In order to investigate antitumor and immune response effect by Hyangsapyungwisan after Sarcoma-180 cells and methotrexate were treatred each other, the extract of Hyangsapyungwisan was orally administered to ICR mice for 14 days. To evaluate the effects of the Hyangsapyungwisan, 50% inhibition concentration($IC_{50}$), mean survival days, tumor weight for antitumor effects, hemagglutinin titer, hemolysin titer, rosette forming cells, natural killer cell activity and productivity of interleukin-2 for immune responses measured in ICR mice. The results were summarized as follows: 1. Mean survival time in Hyangsapyungwisan-treated group was slightly prolonged, as compared with control group(13.46%). 2. On the MTT assay, cell viability was significantly inhibited by $5{\mu}g/well,\;2.5{\mu}g/well,\;1.25{\mu}g/well,\;and\;0.625{\mu}g/well$ of Hyangsapyung-wisan concentration inhibited cell viability significantly. $IC_{50}$ for cell viability was $11.59{\mu}g/well$. 3. Tumor weight in Hyangsapyungwisan treated group was depressed, as compared with the control group(p<0.05). 4. Hemagglutinin titer in Hyangsapyungwisan-treated group was slightly increased with no significance, as compared with the control group. 5. Hemolysin titer in Hyangsapyungwisan-treated group was silightly increased, as compared with the control group(p<0.05). 6. Rosette forming cells in Hyangsapyungwisan-treated group was silightly increased, as compared with the control group(p<0.05). 7. Naural killer cell activity in Hyangsapyungwisan-treated group was significantly increased(p<0.05). 8. Production of interleukin-2 was significantly increased(p<0.05). According to the above results, Hyangsapygwisan had prominent antitumor effects, and enhance both cellular and humoral immunity in mice.
Coicis Semen is one of the oriental medicine that has been used for the treatment of the diseases such as pulmonary abscess, periappendicular abscess and wart since ancient times. However, the mechanism of the action of the drug is not well studied. This study was done to investigate the effects of Coicis Semen on the host defence mechanism. Effects of Coicis Semen on the immune responses were analysed by measuring the contact hypersensitivity, hemagglutinin, hemolysin and rosette formation, cytotoxicity, and reactive oxygen intermidiates production. As the results, water extract of Coicis Semen administration enhanced the antibodies (hemagglutinin and hemolysin) formation and the appearance of rosette forming cells of the spleen. Also Coicis Semen increased the allogeneic immune response in the mouse, showed cytotoxic activity against human leukemia cell line(K562) and decreased the contact hypersensitivity against dinitroflurobenzene. Also administration of Coicis Senlen slightly increased NK cell activity and enhanced the production of such reactive oxygen intermediates as superoxide and hydrogen peroxide from the macrophages in vivo and in vitro. The above results demonstrate that Coicis Semen has enhancing effects on cellular and humoral immune responses against disease.
Vibrio mimicus is a closely related species with V. cholerae, and has been reported to be associated with gastrointestinal infections. Although extraintestinal infections of these vibrios have also been reported in Japan and Southeast Asia. But little research papers on V. mimicus was reported in Korea. Therefore, we tried to isolate V. mimicus from the environmental sea water from April to July in Pusan, Korea. Among the isolated strains, we selected the strongest hemolytic strain and then named V. mimicus SM-9. In this paper, we checked the antibiotic susceptibility and psychrotrophic characteristics of the isolated strain. Hemolytic activity of the hemolysin produced by the isolated strain was also measured. V. mimicus was not detected from the sea water samples in April and May, but its detection rate was relatively high in June and July in Pusan, Korea. The bacteriological characteristics of V. mimicus SM-9 were Gram-negative rods, motile, oxidase positive, Voges-Proskauer negative and sucrose negative. In 23 kinds of antibiotics susceptibility test, V. mimicus SM-9 showed susceptibility to the most of antibiotics submitted while it was resistive against lincomycin, oxacillin, rifampin and vancomycin. Hemolytic activity of the hemolysin produced by V. mimicus SM-9 was highest in stationary phase of the growth curve in BHI broth at 37$^{\circ}C$ and its activity was reached 18 HU per $m\ell$ of culture supernatant. For checking the psychrotrophic property of V. mimicus SM-9, the decreasing rate of the strain in phosphate buffer solution and yellowtail flesh homogenate was examined during the storage at 4, 0, -4 and -2$0^{\circ}C$. The decreasing rates of the selected strain stored in phosphate buffer solution were greater than those in fish homogenate. Decreasing rates of V. mimicus SM-9 stored in phosphate buffer solution were not significantly different by the storage temperatures. The viable cell counts of the strain were decreased as 5 log cycles after 120 hours at all the tested temperatures. While decreasing numbers of the strain in fish homogenates were 2*4 log cycles after 120 hours. The decreasing pattern of the strain numbers were very slow after 200 hours at all the stored temperatures.
In this study, we aimed to evaluate the effect of ${\alpha}$-cyperone on S. aureus. We used a hemolysin test to examine the hemolytic activity in supernatants of S. aureus cultured with increasing concentrations of ${\alpha}$-cyperone. In addition, we evaluated the production of ${\alpha}$-hemolysin (Hla) by Western blotting. Real-time RT-PCR was performed to test the expression of hla (the gene encoding Hla) and agr (accessory gene regulator). Furthermore, we investigated the protective effect of ${\alpha}$-cyperone on Hla-induced injury of A549 lung cells by live/dead and cytotoxicity assays. We showed that in the presence of subinhibitory concentrations of ${\alpha}$-cyperone, Hla production was markedly inhibited. Moreover, ${\alpha}$-cyperone protected lung cells from Hla-induced injury. These findings indicate that ${\alpha}$-cyperone is a promising inhibitor of Hla production by S. aureus and protects lung cells from this bacterium. Thus, ${\alpha}$-cyperone may provide the basis for a new strategy to combat S. aureus pneumonia.
한국의 환경에서 분리된 47주와 환자 혈액에서 분리된 18주의 Vibrio cholerae serovar non-O1 및 non-O139를 대상으로 하여 콜레라 독소, 콜레라 독소 유전자, 용혈소, 그리고 혈구응집소 등이 병독인자 분포를 알아보았다. 시험된 65균주 중 용혈소만 생산하는 균은 29균주였고, 용혈소와 혈구 응집소를 생산하는 것은 65균주 중 36 균주였다. 용혈소, 콜레라 독소 및 유전자, 그리고 혈구응집소 모두를 가지고 있는 것은 환경에서 분리된 O37형 한 균주이었다. 한편 첨가한 당농도에 따른 혈구응집소 억제시험에서, 1% 이하의 mannose 와 galactose에서 응짐이 억제된 것은 환경분리균주 47 균주 중에서 26균주로 내혈구응집소나 외혈구응집소가 비슷한 비율로 분포하였고, 반면 환자분리균주는 18균주 중에서 5균주가 외혈구응집소의 비율이 훨씬 높았다. 따라서 V.cholerae non-1 및 non-O139의 용혈소가 주독소로 병독인자 분포는 다양하게 나타났다. 콜레라 독소가 유일한 병독이자라고 인식하기는 어려웠고 여러 가지 인자들이 복합적으로 작용될 것으로 생각되었다. 특히 환경분리주 O37 형에서 콜레라 독소 생성윤이 발견된 것을 향후 역학적인 측면에서 많은 연구가 되어야 할 것으로 사료되었다.
본 연구의 목적은 시중에 판매되고 있는 쌈장에서 용혈성을 가지는 Bacillus cereus MH-2를 분리하여, EGCG 노출에 따른 MH-2 균주의 세포 반응과 프로테옴 분석을 위해 수행되었다. 다양한 농도의 EGCG에 노출된 MH-2 균주는 노출시간이 증가함에 따라 생존률은 점차 감소함을 보였다. MH-2 균주의 alginate 생성량은 EGCG의 농도가 증가함에 따라 감소하였으며, 특정 EGCG 농도에서 노출시간이 진행됨에 따라 그 생성량은 증가하는 것으로 나타났다. SDS-PAGE 및 anti-DnaK와 anti-GroEL의 단일항체를 이용한 Western blot 통한 분석으로, 두 가지 스트레스 충격단백질인 70 kDa의 DnaK와 60 kDa의 GroEL의 발현은 대수생장기의 배양에서 EGCG의 농도에 비례하여 감소하는 것을 확인하였다. EGCG에 노출된 세균의 세포 외부형태 변화를 주사전자현미경을 이용하여 관찰한 결과, 세포 표면의 돌출부 생성과 함께 세포의 뭉그러짐이 관찰되었다. EGCG에 노출된 Bacillus cereus MH-2 배양의 수용성 단백질 부분에 대한 2-DE에서 20개의 단백질 스팟이 EGCG 노출에 의해 크게 변화하는 것이 확인되었다. 장독소(hemolysin BL lytic component L1, hemolysin BL-binding protein), chaperon (DnaK, GroEL), 세포방어요소(peptidase M4 family proteins), 에너지 및 물질대사 등에 수반되는 이들 단백질은 MALDI-TOF를 사용한 peptide mass fingerprinting에 의해 동정되었다. 이들 결과는 B. cereus MH-2에 대한 EGCG-유도 스트레스와 세포독성의 기작을 이해하는데 중요한 단서를 제공할 것이다.
Objectives : This study was purposed to investigate the effect of honey bee venom aqua-acupuncture on decreased immune response by its production from Korea, North America and China. Methods : ICR-mouse was exposed with four minute sublethal 60Co- $\gamma$ -ray irradiation onto the body and got a series of each country's 0.1 ml honey bee venom aqua-acupuncture to Choksamni(ST36) every other day for three times. Thereafter the numbers of WBC, delayed type hypersensitivity, hemagglutinin titers, hemolysin titers, quantitation of T-cell and B-cell, lymphocyte transformation, natural killer cell activity, interleukin-2 productivity and interferon productivity were measured. Results : The numbers of WBC, delayed type hypersensitivity, hemagglutinin titers, hemolysin titers, quantitation of T-cell and B-cell and lymphocyte transformation were increased respectively with statistical significance in Korean, North American and Chinese honey bee venom aqua-acupuncture groups as compared with the control group. The natural killer cell activity was increased with statistical significance in Korean honey bee venom aqua-acupuncture group, and Interleukin-2 productivity and interferon productivity were not shown any statistical significance in all experimental groups as compared with the control group. Conclusions : According to the results, honey bee venom aqua-acupuncture has significant effect on decreased immune response, and Korean bee venom can be substituted for North American and Chinese one.
In order to research the effects of Shipjundaebotang(SDT) and Orostachys Herba(OH) on anti-tumor and immune response, the author performed this experimental study. Experimental groups are divided into five groups, which are solid extract of Orostachys Herba by water(OHW), solid extract of Orostachys Herba by ethanol(OHE), solid extract of Shipjundaebotang (SDT), solid extract of Shipjundaebotang added by solid extract of Orostachys Herba by water(SDT+OHW) and solid extract of Shipjundaebotang added by solid extract of Orostachys Herba by ethanol (SDT+OHE). In these experimental studies, extension of survival days for anti-tumor effect was observed, and de layed type hypersensitivity and rosette forming cell for cell-mediated immune response, hemagglutinin titers and hemolysin titers for humeral immune response, spleenic natural killer cell activity and carbon clearance (K-index) in vitro were measured with mice. The result were summerized as follows: I. SDT, SDT+OHW and SDT+OHE treated groups were significantly recognized to extend the survival days of tumor bearing mice as compared with the control group. 2. Delayed type hypersensitivity was significantly increased in SDT, SDT+OHW and SDT+OHE treated groups as compared with control group. 3. Hemagglutinin titer was increasred in all sample groups as compared with control group, but not significantly. 4. Hemolysin titers was significantly increased in SDT, SDT+OHW and SDT+OHE treated groups as compared with control group, and SDT+OHE treated group showed the increasing effect with significance as compared with the other sample groups. 5. For the effect of roselle forming cell quantitation, SDT, SDT+OHW and SDT+OHE treated groups showed the increasing effect with significance as compared with control group. 6. Natural killer cell activity was significantly increased in SDT+OHW as compared with comrol group, but the other groups, except OHW and SDT+OHW treated groups, revealed the increasing effect as compared with control group, but the significance was not admitted. 7. For the effect of K-index(Carbon clearance), SDT, SDT+OHW and SDT+OHE treated groups showed the increas ing effect with significance as compared with control group. 8. The study didn't show that Orostachys herba had any significance with survival days, anti-tumor effect and immune re sponse.
The activities of twenty-one flavonoids and their related compounds on the hypersensitivity reaction against various antigens were studied in vitro and in vivo. 1. Generally flavonoids inhibited significantly the homologous passive cutaneous anaphylaxis (PCA) induced by reaginic antibody as compared as anaphylaxis by compound 48/80-induced mast cell degranulation, and so more strongly active in the IgE-mediated anaphylaxis than non-IgE-mediated anaphylaxis. 2. Flavonids inhibited remarkably Arths reaction, hemolysin titer, delayed hypersensitivity, haemagglutinin titer, rosette forming cells and plague forming cells against sheep red blood cells, and so it exhibited that flavonoids inhibited type 2, 3 and 4 hypersensitivity. 3. Quercetin, kaempferol, hesperetin, disodium cromoglycate, malvin and baicalein were active dose-dependently in the all types of hypersensitivity. Fisetin, daidzein, morin, narigin, flavone, catechin, rutin, hesperidin, neophsperidin, apigenin and chrysin were significantly active in the various types of hypersensitivity, but apigenin, rutin and catechin were less active in the delayed hypersensitivity. Taxifolin was significantly active in PCA and histamine-induced anaphylaxis except other types of hypersensitivity. Rotenone and cyanin also inhibited all types of hypersensitivity, but they are toxic. 4. Based on these results from hypersensitivity, the following flavonoid structure-activity relationships became apparent. 1) Flavonoids with $C_{2-3}$ double bond in C-ring were more active than that of $C_{2-3}$ saturation. 2) Flavonoids with $C_4$ ketone group in C-ring were more active than abscence of them except catechin and malvin. 3) Flavonoids with benzene ring at positions 2 or 3 in C-ring exhibited same activities. 4) Flavonoids with opening of the C-ring does not abolish their activities. 5) The glycosylated flavonoids in position 3 or 7 was less active than their aglycone. 6) Flavonoids with the more hydroxy group in A and B-ring were more active. 7) Flavonoids with or without $C_3-OH$ did not change their activities.
In order to investigate the effect of Sojagangki-tang on imuno-activity. the author performaed this experimental study. Delayed type hypersensitivity (DTH) and rosette forming cells (RFC) for cell-mediated immune response, hemagglutinin (HA) titers, hemolysin (HL) titers for humoral immune response, Carbon clearance for phagocytic function of MPS (mononuclear phagocyte system) were measured in ICR mice. The results were summurized as follows: Delayed tape hypersensitivity was increased with statistical significance in the administrated solid extract of Sojagangki-tang treated group as compared with the control group. Hemagglutinin titers were increased with statistical significance in the administrated solid extract of Sojagangki-tang treated group as compared with the control group. Hemolysin titers were increased with statistical significance in the administrated solid extract of Sojagangki-tang treated group as compared with the control group. Number of RFC was increased with statistical significance in the administrated solid extract of Sojagangki-tang treated group as compared with the control group. Carbon clearance was increased with statistical significance in the administrated solid extract of Sojagangki-tang treated group as compared with the control group. Through in vivo experimental study in ICR mice Sojagangki-tang enhences the cell-mediated immmune response, the humoral immune respose. According to the above results, I think that Sojagangki-tang could be used for allergy asthma and lung damage patients.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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