterized, and transplanted into a rat model of spinal cord injury (SCI). Purpose: To evaluate different doses of OECs in a rat model of SCI. Overview of Literature: SCI causes permanent functional deficit because the central nervous system lacks the ability to perform spontaneous repair. Cell therapy strategies are being explored globally. The clinical use of human embryonic stem cell is hampered by ethical controversies. Alternatively, OECs are a promising cell source for neurotransplantation. This study aimed to evaluate the efficacy of different doses of allogenic OEC transplantation in a rat model of SCI. Methods: OECs were cultured from the olfactory mucosa of Albino Wistar rats; these cells were characterized using immunohistochemistry and flow cytometry. Rats were divided into five groups (n=6 rats each). In each group, different dosage ($2{\times}10^5$, $5{\times}10^5$, $10{\times}10^5$, and >$10{\times}10^5$) of cultured cells were transplanted into experimentally injured spinal cords of rat models. However, in the SCI group, only DMEM (Dulbecco's modified Eagle's medium) was injected. Rats were followed up upto 8 weeks post-transplantation. The outcome of transplantation was assessed using the Basso, Beattie, Bresnahan (BBB) scale; motor-evoked potential studies; and histological examination. Results: Cultured cells expressed 41% of p75NTR, a marker for OEC, and 35% of anti-fibronectin, a marker for olfactory nerve fibroblast. These cells also expressed $S100{\beta}$ and glial fibrillary acid protein of approximately 75% and 83%, respectively. All the transplanted groups showed promising BBB scores for hind-limb motor recovery compared with the SCI group (p<0.05). A motor-evoked potential study showed increased amplitude in all the treated groups compared with the SCI. Green fluorescent protein-labeled cells survived in the injured cord, suggesting their role in the transplantation-mediated repair. Transplantation of $5{\times}10^5$ cells showed the best motor outcomes among all the doses. Conclusions: OECs demonstrated a therapeutic effect in rat models with the potential for future clinical applications.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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