This study was performed to investigate the competitive effect of Leuconostoc mesenteroides and Lactobacillus plantarum on the growth and aflatoxin $B_1$ production of Aspergillus parasiticus. Leu. mesenteroides and Lac. plantarum were grown with A. parasiticus in a modified APT broth at $28^{\circ}C$ for 9 days. It was observed that the growth of A. parasiticus got lower when the two bacteria were inoculated simultaneously than when the mold grew alone. The pH of mixed culture of Leu. mesenteroides and Lac. plantarum showed significantly lower value than the pH of the pure culture of A. parasiticus (p<0.05). The acidity of the mixed culture group significantly increased compared with the control group (A. parasiticus alone group) (p<0.05). The aflatoxin $B_1$ production was significantly decreased in the mixed culture group than in the A. parasiticus alone group (p<0.05). Leu. mesenteroides showed the more efficient effect than Lac. plantarum. These results indicate that the two lactic acid bacteria have inhibitory effect on the growth and aflatoxin $B_1$ production of Aspergillus parasiticus.
The influences of the extracts from Cinnamomi Cortex, Eucommiae Cortex, Puerariae Radix, Lycii Fructus, Zizyphi Fructus, Schisandrae Fructus, Mume Fructus, Chaenomelis Fructus on mycelial growth and aflatoxin $B_1$ production from Aspergillus parasiticus were analyzed. The pH of the culture media were reduced to below pH 4 by all the herbal extracts after 3 days incubation. However, the pH of the culture media increased above pH 6 after 6 days incubation using the extracts from Cinnamomi Cortex, Eucommiae Cortex, Puerariae Radix and Lycii Fructus. The mycelial growth of A. parasiticus was increased over the amount of the control. Puerariae Radix produced the largest amount of mycelial growth and Chaenomelis Fructus produced the smallest amount of mycelial growth. The productions of aflatoxin $B_1$ from A. parasticus culture were increased by the extracts of Puerariae Radix and Zizyphi Fructus, while inhibited by the extracts of Cinnamomi Cortex, Eucommiae Cortex, Lycii Fructus, Schisandrae Fructus, Mume Fructus and Chaenomelis Fructus. In particular, the extracts of Cinnamomi Cortex, Lycii Fructus and Schisandrae Fructus almost inhibited the production of aflatoxin $B_1$. The production of the total protein from Cinnamomi Cortex, which produced much less aflatoxin $B_1$, and Puerariae Radix, which produced a great deal of aflatoxin $B_1$ from A parasticus were slightly higher than the production of the total protein of the control medium.
The possible effeets of some oriental herbs, whleh have been used to treat eaneerllke dllleue In Korea, on growth and afIatonn production by Aspergillus parasiticus R-716 were investigated. Zedoaria rhizoma, Curcuma longa, Cyperus rotundus, Angelica gigas, Paeonia albiflora, Paeonia mountan, Atractylis ovata, and Pulsatilla koreana were extracted with chloroform. Among them the extract of paeonia mountan was remarkably effective on the growth inhibition, and Curcuma longa, Zedoaria rhizoma, Cyperus rotundus, Paeonia albiflora, Atractylis ovata also inhibited the growth. The ertraet of Atractylis ovata and Curcuma longa, also Inhibited the afIatoxin production but the others showed no effect at all or sometimes stimulated effect. With the addition of O.2ml extract of Atractylis ovata in 30ml SLS medium, the growth was delayed for about 2 days, and after 9 days, mycellum weight was 0.953g, and total afatoxin was reduced 5O%($792\mu\textrm{g}$)of that produced in the control($1547\mu\textrm{g}$). Aflatoxin per mycelium weight was decreased 32%($992\mu\textrm{g}$) of that produced in the control($1467\mu\textrm{g}$), but NADPH oxidase was higher as compared to the control. The extract of Atractylis ovata appeared to have a inhibitory effect on the growth and the aflatoxin production of Aspergillus parasiticus R-716.
This study was perfonned to investigate the possible effect of Bacillus subtilis which is the predominant species of bacteria in Korean soy sauce, soy paste, and Meju (soybean cake) on the growth and aflatoxin production of Aspergillus parasiticus ATCC 15517. The microorganisms were grown in a modified APT broth and incubated at $30^{\circ}C$ for 12 days. Aflatoxins were determined using high performance liquid chromatography (HPLC). A remarkable inhibition of the growth of Aspergillus parasiticus was observed during the incubation period when in the presence of B. subtilis (mixed culture). Dry mycelial weight in the mixed culture was significantly reduced by 85.3% in comparison to the control at the end of the incubation period (p<0.01). Lower levels of aflatoxins were found in the mixed culture than in the monoculture. At the end of the incubation period aflatoxin production was significantly inhibited by more than 50% (p<0.05). These results indicate that B. subtilis mainly inhibites the growth and aflatoxin production of toxigenic Aspergillus in Meju, soy sauce and soy paste. Although its effect on aflatoxin production was less pronounced, we could expect more inhibition by another bacteria related with fermentation in Meju.
In our previous study, three bacterial strains, Bacillus megaterium KU143, Microbacterium testaceum KU313, and Pseudomonas protegens AS15, were selected as effective biocontrol agents against Aspergillus flavus on stored rice grains. In this study, we evaluated the inhibitory effects of the volatiles produced by the strains on A. flavus growth and aflatoxin production on stored rice grains. The three strains significantly reduced mycelial growth of A. flavus in dual-culture assays compared with the negative control strain, Sphingomonas aquatilis KU408, and an untreated control. Of these tested strains, volatiles produced by B. megaterium KU143 and P. protegens AS15 markedly inhibited mycelial growth, sporulation, and conidial germination of A. flavus on agar medium and suppressed the fungal populations in rice grains. Moreover, volatiles produced by these two strains significantly reduced aflatoxin production in the rice grains by A. flavus. To our knowledge, this is the first report of the suppression of A. flavus aflatoxin production in rice grains using B. megaterium and P. protegens volatiles.
Aflatoxin contamination is a major problem in several food crops. Aflatoxin, a mycotoxin, produced by Aspergillus flavus has gained immense concern in the scientific world because of its tremendous harmful effects. The study was focused to see the effect of oil and aqueous extract of neem (Azadirachta indica) seeds on the growth of Aspergillus and production of aflatoxin by the mold. Various amounts of neem oil $(5\;-\;50\;{\mu}l/ml)$ and aqueous extract of neem (5 - 50 mg/ml) were used both in the broth as well as the solid medium. Fungistatic (MIC) and minimal fungicidal concentrations (MFC) were found to be $10\;{\mu}l/ml$ and $50\;{\mu}l/ml$ respectively for neem seed oil. At the concentration of $5\;{\mu}l/ml$ neem oil and 5 mg/ml of aqueous extract, a significant decrease in the aflatoxin content was found in broth medium. Aflatoxin production was totally inhibited at $50\;{\mu}l/ml$ and 50 mg/ml for neem oil and aqueous extract of neem respectively, in both treatments. There was significant inhibition of mycelium dry weight by the neem seed oil. Mycelial growth was totally inhibited at $20\;{\mu}l/ml$ of neem seed oil concentration in broth, whereas it was not affected at all by aqueous extract. It can therefore be inferred that the oil and extract from the neem seed leads to inhibition of aflatoxin production while neem seed oil also significantly inhibits the mycelial growth. Neem seed oil thus can be used as potent, natural and easily available anti-aflatoxigenic agent.
Experiments were conducted to study effects of steroidal carbamate derivatives upon mycelial growth and aflatoxin production by Aspergillus flavus ATCC 15517. The basal medium was supplemented with various concentrations of these compounds and inoculated with spores. The developing cultures were incubated for 11 days at $28^{\circ}C$ without agitation. Aflatoxins were extracted with chloroform, separated by thin layer chromatography, and quantitated by ultraviolet spectrophotometry. At a concentration of 50 mg per 30 ml of medium., stigmasteryl-N-(2-chloroethyl) carbamate, cholesteryl- N - (2-chloroethyl) carbamate, $5{\alpha}-cholestan-3-one-oximino-N-(2-chloroethyl)$ carbamate and ${\beta}-sitosteryl-N-(2-chloroethyl)$ carbamate were the most effective in reducing aflatoxin production by Aspergillus flavus. However, cholest-4-ene-3-one-oximino-N-(2-chloroethyl) carbamate, at a concentration of 100 mg per 30 ml, significantly decreased aflatoxin production. There was no significant inhibition of mycelial growth by the addition of the various concentrations of these compounds.
To investigate the effect of cultural condition on the aflatoxin production of Aspergillus flayus ATCC 15517, mixed culture with Aspergillus niger, better kind of media and size of Cultural vessels were examined. YES medium was better than SLS medium for this study. Small scale test tube culture was showed the possibility to simply examine the growth, total acidity, pH and aflatoxin production during cultivation, and also could reduce the second contamination of aflatoxin B1 from large scale broth cultured. Especially ELISA method is simple, sensitive and specific and therefore well suited to small scale of test tube culture. Mixed culture significantly reduced the aflatoxin production of Aspergillus fiavus ATCC 15517 and showed almost 95% inhibition of that level during the incubtation.
This experiment was conducted to investigate the effects of mixed culture with mycotoxigenic and non-mycotoxigenic fungi on mycotoxin production. For this work, Aspegillus flavus (aflatoxin producing strain), Aspegillus niger (non-mycotoxigenic strain) and Penicillium griseofulvum (patulin producing strain)were cultured in 5 ml SLS medium for 15 days under single or mixed culture. Aflatoxin was determined by direct competitive ELISA, whereas, patulin was measured by HPLC. The mycelial growth, pH and total acidity were also observed by general methods. The mycelial growth was slightly decreased in the mixed culture, meanwhile total acidity was increased and pH was shown lower than that in single culture. Aspergillus flavus produced 145 $\mu\textrm{g}$/ml of aflatoxin for 12 days single culture, but in mixed culture, aflatoxin was decreased to 93%, and was shown as 10.16$\mu\textrm{g}$/ml level. Patulin production in mixed culture was also decreased to 69.3% and was shown only 23.72$\mu\textrm{g}$/ml level as compared with in single culture.
This study was performed to investigate the inhibitory effect of Aloe vera on the growth and aflatoxin production of Aspergillus parasiticus. Spore suspension of A. parasiticus ATCC 15517 was inoculated on the yeast-extract sucrose broth containing 0.1%, 0.5%, 1.0% and 10.0% of chloroform extract of Aloe vera and then incubated at 30$\circ$C for 7 days. Mycelial weight was 160.7 mg/5ml in control group and decreased by the addition of the extract with no significance. The mold caused decrease in pH of the media with and without the extract. pH in the group contained 10.0% of the extract showed significantly higher value of 5.10 than that of 4.90 in control group (p<0.05). Fluorescence spots of four aflatoxins were observed under the 365 nm of UV light after extraction of the media and TLC. In the result of separation and determination by HPLC, the aflatoxins were produced in the order of $B_1, G_1, B_2$ and $G_2$ in all groups. Production of aflatoxins $B_1, B_2$ and $G_1$ was reduced by the addition of the extract and decreased as amount of the extract increased. The production of aflatoxins $B_1$ and $B_2$ significantly reduced when the media contained more than 1.0% of the extract, and $G_1$ more than 0.5%, respectively(p<0.05). No reduction and no significant difference among groups were observed in case of aflatoxin $G_2$. With the above result, the extract of Aloe vera reduced the production of aflatoxin by A. parasiticus though it did not inhibit mycelial growth.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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