Kim, Jun-Lae;Oh, Se-Mi;Shin, Jang-Woo;Son, Jin-Young;Cho, Jung-Hyo;Lee, Yeon-Weol;Son, Chang-Gue;Cho, Chong-Kwan;Yoo, Hwa-Seung
대한한의학회지
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제27권4호
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pp.48-56
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2006
Objectives : This study is aimed to elucidate anti-hepatoma activity of Coptis Chinensis Extract (CCE) and evaluate its effect on proliferation of human hepatoma Hep G2 cells. Methods : To identify CCE and control the quality, we performed fingerprinting by high-performance thin layer chromatography (HPTLC). To investigate effects of CCE on anti-hepatoma activity, we measured cytotoxicity against Hep G2 cells compared with treatment of paclitaxel and 5-fluorouracil (5-FU). To examine the mechanism of inhibitory effect of CCE on Hep G2 cell proliferation, cell cycle distribution was evaluated using fluorescent activated cell sorter (FACS) Result : CCE showed a significant effect that arrests Hep G2 cells at the G2/M phase of the cell cycle. CCE combined with paclitaxel inhibited synergistically cell growth of Hep G2 cells. Conclusion : CCE may present anticancer effects through inhibition of hepatocellular carcinoma (HCC) cell proliferation via G2/M arrest, and may be a useful anticancer agent for HCC.
고성능박층크로마토그래프 (HPTLC : high performance thin layer chromatography)를 이용하여 실데나필과 그 유사체인 바데나필, 호모실데나필, 타다나필등을 신속하고 정확하게 분리정량하는 방법을 연구하였다. 실데나필 및 유사실데나필에 대한 최적의 분리조건과 각 성분의 고유한 UV스펙트럼을 얻었다. 각 성분의 검정선의 직선범위는 4성분에 대하여 약 $1.0{\sim}56.5{\mu}g/mL$이며, 상관계수($r^2$)은 모두 0.999이상 이었다. 정량한계는 약 $1.0{\sim}2.3{\mu}g/mL$, 검출한계는 약 $0.8{\sim}1.8{\mu}g/mL$이었으며, 정밀성을 시험한 결과 분산계수 (C.V.)가 2.5% 이하였다. 동 시험법으로 건강보조식품중 함유되어 있는 실데나필 및 그 유사체의 확인 및 함유량을 매우 신속하게 측정할 수 있었다.
Pseudomonas aeruginosa strain B5 with antagonistic activity against Phytophthora capsici and Magnaporthe grisea, was isolated from pepper-growing soil. From the culture of P. aeruginosa strain B5 grown on King's medium B, antibiotic substances were purified using XAD-2 column chromatography. XAD-2 eluates inhibited not only the mycelial growth of P. capsid and M. grisea, but also the development of Phytophthora blight on pepper plants. The crude antibiotic substances were further purified by using silica gel column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, thin layer chromatography on silica gel plates, and high performance liquid chromatography. Silica gel column chromatogrphy gave good separation of the four antibiotic substances. The pure antibiotics P1, P2, and P3 finally purified by preparative HPLC inhibited the mycelial growth of P. capsici, at concentrations from 7 to 10 $\mu g/ml$. Only P1 and P2 had antifungal activity against M. grisea at 8 $\mu g/ml$. P1 and P3 were highly inhibitory to the mycelial growth of Botryosphaeria dothidea and Botrytis cinerea at relatively low concentrations. However, the three antibiotics had no antifungal activity against Rhizoctonia solani. The chemical structures of these antibiotics are being identified.
Antioxodative substances in Mulberry leaves were examined. Antioxidative substances in Mulberry leaves were extracted by 80% methanol agueous solution. Antioxidative activity of extract was determined by examining hydrogen donating ability on 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and the inhibitory effect on the formation of the peroxide from Linoleic acid in the test tube at $50^{\circ}C$. Antioxidative substance were, then, separated and indentified by thin layer chromatography(TLC), UV-Vis spectrum and High performance liquid chromatography(HPLC) methods. Hydrogen donating ability on DPPH and antioxidative ability on linoleic acid of the extracted antioxidative substance were higher than those of 100ppm butylated hydroxy toluene(BHT). The extracted antioxidative substances were separated by TLC using ethylacetate : chloroform : formic acid : water(8 : 1 : 1 : 1 v/v) as a solvent, and a spot at Rf=0.35 was detected. The spot was scraped from the plate, and extrated by methanol. The extract was analyzed by UV-Vis spetra and HPLC, and chlorogenic acid was identified as a antioxidative substance.
Capsaicin(8-methyl-N-vanillyl-6-nonenamide) is the principal pungent component of Capsicum fruits. This work is directed to the capsaicin-hydrolyzing enzyme playing a key role in the rate limiting and critical step of capsaicin metabolism. In order to get precise information on the enzyme's subcellular location, rat liver homogenate was divided into six subcellular fractions by differential centrifugation technique: crude nuclear pellet, PNS(post nuclear supernatant) fraction, lysosomal pellet, cytosol, Tris wash fraction, micrisomes. Capsaicin-hydrolysing enzyme activity was analysed by high performance liquid chromatography(HPLC). This enzyme was found at the highest specific activity in the microsomal fraction and co-distributed with marker enzymes of the endoplasmic reticulum, NADPH-cytochrome c reductase and nucleoside diphosphatase. This is compatible with the result of ninhydrin color reaction of vanillylamine, primary metabolite of capsaicin hydrolysis, on thin layer chromatography(TLC). This enzyme is most active at pH $8.0{\sim}9.0$. Definite subcellular location of this enzyme will make it easy to proceed with further study.
Recent studies have shown that dopamine applied to cultured swimming motor neurons of Polyorchis penicillatus produces an inhibitory action by opening potassium channels through $D_2$-like receptors. In this study, it was demonstrated that dopamine found in the hydromedusa was not from exogenous sources and the content of dopamine depended on the $Ca^{2+}$ content of the dissecting media. In addition, a combination of thin layer chromatography and high performance liquid chromatography showed the presence of DOPA and DO PAC-like compounds in the jellyfish. The glyoxylic acid method for catecholamines suggested that a population of small cells, neither swimming motor neurons nor B-like neurons, had dopaminergic systems. From all these results, it is suggested here that DA synthesized from DOPA in some cells is released. being dependent on calcium concentrations, into a synaptic cleft and degraded into DOPAC after acting as an inhibitory transmitter to swimming motor neurons.
녹용의 유효성분을 분리하기 위하여 지질성분을 분석하고 그 약효를 검색하였다. Folch-Suzuki 분배법, Sephadex G-50, DEAE-Sephadex A-25 Column Chromatography, High Performance Thin Layer Chromatography, HPLC로 정제한후 Mass Spectrometer, NMR, FT-IR등을 이용하여 구조를 분석하였다. 이 물질은 분자량이 1065인 polyhydroxyunsaturated lipid임을 확인하였다. Strepthzotocin으로 당뇨병을 유발시킨 쥐에 이 물질을 투여한 후 혈액과 조직에서 생화학적 변화를 조사하였다. 정상군에 비해 투여군에서 혈당이 감소하였으나 혈액에서 insulin의 양은 증가하지 않았다. 당뇨병 쥐의 적혈구가 정상에 비해 용혈이 되지 않으나 투여군의 적혈구는 정상과 비숫한 용혈현상을 보여 주었다. 대뇌조직에서 gangliosides를 분석한 결과 당뇨병에 의해 GM1이 증가하는 양상을 보여 주었으나 투여군의 경우 대뇌 gangliosides 분포는 정상과 같았다. 대뇌 lipid bound sialic acid를 정량한 결과 당뇨병에 의해 그 양이 감소되었으나 녹용을 투여하였을 때는 정상에 비해 그 양이 더 증가하였다. Strepthzotocin으로 유발시킨 당뇨병 쥐에 녹용의 지질성분을 투여하였을 때 치료효과가 있는 것으로 추정된다.
The possibility of lycopene affecting egg yolk pigmentation was studied with lycopene diets containing 0, 4, 8, and $12{\mu}g/g$ meal, respectively. The addition of lycopene above $4{\mu}g/g$ meal significantly improved yolk color after four days of supplementation. The transfer of lycopene into egg yolk was confirmed by thin layer chromatography, and high-performance liquid chromatography-mass spectrometry (HPLC-MS). The deposition rate of lycopene into egg yolk was approximately 2%, which was quantitatively determined using a HPLC with a UV detector. The result indicates that lycopene is a good candidate for egg yolk pigmentation and for making functional eggs.
Partialy purified ginseng proteins were either treated with sodium dodecyl sulfate (SDS) and .betha.-mercaptoethanol to denature the proteins or not, and subjected to Thin Layer Chromatography (TLC) and High Performance Liquid Chromatography (HPLC) to compare the components of each fraction. Standard proteins of known molecular weights (MW) were also either treated with SDS and .betha.-mercaptoethanol or not, and subjected to HPLC to obtain regression lines for MW determination. From the retention times obtained from samples in eiether case by HPLC, the MW were estimated as following in SDS treated condition, Gl fraction showed three peaks each with MW of above 100, 000, 51, 000 and 19, 000. Gll showed one original peak with MW of 21, 000 and Gll, two peaks each with MW of 19, 000 and 14, 000. On the other hand, in non-SDS treated condition, GI fraction showed two peaks each with MW of above 200, 000 NA 52, 000. Gll showed one original peak with MW of 41, 000 and Gill, three peaks each with MW of 28, 000, 19, 000 and 14, 000.
Saccharides in Korean honey have been analyzed by traditional wet chemical methods and several chromatographic technics gas, paper, column and thin layer chromatography. A simple, rapid and versatile method for the separation and determination of saccharides via high performance liquid chromatography were used eluting with $H_2O : CH_CN$ at 25:75, at a flow rate of 1.0ml/min. Acasia honey contained 36.8% fructose, 31.4% glucose, 1.7% sucrose and bush clover honey held 34.4% fructose, 32.3% glucose and 30% sucrose. Difference on the regional distribution were not found in the quantity of saccharides (42 species). The quality of inferior honey was assumed to contain much maltose, sugar and glucose than common honey.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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