Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a lethal neurological disorder characterized by the deterioration of motor neurons. The aim of this study was to investigate alteration of cationic amino acid transporter (CAT-1) activity in the transport of lysine and the pretreatment effect of lysine on pro-inflammatory states in an amyotrophic lateral sclerosis cell line. The mRNA expression of cationic amino acid transporter 1 was lower in NSC-34/hSOD1G93A (MT) than the control cell line (WT), lysine transport is mediated by CAT-1 in NSC-34 cell lines. The uptake of [3H]L-lysine was Na+-independent, voltage-sensitive, and strongly inhibited by inhibitors and substrates of cationic amino acid transporter 1 (system y+). The transport process involved two saturable processes in both cell lines. In the MT cell line, at a high-affinity site, the affinity was 9.4-fold higher and capacity 24-fold lower than that in the WT; at a low-affinity site, the capacity was 2.3-fold lower than that in the WT cell line. Donepezil and verapamil competitively inhibited [3H]L-lysine uptake in the NSC-34 cell lines. Pretreatment with pro-inflammatory cytokines decreased the uptake of [3H]L-lysine and mRNA expression levels in both cell lines; however, the addition of L-lysine restored the transport activity in the MT cell lines. L-Lysine exhibited neuroprotective effects against pro-inflammatory states in the ALS disease model cell lines. In conclusion, studying the alteration in the expression of transporters and characteristics of lysine transport in ALS can lead to the development of new therapies for neurodegenerative diseases.
To produce L-lysine from cellulosic substrate, the intergeneric protoplast fusion between Cellulomonas flavigena and Corynebacterium glutamicum, Cellulomonas flavigena and Brevibacterium flavum was performed. The fusion frequencies were 1.9$\times$10$^{-6}$ to 2.1$\times$10$^{-6}$ for the regenerated protoplasts when two parental strains were treated with 30% of polyethyleneglycol (M.W.6000) containing 5 mM EDTA at 3$0^{\circ}C$ for 30 min. Two fusants, FCB3 and FCC 19 were finally selected by comparision of their genetic stability and L-lysine productivity. The properties of fusants-DNA con-tent, G+C content and L-lysine productivity-were investigated. The DNA content of fusants was greater than those of the parental strain and their G+C contents are equal to half of total G+C con-tent of two parental strains. The fusants showed high productivity of L-lysine from carboxy methyl cellulose as substrate.
Various physico-chemical and biological methods have been used to remove. cyanobacteria which causes blooms and releases toxin. The purpose of the following experiment is aimed finding out which cyanobacteria are affected by $_L-lysine $ and what concentration of$_L-lysine $ inhibits cyanobacteria. The 20 samples of Microcystis sp. have been tested. To prove the growth inhibition on Microcystis sp., double-layered agar method and microplate method have been used. When the concentration of $_L-lysine $ is as heavy as 100 ${\mu}g\; ml^{-1}$~300 ${\mu}g\; ml^{-1}$, some Microcystis sp. have made halo zone. Some Microcystis sp. have shown so high activity as to be inhibited in their growth by the $_{L}$-lysine of concentration 10 ${\mu}g\; ml^{-1}$ with microplate method. These activities are various in accordance with every species. In additions, the microplate method has been proven to be an easy way which examine the lytic activity on the species of algae.e.
Cane molasses, the most widely used carbon source for the industrial fermentation of L-lysine, usually contains a high concentration of calcium ions which tend to cause scaling problem in the recovery process. To remove the calcium ions, cane molasses was pretrea ted with sulfuric acid by adjusting the pH to 2.5-3.5. When the pretreated solution was directly heat-sterilized and used in the fermentation, a significant reduction in L-lysine production was observed. In this paper, we proved that sucrose is a superior substrate for L-lysine fermentation to that of glucose or fructose and that the above-mentioned decrease of L-lysine production was caused by the hydrolysis of sucrose in the molasses when the molasses was heat-sterilized at a low pH. The problem was overcome by adjusting the pH of molasses to neutral before sterilization.
Lee, K.U.;Boyd, R.D.;Austic, R.E.;Ross, D.A.;Beermann, D.H.;Han, In K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.12
no.7
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pp.1096-1103
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1999
A study was conducted to clarify the impact of recombinant porcine somatotropin (pST) on the efficiency of absorbed nitrogen use for protein deposition in growing pigs. Three levels of dietary crude protein (9.0, 11.5, 14.0% CP) were used. Each had either a sub-optimum or near optimum lysine: CP concentration (Low-lysine, 3.8 g/100 g CP and High-lysine, 5.5 g/100g CP) in order to achieve different metabolic efficiencies for nitrogen deposition (ca. 45 vs. 60%). Twelve crossbred female pigs $(59{\pm}4kg\;BW)$ were placed in metabolism cages and fitted with bladder catheters. Each pig received an excipient injection daily for the first 10-d, a pST (5 mg/d) injection for the second 10-d, and then excipient for the last 10-d. Pigs were randomly assigned to one of six dietary treatments (2 pigs/diet) and fed 4 times per d at $92g/kg\;BW^{0.75}$$(3{\times}maintenance)$. Means for the excipient period were compared to means for the pST period. Urinary nitrogen (N) output declined in pST-treated pigs (p<0.01) irrespective of dietary protein content or lysine level. Nitrogen retention increased by an average of 11% (p<0.01) with pST treatment (726 vs. $803mg\;N/kg^{0.75}\;BW/d$). Forty-eight percent of the absorbed N was retained with Low-lysine diets, but this increased to 53% with pST injection (+11%, p<0.01). Pigs fed High-lysine diets retained 62% of absorbed N which increased to 69% with pST (+11% p<0.01). the addition of lysine improved N use by 27% (High vs. Low, p<0.01), but the effect of lysine and pST was additive (+40%). Therefore, pST improves N retention and the efficiency of apparently absorbed N use in growing pigs (>60kg). It does so with diets having the potential for either low or high efficiencies of N use (48% and 62%). More work is needed to determine if the partial efficiency of N use improves in direct proportion to pST dose since the improvement in protein deposition is a function of pST dose.
The adequate intake of energy and lysine for primiparous sows are necessary for maternal growth of sows and growth of their progeny. This study was conducted to evaluate the effects of dietary energy and lysine levels on primiparous sows and their progeny. A total of 48 gilts (Yorkshire × Landrace), with an initial body weight (BW) of 168.1 ± 9.71 kg and at day 35 of gestation, were allotted to eight treatment groups with a 2 × 4 factorial arrangement. The first factor was metabolizable energy levels in diet (3,265 or 3,365 kcal of ME/kg), and the second factor was lysine levels in diet (gestation 0.55%, 0.65%, 0.75%, 0.85%, lactation 0.70%, 0.85%, 1.00%, 1.15%). The BW gain (p = 0.07) and backfat thickness (p = 0.09) in the gestation period showed a tendency to be increased in sows fed the high-energy diets. In the lactation period, sows fed the high-energy diets tended to be greater BW (p = 0.09) and less BW loss (p = 0.05) than those of sows fed the low-energy diets. Sows fed high-energy diets had a tendency of greater piglet weight at day 21 of lactation and greater piglet weight gain (p = 0.08 and p = 0.08, respectively). Although the blood urea nitrogen (BUN) was increased linearly as dietary lysine level increased at day 110 of gestation (Linear, p = 0.03), the BUN was decreased linearly as dietary lysine level increase at day 21 of lactation (Linear, p < 0.01). In the composition of colostrum, sows fed high-energy diets had greater casein, protein, total solid, solid not fat, and free fatty acid concentrations than those of sows fed low-energy diets (p < 0.05). Supplementation of total lysine 0.75% for gestation and 1.00% for lactation with 3,365 kcal of ME/kg energy level could be applied to the primiparous sows' diet to improve performance of sows and growth of their progeny.
It has been well known that the expression of S. typhimurium cadBA operon requires at least two extracellular signals: low pH and high concentration of lysine. To better understand the nature of pH-dependent and lysine dependent signal transduction, mutants were isolated in JF2238(cadA-lacZ) by Tn10 insertion, spontaneous mutagenesis, and EMS treatment. Two mutants were isolated from JF2238, expressed as a cadA-lacZ operon fusion in various growth conditions, and analyzed to have mutations in cadC, a gene encoding a function necessary for transcriptional activation of cadBA. One isolate (cadC6) conferred pH-independent and lysine-independent cadBA expression and the other(cadC4) showed pH-independent and lysine-dependent cadBA expression. cadR::Tn10 and cadR4 mutants were expressed in the absence of exogenously added lysine. They were also resistant to thiosine and complemented by lysP clone from E. coli. Thus, in the absence of exogenous lysine, cadR is a negative regulator of cadBA expression. Cadaverine, the product of lysine decarboxylation, was shown to inhibit expression of cadA-lacZ fusion in cad $C^+$ cell.
Proceedings of the Korean Fiber Society Conference
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2003.10a
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pp.43-44
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2003
The new method for preparing hybrid fibers from aqueous solution is described. The method is based on interfacial polyionic complexation between the counter-charged polymers. Polysaccharides, chitosan and gellan, and polypeptides, poly(L-lysine) and poly(L-glutamic acid) were utilized as the components of the fibers. The chitosan-gellan and poly(L-lysine)-gellan hybrid fibers exhibited a high level biodegradability.
Thialysine significantly inhibited the growth of wild type strain Gondida utilis NCYC-359. In the absence of thialysine, the culture reached stationary phase after 24hr, however, in the presence of 0.5% thialysine, the culture reached stationary phase after 40hr, respectively. Effect of amino acid or vitamin was investigated on recovery of the growth of wild type strain from thialysine inhibition. Glycine, methionine, arginine and tryptophan recovered growth inhibition by thialyslne to some extent. However, vitamins were inert. Especially, lysine at one eighth concentration of thialysine recovered almost fully the growth inhibition. Thialysine resistant mutants were induced from the parent strain of Condida utilis NCYC-359 by NTG treatment. Colonies of thialysine resistant mutants were obtained on agar minimal medium supplemented with 0.1-0.5% thialysine. The frequency of thialysine resistant mutants induced by the first mutation was the highest at 0.1% The wild strain produced no appreciable lysine extracellularly. However, almost thialysine resistant mutants excreted appreciably. Lysine excretion increased after repeated mutation. Finally, of the thialysine resistant mutants induced by NTG, Condida utilis TRN-4006 was obtained. This strain excreted lysine (400$\mu\textrm{g}$/$m\ell$) into the medium with a concomitant decrease of lysine in the intracellular pool.
A liquid-based colorimetric assay using a pH indicator was introduced for high-throughput monitoring of lysine decarboxylase activity. The assay is based on the color change of bromocresol purple, measured at 595 nm in liquid reaction mixture, due to an increase of pH by the production of cadaverine. Bromocresol purple was selected as the indicator because it has higher sensitivity than bromothymol blue and pheonol red within a broad range and shows good linearity within the applied pH. We applied this for simple determination of lysine decarboxylase reusability using 96-well plates, and optimization of conditions for enzyme overexpression with different concentrations of IPTG on lysine decarboxylase. This assay is expected to be applied for monitoring and quantifying the liquid-based enzyme reaction in biotransformation of decarboxylase in a high-throughput way.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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