The effects of pH, temperature and oxygen transfer rate(OTR) on L-Ieucine fermentation were investigated employing Corynebacterium glutamicum CH 1516 in 71 fermentor. The optimum pH, temperature and OTR were determined to be 7.0, $30^{\circ}C$ and 0.21 kmole $O_2$/$m^3{\cdot}hr$, respectively. For the values of OTR lower than 0.19 kmole $O_2$/$m^3{\cdot}hr$ a significant amount of lactic acid was accumulated, while the packed cell volume(PCV) was rapidly increased at higher OTR values above 0.23 kmole $O_2$/$m^3{\cdot}hr$ and glutamic acid was produced to some extent. Scale-up studies for L-Ieucine fermentation which was carried out in 12001 pilot scale fermentor reaffirmed the results of 71 fermentation. The optimum redox potential value for L-Ieucine production was found to be -150 to -170 mY.
To produce L-lysine from cellulosic substrate, the intergeneric protoplast fusion between Cellulomonas flavigena and Corynebacterium glutamicum, Cellulomonas flavigena and Brevibacterium flavum was performed. The fusion frequencies were 1.9$\times$10$^{-6}$ to 2.1$\times$10$^{-6}$ for the regenerated protoplasts when two parental strains were treated with 30% of polyethyleneglycol (M.W.6000) containing 5 mM EDTA at 3$0^{\circ}C$ for 30 min. Two fusants, FCB3 and FCC 19 were finally selected by comparision of their genetic stability and L-lysine productivity. The properties of fusants-DNA con-tent, G+C content and L-lysine productivity-were investigated. The DNA content of fusants was greater than those of the parental strain and their G+C contents are equal to half of total G+C con-tent of two parental strains. The fusants showed high productivity of L-lysine from carboxy methyl cellulose as substrate.
Kim, Jin-Su;Lee, Han-Na;Kim, Pil;Lee, Heung-Shick;Kim, Eung-Soo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.22
no.6
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pp.736-741
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2012
In this study, we analyzed the oxidative stress response of wblA ($\underline{w}$hi$\underline{B}$-$\underline{l}$ike gene $\underline{A}$, SCO3579), which was previously shown to be a global antibiotic down-regulator in Streptomyces coelicolor. Ever since a WblA ortholog named WhcA in Corynebacterium glutamicum was found to play a negative role in the oxidative stress response, S. coelicolor wblA has been proposed to have a similar effect. A wblA-deletion mutant exhibited a less sensitive response to oxidative stress induced by diamide present in solid plate culture. Using real-time RT-PCR analysis, we also compared the transcription levels of oxidative stress-related genes, including sodF, sodF2, sodN, trxB, and trxB2, between S. coelicolor wild type and a wblA-deletion mutant in the presence or absence of oxidative stress. Target genes were expressed higher in the wblA-deletion mutant compared with wild type, both in the absence and presence of oxidative stress. Moreover, expression of these target genes in S. coelicolor wild type was stimulated only in the presence of oxidative stress, suggesting that WblA plays a negative role in the oxidative stress response of S. coelicolor, similar to that of C. glutamicum WhcA, through the transcriptional regulation of oxidative stress-related genes.
This study was conducted to clarify the plant growth promoting effects of the various rhizobacteria on the growth of hydroponically grown tomatoes in rockwool, perlite and cocopeat cultures. Strains in terms of $Azospirilham\;sp.(4.5{\times}10^7cells/g),\;Rhodopseudomonas\;sp.(5.8{\times}10^5cells/g),\;Pseudomonas\;sp.(6.1{\times}10^6cells/g$), fusant of $Bacillus\;sp.\;and\;Corynebacterium\;glutamicum(9.1{\times}10^5cells/g$) was bacterialized into the root zone of tomatoes before sowing. Overall growth of tomato plants was promoted by bacterialization of the various rhizobacteria. Strains which showed the highest plan growth promoting effects of hydroponically grown tomatoes was Azospirillum sp., and optimum cultural substrates for the plant growth promotion by rhizobactera were in the order of cocopeat > perlite = rockwool cultures.
This studies were designed to improve the productivity of L-lysine by protoplast fusion and immobilized system of fusants using strains of Brevibacterium flavum ATCC 21528, Brevibacterium lactofermentum ATCC 21086 and Corynebacterium glutamicum 820. Mutants were isolated with concentration method of $300{\mu}g/ml$ penicillin-G after treatment of $250{\mu}g/ml$ N-methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine. B. flavum $37-2(Hos^-,\;Kan^r,\;AEC^r)$, B. lactofermentum $6-2(Ile^-,\;Val^-,\;Str^r,\;AEC^r)$ and C. glutamicum 57-5$(Met^-,\;Thr^-,\;Rif^r,\;AEC^r)$ were isolated from mutants. Protoplasts were induced by being incubated with $500{\mu}g/ml$ lysozyme of lysis solution for 6 hr and the ratio of protoplast formation and regeneration were ranging from 97-99% and 33-37%, respectively. Fusion frequencies of fusants of BBFL 21, BCFG 37 and BCLG 59 were shown in the range from $1.25{\times}10^{-6}\;to\;5.83{\times}10^{-7}$ under the optimum conditions. The fusant BBFL 21 showed the highest productivity of $411.1\;ng/ml{\cdot}hr$ L-lysine in the lysine productivity broth at $30^{\circ}C$ for 72hr. In the immobilization systems, fusant BBFL 21 was employed in various polymer matrices such as sodium alginate, polyacrylamide, agar and ${\alpha}-carrageena$. The immobilization of sodium alginate showed the highest productivity of $413\;ng/ml{\cdot}hr$ L-lysine in the batch system. Continuous fermentation of immobilization system by using tube fermentor was produced the highest productivity $416.7\;ng/ml{\cdot}hr $ L-lysine under optimum condition.
Streptomyces cattleya is a producer of carbapenem antibiotics, thienamycin and N-acetylthienamycin, which have potent and broad-spectrum antibacterial activities. We stud ied on strain improvement for antibiotic productivity of S. cattleya by transformation technique which employed S.cattleya protoplasts and chromosomal DNAs of glutamic acid producers: Corynebacterium glutamicum and Arthrobacter simplex. 150 Transformant strains were cultured and bioassayed using Bacillus subtilis and Staphylococcus aureus as test organisms. 8.7% of transformants tested showed 1.4~2.6 fold higher productivities than wild type which produced $1.61{\pm}0.67{\mu}g/ml$. The best transformant produced $8.36{\pm}2.84{\mu}g/ml$ carbapenems.
Nucleotide sequence of Brevibacterium flavum ptsG gene capable of complementing Escherichia coli ZSC113 mutations defective to glucose permease activity of phosphotransferase system was completely determined, and the gene product was compared with other glucose-specific enzyme II ($EII^{Glc}$). A ptsG gene of B. flavum consisted of open reading frame of 2,025 nucleotides putatively encoding polypeptide of 675 amino acid residues and TAA stop codon. Deduced amino acid sequence of B. flavum ($EII^{Glc}$) had high homology with ($EIIs^{Glc}$) of Corynebacterium glutamicum, C. efficiens, and B. lactofermentum. Arrangement of structural domains, IIBCA, of B. flanum ($EII^{Glc}$) protein was identical to that of EIIs belonging to glucose-phosphotransferase system.
Kim, Ok-Mi;Kim, Hyun-Jeong;Kim, Dal-Sang;Park, Dong-Chul;Lee, Kap-Rang
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.5
no.5
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pp.250-256
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1995
The ddh gene encoding meso-diaminopimelate (meso-DAP)-dehydrogenase (DDH) in Brevibacterium lactofermentum was isolated by complementation of the Escherichia coli dapD mutation. It was supposed from subcloning experiments and complementation tests that the evidence for DDH activity appeared in about 2.5 kb Xhol fragmented genome. The 2.5 kb Xhol fragment containing the ddh gene was sequenced, and an open reading frame of 960 bp encoding a polypeptide comprising 320 amino acids was found. Computer analysis indicated that the deduced amino acid of the B. lactofermentum ddh gene showed a high homology with that of the Corynebacterium glutamicum ddh gene.
Application of the Rheocatch Hotwire Monitoring System for food biotechnology process was evaluated. The growth of microogranism, E coli (JM 83 and Sigma) and Corynesccfertun glutamicum, were monitored. in the fermentor. The cell growth could not be detected the temperature differences between the hotwire and samples($\Delta$T) as indicated by the monitoring system during the fermentation processes. The cell concentration of less than 2g/dl was not sufficient to generate the measurable temperature difference in the fermentor. In order to calibrate the Rheocatch Monitoring System, the temperature difference as a function of solute concentration (microbial cells, sodium cholide, sucrose and dextran) was studied. The relationship between $\Delta$T and the concentration of microbial cells, sucrose and dextran can be expressed in a power series. Further studied with dextran indicated that viscosity and/or kinematic viscosity increase exponentially with an increase in $\Delta$T This is regardless of the concentration and molecular weight of dextran. $\Delta$T linearly increases with the logarithm of molecular weight, while the logarithm of viscosity and the logarithm of kinematic viscosity increase with the logarithm of molecular weight.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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