We developed a novel dicistronic system for the expression of target cDNA sequences in the milk of transgenic animals using goat beta-casein/hGH fusion construct, pGbc5.5hGH (Lee, 2006) and internal ribosome entry site (IRES) sequences of encephalomyocarditis virus (EMCV). Granulocyte colony-stimulating factor (hG-CSF) cDNA was linked to 3' untranslated region of hGH gene in the pGbc5.5hGH via EMCV IRES sequences. Transgenic mice were generated by microinjection and transgene expression was examined in the milk and mammary gland of transgenic mice at 10 days of lactation. Northern blot analysis showed that hGH gene and hG-CSF cDNA were transcribed as a single dicistronic mRNA. The hG-CSF and hGH proteins were independently translated from the dicistronic mRNA and secreted into the milk of transgenic mice. The highest concentration of hG-CSF and hGH in the milk of transgenic mice were $237{\mu}g/m{\ell}$ and $8,990{\mu}g/m{\ell}$, respectively. In contrast, another hG-CSF expression cassette, in which hG-CSF genomic sequences were inserted into a commercial milk-specific expression vector (pBC1), generated a lower level ($91{\mu}g/m{\ell}$) of hG-CSF expression in the milk of transgenic mice. These results demonstrated that the novel pGbc5.5hGH-based dicistronic construct could be useful for an efficient cDNA expression in the milk of transgenic animals.
Eighteen crossbred goats were selected from the Institute's goat herd to determine the changes in hormones, blood metabolites and yield and composition of milk during lactation. The blood and milk samples were collected from each goat in a heparinized vacutainer tubes at fortnightly interval for a period of 150 days. In milk samples, fat, protein and lactose contents were estimated while in blood plasma hormones viz., prolactin, GH, cortisol, insulin, $T_4$ and $T_3$ were measured using radioimmunoassay methods. The plasma concentration of prolactin, GH and cortisol were high during early lactation when the goats acquired peak milk yield. During remainder of lactation their concentration varied. The high NEFA concentration during early lactation indicated mobilization of body reserves as the body weights also decrease during early lactation. However, with the advancement of lactation, the body weights of the goats and the concentration of NEFA declined which indicated utilization of NEFA for energy yielding purposes in addition to fatty acid synthesis. The ambient temperatures did not influence plasma concentration of prolactin, GH, insulin, $T_3$ and $T_4$ during the lactation cycle. The fat content of milk varied significantly (p<0.01) but protein and lactose content of milk remains unchanged during different stages of lactation. Growth hormone was positively correlated with insulin (p<0.05) during lactation while prolactin had a positive correlation with lactose and plasma NEFA (p<0.01) and negative correlation with $T_3$ (p<0.05).
본 연구는 홀스타인, 한국재래산양 및 한우유로부터 glycomacropeptide(GMP)를 분리하였으며, 각 GMP의 trypsin 가수분해물의 혈소판응집 억제 효과를 in vitro상에서 알아보았다. 홀스타인, 한국재래산양 및 한우의 GMP는 분자량이 모두 약 20 KDa이었으며, sialic acid 함량은 각각 $36.86{\pm}2.36$, $37.98{\pm}1.27$ 및 $31.19{\pm}1.87{\mu}g/mg$이었다. 또한 모든 개체의 GMP에서 tyrosine이 검출되었다. 홀스타인, 한국재래산양 및 한우 GMP의 trypsin 가수분해물에 의한 혈소판 응집 억제율은 반응 30초에 4.02, 5.51 및 12.77%로 각각 나타나 시간이 경과할수록 감소하는 경향을 보였다. 혈소판의 현미경 관찰 결과 가수분해물 첨가 후 혈소판 수가 증가하였으나, 첨가 후 30초가 경과한 시점부터 혈소판 수가 감소하기 시작하여 120초 후에는 관찰 할 수 없었다. 본 실험 결과 bovine 및 caprine GMP의 trypsin 가수분해물에서 혈소판 응집을 억제할 수 있는 small peptide가 있는 것으로 생각되며, 향후 이러한 연구는 심근경색증 및 뇌혈전증을 예방할 수 있는 생리활성 물질로 이용될 수 있을 것이라 생각된다.
Bennato, Francesca;Ianni, Andrea;Innosa, Denise;Grotta, Lisa;D'Onofrio, Andrea;Martino, Giuseppe
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제33권1호
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pp.148-156
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2020
Objective: This study aimed to evaluate the effect of dietary integration with extruded linseed (EL) on fatty acid (FA) and aromatic profile of goat cheese after 60 (T60) days of ripening. Methods: Thirty goats were divided in two groups. The control group (CG) was fed with conventional diet, whereas the experimental group (EL+) was fed with conventional diet supplemented with 10% of EL. Milk samples were collected on 30 and 60 days of trial to determinate chemical-nutritional composition and FA profile. At the end of experiment, six cheese-making sessions (3 for each group) were carried out using a pooled milk sample obtained from the 15 goats of each group. At 60 days of ripening, cheeses were analyzed for chemical-nutritional composition, FA and aromatic profile. Results: An increase in the milk production, protein, fat and lactose were evidenced in the EL+ goats. Conversely, a reduction of somatic cells was observed in the EL+ compared with the CG. However, no variation was observed for urea and casein levels content in milk samples, and no changes in protein and lipid content were found for cheeses in the two experimental groups. Dietary supplementation with EL modified the FA profile of milk. There was a decrease in saturated FAs and an increase in polyunsaturated FAs. Chemical composition of T60 cheese did not differ between the two groups but a different FA profile was observed. In T60 cheese obtained from EL+ milk, an increase in short-chain FA and a decrease in medium and long-chain FA were observed. The EL diet led to cheeses with butanoic acid 2 times higher compared to CG cheeses. Moreover, a greater presence of aldehyde compounds and alcohols were observed in the cheeses of experimental group. Conclusion: The present study pointed out that EL supplementation may improve the chemical and physical qualities of goat milk and cheeses.
Ning Song;Jun Luo;Lian Huang;Xiaoying Chen;Huimin Niu;Lu Zhu
Animal Bioscience
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제36권10호
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pp.1488-1498
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2023
Objective: αS1-Casein is more closely associated with milk allergic reaction than other milk protein components. microRNA (miRNA) is a class of small non-coding RNAs that modulate multiple biological progresses by the target gene. However, the post-transcriptional regulation of αS1-casein expression by miRNA in ruminants remains unclear. This study aims to explore the regulatory roles of miR-380-3p on αS1-casein synthesis in goat mammary epithelial cells (GMEC). Methods: αS1-Casein gene and miR-380-3p expression was measured in dairy goat mammary gland by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). miR-380-3p overexpression and knockdown were performed by miR-380-3p mimic or inhibitor in GMEC. The effect of miR-380-3p on αS1-casein synthesis was detected by qRT-PCR, western blot, luciferase and chromatin immunoprecipitation assays in GMEC. Results: Compared with middle-lactation period, αS1-casein gene expression is increased, while miR-380-3p expression is decreased during peak-lactation of dairy goats. miR-380-3p reduces αS1-casein abundance by targeting the 3'-untranslated region (3'UTR) of αS1-casein mRNA in GMEC. miR-380-3p enhances β-casein expression and signal transducer and activator of transcription 5a (STAT5a) activity. Moreover, miR-380-3p promotes β-casein abundance through target gene αS1-casein, and activates β-casein transcription by enhancing the binding of STAT5 to β-casein gene promoter region. Conclusion: miR-380-3p decreases αS1-casein expression and increases β-casein expression by targeting αS1-casein in GMEC, which supplies a novel strategy for reducing milk allergic potential and building up milk quality in ruminants.
A 3-years-old female Saanen dairy goat was admitted to the Teaching Animal Hospital at Chonnam National University with clinical signs of poor appetites, reddish darkness udder and bloody milk. She died one day after hospitalization, and Pasteurella multocida was isolated from the mammary gland and was confirmed by the PCR assay using a P. multocida-specific primer set. To our knowledge, this is the first case report of mastitis caused by P. multocida in Saanen dairy goat in Korea.
Li, X.Z.;Yan, C.G.;Long, R.J.;Jin, G.L.;Shine Khuu, J.;Ji, B.J.;Choi, S.H.;Lee, H.G.;Song, Man K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제22권11호
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pp.1521-1530
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2009
A metabolic study was conducted with four ruminally-cannulated lactating goats (Saanen, 29 weeks lactation, 65${\pm}$5 kg) in a 4${\times}$4 Latin square design with 4 dietary treatments. The goats were fed a basal mixed diet consisting of 80% concentrate and 20% chopped rye grass hay (DM basis, CON). The goats were also fed the CON diet supplemented with soybean oil at a 5% level of the concentrate (SO), the SO diet supplemented with 0.5% of sodium bicarbonate (SO-B) or the SO-B diet supplemented with 30 ppm monensin (SO-BM). The goats were housed in individual pen and the study was conducted for 8 weeks. An increased molar proportion of propionate (C3) was observed at 1 h (p<0.003) and 6 h (p<0.029) post-feeding from all the supplemented diets. Calculated methane emission was markedly decreased prior to morning feeding (p<0.01), and at 1 h (p<0.05) and 6 h post-feeding (p<0.05) in goats fed the supplemented diets. All the supplements increased (p<0.0001) cis9, trans11-CLA content in rumen fluid. Concentrations of both cis9, trans11-CLA (p<0.0001) and trans10, cis12-CLA (p<0.026) were also increased in the milk fat of lactating goats fed the supplemented diets. The SO-B and SO-BM diets further increased CLA content in goat milk compared to the SO diet. All supplements increased unsaturated (UFA, p<0.002), monounsaturated (MUFA, p<0.002) and polyunsaturated fatty acids (p<0.014) and reduced SFA to UFA ratio (p<0.023). The concentration of MUFA was even greater (p<0.002) for SO-BM than for the SO-B diet. In conclusion, feeding soybean oil (5% of concentrate) to lactating goats was a useful way to improve milk fat and to improve fatty acid profile in the milk by increasing potentially healthy fatty acids such as CLA. Supplementation of sodium bicarbonate or sodium bicarbonate with monensin to the soybean oil-based diet increased CLA content further in goat milk. Supplementation of soybean oil may be an effective method to reduce methane emission in lactating goats.
Lerma-Reyes, Israel;Mendoza-Martinez, German D.;Rojo-Rubio, Rolado;Mejia, Mario;Garcia-Lopez, J.C.;Lee-Rangel, Hector A.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제31권2호
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pp.225-229
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2018
Objective: This experiment was designed to evaluate the effect of supplementation with soybean or canola oil on milk production and the composition of long chain fatty acids as well as weight changes in the goats and their kids. Methods: Thirty nine mulitparous crossed Alpine${\times}$Nubian goats (initial body weight [BW] $43.5{\pm}1.7kg$) from the day of parturition were assigned to the treatments: grazing control (n = 15); grazing plus 20 mL/goat/d of supplemental soybean oil (n = 12); and grazing plus 20 mL/goat/d of supplemental canola oil (n = 12) from November 26, 2014 to March 7, 2015. The planned contrasts were: CI (control vs supplemented with oils); CII (soybean vs canola oil) to compare the treatment effects. Results: The vegetable oil supplementation reduced weight losses in lactating goats (CI: -0.060 vs 0.090 kg/d; p = 0.03) but did not improve milk production or affect kids' growth. The content of C4, C6, C8, C10, C11, C14, and C18:1n9t in the milk was increased (p<0.05) with respect to control. However, C12, C14, C16, C18, C18:1n9c, C18:2n6c, and C18:3n3 were reduced (p<0.05) in supplemented goats. Conjugated linoleic acid (CLA) was increased (p<0.05) in goats supplemented with oils compared to the control group. Conclusion: Supplementation with 20 mL/d of soybean or canola oil did not affect milk production or kids' performance; however, it increased CLA concentration and reduced the reduced weight losses in lactating goats.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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