본 연구는 4주간 비타민나무잎을 식이에 보충하여 streptozotocin 당뇨흰쥐 간장의 cytosol에서 항산화효소 수준을 분석하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 간장의 MDA 수준이 비타민나무잎 10% 첨가군에서는 정상실험군에서 유의적으로 낮은 수준을 보였고, 당뇨실험군에서는 유의적인 차이를 보이지 않았다. SOD 수준은 정상실험군에서는 정상대조군에 비해 비타민나무잎 20% 첨가군에서 유의적으로 높은 수준이었고 당뇨실험군에서는 당뇨대조군보다 높아지는 경향이었으나 유의성은 검증되지 않았다. CAT 수준은 정상실험군에서는 비타민나무잎 첨가 시 정상대조군에 비해 유의성이 검증되었고 비타민나무잎 10% 첨가군에서 높은 수준이었다. 당뇨실험군에서는 당뇨대조군에 비해 비타민나무잎 10% 첨가군에서 유의적으로 낮은 수준으로 비타민나무잎 보충정도에 따른 수준 차이를 보였다. GPX 수준은 정상대조군과 당뇨대조군 사이에는 유의적인 차이를 보였다. 정상실험군에서는 비타민나무잎 첨가 비율이 높은 20% 첨가군에서 유의적으로 수준이 높았으며 당뇨실험군에서는 당뇨대조군에 비해 모든 비타민나무잎 분말 첨가군에서 유의적으로 높은 수준이었다. GR의 수준은 각각의 실험군 사이에 유의적인 차이를 보이지 않았다. 생체내 유리기를 제거해주는 효소적 방어계인 GST 수준은 정상실험군에서는 비타민나무잎 10% 첨가군보다 20% 첨가군에서 유의적으로 낮은 수준이었고, 당뇨실험군에서는 당뇨대조군에 비해 모든 비타민나무잎 첨가군에서 유의적으로 낮은 수준이었다. 간장의 cytosol에서 생체 내 유리기 생성계의 하나인 XOD 수준은 정상실험군에서는 정상대조군에 비해 비타민나무잎 20% 첨가군에서 유의적으로 높은 수준이었고, 당뇨실험군에서는 당뇨대조군에 비해 비타민나무잎 첨가군 모두에서 유의적으로 낮은 수준을 보였다. 이상의 연구결과 비타민나무잎 분말을 식이로 첨가하였을 때 당뇨흰쥐 간장의 SOD 수준은 증가하는 경향을 보였으며, GPX 수준은 유의적으로 증가하였고 XOD 수준은 유의적으로 낮은 수준임을 확인할 수 있었다.
흰쥐를 대조군과 체중 100g 당 ethanol 0.3ml를 1일 1회 4일간 복강내로 투여한 실험군, 체중 100g당 toluene 0.3ml를 1일 1회 4일간 복강내로 투여한 실험군 및 ethanol 투여 2시간 후 toluene을 투여한 군으로 나누어 실험을 행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. Alcohol 투여군, toluene투여군 모두 간 microsomal aniline hydroxylase(AH) 및 aminopyrine demethylase(AD) 활성도가 대조군 보다 유의한 증가를 보였다. Toluene과 ethanol의 병 행군은 toluene 투여군 보다 AH 및 AD 활성도가 다소 낮게 나타나는 경향을 보였다. 간조직 중 benzylalcohol dehydrogenase 활성도 역시 alcohol 및 toluene 투여군 모두 대조군에 비하여 높게 나타났으며 toluene과 alcoho의 병행투여군은 toluene 투여군 보다 본 효소 활성도가 다소 낮게 나타나는 경향을 보였다. 한편 간조직 중 benzaldehyde dehydrogenase 활성도는 alcohol 및 toluene 투여군 모두 대조군에 비하여 증가되는 경향을 보였으며 alcohol과 toluene의 병행투여군은 toluene 투여군 보다 유의한 감소를 보였다. 또한 간조직 중 xanthine oxidase 활성도는 alcohol과 toluene 병행 투여군이 toluene 투여군 보다 유의하게증가되었다. 이상 실험성적을 종합해 볼 때 alcohol의 전처치는 toluene 대사 효소 활성도를 억제시켜 toluene 대사에 영향을 미칠 것으로 생각된다.
어유식이(魚油食餌)가 간장조직내 lipogenic enzyme의 활성도에 미치는 영향을 조사하고자 고등어유를 식이(食餌) 10%(w/w) 되게 먹이를 조제하여 13일동안 사육한 흰쥐의 간장조직의 glucose-6-phosphate dehydrogenase와 malic enzyme의 활성도는 lard를 섭취한 군(群)보다 $3{\sim}6$일의 섭취로 훨씬 저하되었으며 콩기름에 비하여는 같거나 또는 약간 낮은 값을 보였다. 고등어 또는 장어유를 어유(魚油)로 사용하여 먹이의 $0{\sim}10%$로 함량을 변화시키며 총지방량을 10%로 일정히 하고자 콩기름 또는 쇠기름을 배합유로 사용하였을 때 glucose-6-phosphate dehydrogenase의 활성은 어유(魚油)가 2 % 포함하였을 때부터 malic enzyme의 활성은 5% 포함하였을 때, 어유(魚油)를 포함하지 않은 군(群)에 비하여 감소를 보였다.
This study is concerned with assessment of diethylnitrosamine (DEN 0.01 %) induced liver cell carcinogenesis by measurement of changes preceding the development of neoplasms. Therefore, it was undertaken to investigate changes of liver-specific enzyme activities in Sprague-Dawley (SD) rats by ad libitum feeding of DEN. And also. the changes of hepatic morphology in SD rats were detected by haematoxylineosin stain and immunohistochemistry (PCNA). 5- Fluorouracil (5- FU) is one of the most widely used anticancer agents for digestive cancers including hepatocellular carcinoma, and is known to affect the cell cycle and induce apoptosis of cancer cells. In the present study, SD rats were given drinking water containing 0.01% diethylnitrosamine (DEN) for 8 weeks. Minor behavioral change, brittleness of hair and decreased amount of water and diet intake were observed in rats 4 weeks after DEN administration. The body and liver weights were significantly (p < 0.05) decreased in rats 11 weeks after DEN administration. The liver weight ratio to body weight was rather stable and not significantly decreased in the all treatment groups. The liver specific enzyme activities (AST, ALT, ${\gamma}$-GTP) were significantly increased in all treatment groups compared to control group (p < 0.05). Variable size of liver tumor and hepatomegaly were observed in rats treated with DEN after 10 weeks. Numerous vacuoles were seen on the midzonal and or peripheral areas of hepatic lobules. The large and polymorphological hepatocytes with eosinophilic cytoplasm or densely basophilic mitotic nucleoli were seen. Several proliferative small round cells were seen on vacuolated and necrotic areas in peripheral hepatic lobules or portal areas. PCNA-positive cells were seen on the vacuolated portal areas and peripheral areas of hepatic lobules in the areas of small round cells. We examined functional and morphological changes of livers by 5 - FU treatments on DEN -treated rat. The DEN -treated rats compared to 5 - FU -treated rats after DEN treatment for 8 weeks. The serum total protein and triglyceride were significantly (p < 0.05) decreased, and the liver enzyme activities of AST and ALT were significantly(p < 0.05) increased. After 8 weeks, in the non-5-FU -treated group, the size of liver tumor were varied and hepatomegaly were observed, hepatocellular vacuolization, necrosis and steatosis were observed on the midzonal and peripheral areas of hepatic lobules. The large and polymorphological hepatocytes were seen, the interlobular connective tissues were proliferated. PCNA positive cells were seen in the portal areas and peripheral areas of hepatic lobules in the non-5-FU-treated group. In hepatocytes, condensation of nuclear chromatin and vacuolization were observed, shape of the nuclei were irregular, the degraded nuclei and organelles were observed. The livers of rats in the 5 - FU treatment group were seen grossly brilliant, red-brown color, and the vacuolated and degenerated regions, hyperplastic nodules were not nearly observed. In the electron microscope, the cytoplasm of the hepatocytes contained a large number of mitochondria, rough endoplasmic reticulum, developed organelles surrounding nuclei. The above findings suggest that 5 - FU will be effective as anti -liver tumor drug.
동충하초(C. militaris)의 균사체 액체배양액이 고지방 식이를 섭취한 성숙한 암쥐의 생리활성에 미치는 영향을 평가하고자, 생후 30주령의 흰쥐에 표준식이를 급여한 정상군, 표준식이에 15% 돈지와 1% 콜레스테롤을 첨가한 식이를 급여한 고지방군, 고지방 식이에 균사체 액체배양액을 각각 10%, 20% 및 30%씩 음료수에 혼합하여 급여한 군 등 5군으로 나누어 5주간 사육하였다. 실험동물의 체중증가, 식이효율, 및 간의 무게는 고지방군과 각 수준별 균사체 배양액군이 비슷한 수준을 보였으나 정상군 보다는 유의하게 증가되었다. 간의 총 지질 농도, 간과 혈청의 중성지질 농도 및 동맥경화지수는 고지방군에 비하여 20%와 30% 균사체 배양액군이 유의하게 감소시키는 효과가 나타났다. 혈청의 HDL-콜레스테롤 농도는 고지방군에 비하여 각 수준별 균사체 배양액군이 유의하게 증가시키는 효과가 나타났다. 분중 중성지질 배설량은 고지방군에 비하여 20%와 30% 균사체 배양액군이 유의하게 증가되었다. 간과 혈청의 총 콜레스테롤 농도, 혈청의 LDL-콜레스테롤 농도, 분의 콜레스테롤 배설량, 및 혈청의 GPT와 ALP의 활성은 고지방군과 각 수준별 균사체 배양액군이 비슷한 경향으로 나타났으나 정상군 보다는 유의하게 증가되었다. 총 콜레스테롤에 대한 HDL-콜레스테롤 비율은 정상군에 비하여 각 실험군이 유의하게 감소되었다. 혈당, 혈청의 총 단백질과 알부민 농도, 알부민/글로불린 비율, 신장과 대퇴골의 무게, 혈청의 COT와 ${\gamma}$-CTP의 활성은 정상군과 각 실험군이 비슷하여 정상 수준을 유지하였다. 이상의 결과로 보아 고지방 식이에 20% 및 30% 동충하초의 균사체 액체배양액 섭취가 간의 총 지질, 간과 혈청의 중성지질 농도 및 동맥경화지수를 낮추는 효과가 있고, HDL- 콜레스테롤 농도를 증가시키는 효과가 있는 것으로 나타났다.각된다.
산사(Crataegus pinnatifida Bunge) 중의 생리활성물질이 이상지질혈증에 있어서 간 조직 및 간 기능 대사효소의 활성 변화 등에 생리적 효능이 있을 것으로 판단되어 Sprague Dawley계 수컷 흰쥐를 이용하여 실험을 수행하였다. 대조군인 NND군, 대조군에 산사 추출물을 섭취시킨 NNDH 군, 이상지질혈증군인 CDD 군, 이상지질혈증군에 산사 추출물을 섭취시킨 DDH 군으로 나누어 5주간 실험 사육하였다. ALP(alkaline phosphatase), LDH(lactate dehydrogenase), AST(aspartate aminotransferase) 및 ALT(alanine aminotransferase) 활성은 모두 동일한 경향을 나타내었다. NND 군과 NNDH 군 간에는 유의적인 차이가 없었다. 이상지질혈증군인 CDD 군이 가장 높은 활성을 보였고, 이상지질혈증군에 산사 추출물을 섭취시킨 DDH 군에서 감소하는 것으로 나타났다. 간장의 조직학적 검사는 NND 군과 NNDH 군에서는 어떠한 이상 소견도 발견하지 못하였으나, CDD 군에서 지방 세포의 수와 크기증가, 지방 변성 및 염증 세포 등이 관찰되었고, DDH 군에서 지방 세포의 수와 크기가 줄어들었으며, 지방 변성 등이 감소된 것을 관찰할 수 있었다. 따라서 산사 추출물은 지방세포 분화 억제 및 지방 분해 작용과 간 기능 개선 효과 있는 것으로 추정되며, 간 보호 기능성 물질로서 활용 가능성이 우수할 것으로 사료된다.
본 연구에서는 고지방 고콜레스테롤 식이 흰쥐에서 곰보배추 파우더가 간조직의 항산화 효소활성 및 산화적 손상에 미치는 영향을 관찰하였다. 실험군을 4군으로 나누어 정상 식이군, 고지방 고콜레스테롤 식이군, 고지방 고콜레스테롤 식이에 곰보배추 파우더를 5% 및 10% 첨가한 군으로 각각 나누었다. 간 조직 중의 항산화 효소계인 GSH-px, catalase 및 SOD 활성은 정상군에 비해 HF군에서는 감소되는 경향을 나타내었으나 HF군에 비해 곰보배추 파우더 공급군에서 유의적으로 증가되었다. Superoxide radical 함량을 mitochondria 및 microsome에서 측정한 결과 정상군에 비해 HF군에서 유의적인 증가를 나타내었으나 곰보배추 공급으로 유의하게 감소되었다. 특히 microsome 에서는 군간의 유의한 차이도 나타내었다. 간조직의 cytosol 및 mitochondria에서 $H_2O_2$의 함량에서는 곰보배추 공급군 모두에서 유의적인 감소로 정상군 수준을 나타내었다. 혈청에서 간수치 GOT 및 GPT를 측정한 결과 10%의 곰보배추의 공급으로 HF군에 비해 유의적으로 감소되었다. 간 조직의 microsome 및 mitochondria에서의 산화단백질 함량 또한 곰보배추 파우더의 공급으로 유의적으로 감소하였다. 과산화지질의 함량을 간조직에서 관찰 한 결과 고지방 고콜레스테롤 식이로 인해 증가된 과산화지질이 곰보배추 파우더를 공급한 군에서 유의한 감소를 나타내었다. 곰보배추의 공급으로 고지방 고콜레스테롤 식이로 손상된 간조직의 항산화계는 곰보배추 내 함유되어진 여러 생리활성 물질들이 항산화효소의 활성을 증가시켜 체내에서 생성된 free radical에 의한 산화를 억제시켰으리라 사료되어진다. 이로 미루어 곰보배추는 체내 조직의 산화를 억제하는 항산화작용에 효과적으로 기여함을 알 수 있었다.
Kim Ji-Yeon;Jeon Tae-Won;Lee SangHee;Chung Chinkap;Joh Hyun-Sung;Lee Sang-Il;Yoon Chong-Guk
대한의생명과학회지
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제11권4호
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pp.509-515
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2005
This study was conducted to determine the kinetics of cyclohexane metabolites (the biomarker on cyclohexane exposure), the changes of hepatic cyclohexane metabolizing enzyme activities and the metabolites of cyclohexane in urine or serum. The rats were sacrificed at 2, 4, 8, 12 and 24 hr after administration of one dose of cyclohexane (1.56 g/kg body weight, i.p.). The metabolites of cyclohexane in urine were identified as cyclohexanol, cyclohexanone, trans-l,2-cyclohexanediol and 1,4-cyclohexanediol with cyclohexane metabolite being 124.00, 0.78, 23.28 and 2.75 (g/g of creatinine, $1\times10^{-3}$). Most of the cyclohexanol and trans-l,2-cyclohexanediol were determined to be in the form of $\beta-glucuronide$ conjugates, whereas cyclohexanone and 1 ,4-cyclohexanediol were found as free forms. In toxicokinetics of serum cyclohexane metabolites, cyclohexanol showed a rapid increase, reaching the plateau at 4 hr, after this time rapidly decreased throughout 24 hr. Changes of cyclohexanone also showed the similar pattern with cyclohexanol except somewhat lower concentration. Trans-l,2-cyclohexanediol, however, showed a gradual increase until 12 hr with the continued same levels throughout 24 hr. On the other hand, 1,4-cyclohexanediol was detected as trace levels at 4 and 12 hr, respectively. The administration of cyclohexane led to a significant increase of hepatic aniline hydroxylase activity from 2 to 8 hr. The activity of hepatic alcohol dehydrogenase showed a significant increase at 4 hr and then were recovered to the level of the control at 24 hr. On the other hand, there were no differences in liver weightlbody weight between the control and cyclohexane-treated animals. However, there were the changes of aniline hydroxylase and alcohol dehydrogenase activities on time-dependent pattern after cyclohexane treatment, which influence on the degree of cyclohexane metabolites both in blood and urine. These results suggest that differential determination of cyclohexane metabolites in urine and serum may be able to be as a biomarker of cyclohexane-exposure in the body. But in this fields further study is needed.
고려인삼에서 분리한 폴리아세틸렌 성분인 파낙시돌, 파낙시놀과 파낙시트리올의 사염화탄소로 유도된 마우스와 흰주의 지질과 산화와 효소적 또는 비효소적으로 유도된 시험관내 과산화 지질 형성에 미치는 영향을 관찰하였다. 정상 또는 사염화탄소 처리된 마우스와 흰쥐에 대한 폴리아세틸렌의 효과를 혈청과 간 과산화 지질수준과 혈청효소 (GOT, GPT, LDH) 활성을 측정함으로써 관찰하였다. 간 마이크로좀 내 cytochrome P-450 함량과 aniline hydroxylase와 aminopyrine demethylase 활성도 측정되었다. 정상 마우스에 폴리아세틸렌을 처리한 경우 파낙시놀의 경우를 제외하곤 간과 혈청의 과산화 지질 형성과 혈청효소들의 활성에 변화가 없었으며, 파낙시놀은 간의 지질 과산화를 억제하였다, 폴리아세틸렌 성분들은 사염화탄소로 유도된 간의 과산화지질형성에 대한 보호작용을 나타내었고, 혈청지질과산화 수준을 낮추었다. 또한 사염화탄소로 유도된 LDH의 혈액내 유출에 대한 보호작용이 있으나, 혈청 GOT와 GPT 수준엔 영향을 주지 않았다. 사염화탄소는 cytochrome P-450 함량과 aniline hydroxylase, aminopyrine demethylase 활성을 낮추었으며, 이 경우 폴리아세틸렌은 효과를 나타내지 못하였다. 반면, 사염화탄소 없이 폴리아세틸렌만 처리한경우, 파낙시돌과 파낙시놀은 aniline hydroxylase를 세폴리아세틸렌성분은 aminopyrine demethylase를 유도하였으며, cytochrome P-450엔 영향을 주지 않았다. 시험관내 간 마이크로좀의 지질 과산화는 폴리아세틸렌 첨가시 농도에 비례하여 억제되었다.
This study was done to investigate effects of n-s fatty acids and vitamin E supplement on the preneoplastic hepatic enzyme altered foci and cholesterol metabolism in experimental hepatocarcinogenesis system. Weaning male Sprague-Dawley rats were fed the diet containing either 15% corn oil(CO) or sardine oil(SO) with or without vitamin E 800IU supplementation for 12 weeks. After two weeks of feeding, rats were intraper-itoneally injected with a single dose of diethylnitrosamine(DEN:200mg/kg, BW). At the 4th week, rats were given the diet containing 0.02% acetylaminofluorene(AAF) for next 4 weeks. At the 6th Week, 0.05% pheno-barbital was incorporated into diet for 6 weeks. At the end of 12th week, rats were sacrificed and hepatic glutathions S-transferase placental form positive(GST_{TEX}$P^{+}${/TEX}) foci and serum and liver cholesterol levels were determined. GST_{TEX}$P^{+}${/TEX} formation was significantly decreased by SO feeding when compared with Co feeding but it tended to be enhanced by vitamin E supplementation. Histopathological changes were similar to patterns of GST_{TEX}$P^{+}${/TEX} formation in almost all dietary groups. Serum and hepatic cholesterol levels of SO fed groups were significantly lower than those of CO fed groups. Carcinogen treatments significantly increased serum and liver cholesterol levels in CO fed groups but not in SO fed groups. Correlation data showed a positive correlation(${\gamma}$=0.83, p<0.01) between serum cholesterol level GST_{TEX}$P^{+}${/TEX} foci area. These results indicate that sardine oil as a m-3 fatty acid source may have a reducing effect in rat hepatocarcinogenesis by the altheration of cholesterol metabolism.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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