Primary liver cancer is one of the most common cancers at the global level, accounting for half of all cancers in some undeveloped countries. This disease tends to occur in livers damaged through alcohol abuse, or chronic infection with hepatitis B and C, on a background of cirrhosis. Various cancer-causing substances are associated with primary liver cancer, including certain pesticides and such chemicals as vinyl chloride and arsenic. The strong association between HBV infection and liver cancer is well documented in epidemiological studies. It is generally acknowledged that the virus is involved through long term chronic infection, frequently associated with cirrhosis, suggesting a nonspecific mechanism triggered by the immune response. Chronic inflammation of liver, continuous cell death, abnormal cell growth, would increase the occurrence rate of genetic alterations and risk of disease. However, the statistics indicated that only about one fifth of HBV carries would develop HCC in lifetime, suggesting that individual variation in genome would also influence the susceptibility of HCC. The goal of this review is to highlight present level of knowledge on the role of viral infection and genetic variation in the development of liver cancer.
A pool of cis-acting hammerhead ribozymes randomized in their substrate recognition sequences was constructed. A variety of active cis-acting ribozymes which had various structures of stems I and III was selected from the pool by in vitro selection. The selected ribozymes were cloned and sequenced. The relationship between the cleavage efficiency and base-pairing in stems I and III of the selected ribozymes was investigated. The ribozymes with the smaller difference in folding energies between the active conformation and the stable but inactive conformation showed a tendency to have the better cleavage efficiency. The optimum length of stem I was 5 or 6 bases while the longer stem III, in general, appeared to be required for efficient cleavage. The specificity of the ribozyme reaction is discussed in terms of the length of stems I and III.
Agrobacterium harboring vector pCHBs with hygromycin phosphotransferase(hph) and hepatitis B virus surface antigen(HBsAg)gene was transformed into the mycelial culture of Flammulina velutipes. In particular, mild NaOH solution was treated to the mycelia before Agrobacterium infection step. This was purposed to generate putative surface wounds in the mycelial cell walls. The results showed that hygromycin-resistant($hyg^r$) mycelia could be obtained only from NaOH-treated mycelia but not from intact mycelia. The integration of $hyg^r$ gene in fungal genome was confirmed by PCR. In addition, a single transgene integration and heterologous protein expression in F. velutipes could be verified by Southern blot hybridization and western blot analysis, respectively. This study demonstrated an efficient tool for the Agrobacterium-mediated transformation of F. velutipes mycelia.
Although efficient antiviral lamivudine is used for HBV-infected patients, a prolonged treatment with nucleoside analogs often results in lamivudine-resistant variants. In this study, we evaluated the fidelity of the lamivudine-resistant variants. The FLAG-tagged wild-type (FPolE) and Met550 variants (FPolE/M550A, M550V, and M550I) of HBV DNA polymerases were expressed in insect cells then purified. Like many other reverse transcriptases, no $3'{\rightarrow}5'$ exonuclease activity was detected in the HBV DNA polymerase. Since there is no proofreading activity, then the use of the site-specific nucleotide misincorporation method is beneficial. From the $f_{ins}$ value analysis, it is evident that M550I and M550V exhibit higher fidelity values than the wild-type HBV DNA polymerase, while M550A exhibits similar fidelity values. It is therefore suggested that lamivudine resistance comes from the stringency to dNTP binding and the discrimination of dCTP and lamivudine in M550V and M550I.
Five assays for anti-HBs were compared to improve potency test of Human lgG preparations. The three commercial EIA kits were optimized including dose response curve ranges and compared by conducting a co-laboratory study. After selecting the most reproducible EIA kit, methods comparison was performed with 22 samples in 5 different days. As a result, EIA (7.7 ${\pm}$ 5.3%) and MEIA (AxSYM: 3.7 ${\pm}$ 1.9%, IMx: 1.6 ${\pm}$ 0.8%) showed precision and accuracy (100.1 ${\pm}$ 12.6%). Therefore, the validated EIA assay was established and it is believed to be comparable to current MEIA.
Lee Young-Tae;Kim Byoung-Kook;Kim Key-Sun;Choi Byong-Seok
Journal of the Korean Magnetic Resonance Society
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v.9
no.2
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pp.122-137
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2005
The hepatitis B virus X protein (HBx) is highly linked with liver diseases and the development of hepatocellular carcinoma. HBx-interacting protein (XIP) has been shown to abolish the transactivation functions of HBx. Here, we define the structural characteristics and HBx binding properties of XIP. Under physiological conditions, XIP was composed mainly of random-coils but significant helicity was induced in the hydrophobic condition. NMR spectroscopy defined the secondary structure of XIP in the presence of sodium dodecyl sulfate. Four putative helices were mapped to the amino acids 8-12, 32-38, 42-54 and 82-91. Any deletion of defined putative helices in XIP led to loss of binding to HBx, and truncated mutant lacking last putative helix decreased helicity more than that it could. Our results suggest that XIP requires its entire sequence for HBx binding and it may be under drastic conformational change when binds to HBx.
We report a patient with combined hepatocellular-cholangiocarcinoma confined in the common hepatic duct and scirrhous type of hepatocellular carcinoma in the caudate lobe of liver simultaneously. The patient was a 55-yearsold Korean man with hepatitis B virus (HBV) carrier who was referred from a local hospital due to detected liver mass on abdominal computed tomography (CT). He has presented jaundice and weight loss for the previous 3 weeks. Laboratory examination showed AST/ALT elevation and hyperbilirubinemia. HBsAg was positive. The tumor marker study showed elevated AFP and DCP, not CEA and CA 19-9. Abdominal CT disclosed an about 2.1×0.9 cm sized soft tissue density in hilum with both intrahepatic duct (IHD) dilatations and an about 3×2.1 cm sized arterial enhancing lesion at segment 8 of the liver. Patient received 15 cycles of Gemcitabine/Cisplantin chemotherapy from February 27, 2013 to December 31, 2013. Caudate lobectomy of liver, segmental resection of bile duct and Roux-en-Y hepaticojejunostomy was performed on February 10, 2014. The final pathologic report showed double primary liver cancer, combined hepatocellular-cholangiocarcinoma in common hepatic bile duct and scirrhous type of hepatocellular carcinoma in segment 1 of the liver. This is a very unusual case in which combined hepatocellular-cholangiocarcinoma confined in the large bile duct and two rare hepatic cancers coexisted.
We investigated HBV markers in serum and cerebrospinal fluid of 50 subjects with neurologic disorders or other disorders, who visited Dept. of neurology, college of medicine, Yeungnam University, from April-1 to August-31 1994 and were performed cerebrospinal fluid analysis to investigate the detection rate of HBV markers in cerebrospinal fluid and the possibility of neurologic disorders associated with HBV infection. The results were as follows. The positivity of HBsAg and HBV prevalence rate in serum were 6(12.0%) and 37(74.0%). The number of patient with HBsAg, only anti-HBV and no markers were 6(12.0%), 31(62.0%) and 13(26.0%), respectively. The positivity of HBsAg and HBV prevalence rate in cerebrospinal fluid were 3(6%) and 18(36.0%). The number of patient with HBsAg, only anti-HBV and no markers were 6(100.0%), 12(38.7%) and 0(0.0%) respectively. The number of patient with virus associated diseases(VAD) and non virus associated diseases(NVAD) were 26(52%) and 24(48%). The HBV prevalence rate in serum of VAD and NVAD groups were 88.5% and 58.3% (p<0.05). The HBV prevalence rate in CSF of VAD and NVAD groups were 53.8% and 16.7%(P<0.05). The HBV prevalence rate in serum and CSF of VAD and NVAD groups were 60.9% and 28.6%. Aa a conclusion, the HBV markers in the CSF were partially detected at the presence of the HBV markers in serum. The prevalance rate of HBV in the CSF was increased at the HBsAg positive in the serum and the serum and the CSF was significantly increased at the VAD group than the NVAD group.
A DNA sequence encoding the adr subtype preS2 region of hepatitis B virus envelope protein was fused to 5' end of lacZ gene yielding a plasmid pTSZ, in order to produce a preS2-$\beta$-galactosidase fusion protein. Serial deletions from 3' and 5' end of preS2 were constructed in plasmids, which were expressed and their antigenicities were examined with the monoclonal antibody H8. Deletions from amino and carboxy terminal to certain points did not affect the antigenicity, but the longer deletions destroyed the antigenicity. End points of deleted preS2 sequence were determined by DNA sequencing. As a result, each end of preS2 epitope was located in the region of amino acid residue 130-132 and 140-142, respectively. Residue 143 may be supplementary for antigenic epitope since the deletion from carboxy terminal to residue 143 revealed partial defect of antigenicity. In the interval of antigenic epitope the amino acid differences between adr and adw2 subtype occurred ar residue 130, 132, and 141. This result indicated that one or more of the three residues are responsible for the binding specificity of monoclonal antibody H8 to adr subtype preS2 fusion protein.
Objectives: Intrahepatic recurrence is the major cause of death among patients with hepatitis B virus (HBV)-related hepatocellular carcinoma (HCC) after curative surgical resection. Several approaches have been reported to decrease the recurrence rate. The objective of our study was to compare the clinical effects of transcatheter arterial chemoembolization (TACE) combined with interferon-alpha (IFN-${\alpha}$) therapy on recurrence after hepatic resection in patients with HBV-related HCC with that of TACE chemotherapy alone. Methods: We retrospectively analyzed the data from 228 patients who were diagnosed with HBV-related HCC and underwent curative resection between January 2001 to December 2008. The patients were divided into TACE (n = 126) and TACE-IFN-${\alpha}$ (n = 102) groups for postoperative chemotherapy. The TACE regimen consisted of 5-fluorouracil (5-FU), cisplatin (DDP), and the emulsion mixed with mitomycin C (MMC) and lipiodol. The recurrence rates, disease-free survival (DFS), overall survival (OS), and risk of recurrence were evaluated. Results: The clinicopathological parameters and adverse effects were similar between the 2 groups (P > 0.05). The median OS for the TACE-IFN-${\alpha}$ group (36.3 months) was significantly longer than that of the TACE group (24.5 months, P < 0.05). The 3-and 5-year OS for the TACE-IFN-${\alpha}$ group were significantly longer than those of the TACE group (P < 0.05) and the recurrence rate was significantly lower (P < 0.05). The TACE and IFN-${\alpha}$ combination therapy, active hepatitis HBV infection, the number of tumor nodules, microvascular invasion, liver cirrhosis, and the BCLC stage were independent predictors of OS and DFS. Conclusions: The use of the TACE and IFN-${\alpha}$ combination chemotherapy after curative hepatic resection safely and effectively improves OS and decreases recurrence in patients with HBV-related HCC who are at high risk. Our findings can serve as a guide for the selection of postoperative adjuvant chemotherapy for patients with HBV-related HCC who are at high risk of recurrence.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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