A possibility of the implementation of a quartz crystal sensor to the determination of chemical oxygen demand is examined by checking the electrochemical behavior of the sensor in a glucose solution. Since the surface of a quartz crystal has to be oxidized, a relatively active metal is coated on the surface of a usual 9 MHz AT-cut crystal. The electrochemical behavior is investigated by measuring the changes of current, resonant frequency and resonant resistance while a constant potential is applied. The crystal is installed in a specially designed container, and a quartz crystal analyzer is utilized to measure the frequency and resistance simultaneously. The variations of the measurements are examined at different concentrations of glucose solution, and a proper relation between the concentrations of glucose solution, and a proper relation between the concentration and the measurements is analyzed. As a result, it is found that a linear relation between the concentration of less than 900 ppm and the peak current when a constant potential of -180 mV (SSCE) is applied. The relation can be utilized for the determination of glucose concentration in sea water, and considering a direct relation between gluose concentration and chemical oxygen demand tells a possibility of the measurement of chemical oxygen demand using quartz crystal oscillators.
콩나물 줄기로부터 추출, 정제한 peroxidase는 glucose oxidase와 함께 guaiacol을 기질로 사용하여 포도당의 분석에 사용되었다. peroxidase는 DEAE-Sephacel ion exchange column chromatography를 통해 얻은 분획이 조효소액에 비해 specific activity가 10.8배 증가되었고 수율은 11.3%였다. 정제된 peroxidase와 glucose oxidase를 이용한 포도당 분석의 최적 pH는 5.5였고 최적온도는 $40^{\circ}C$로 나타났으며 포도당 양의 증가에 따라 효소활성은 증가되었으며 반응시간과의 관계에서도 직선을 보여 주었다. 그리고 L-cysteine과 dithiothreitol과 같은 환원제는 포도당 분석에 이용되는 glucose oxidase와 콩나물 peroxidase의 활성을 저해하는 것으로 나타났다.
In this study, the two sampling methods for blood glucose measurement were evaluated in order to reduce pre-analytical error. For this purpose, glucose levels of Li-heparinized plasma (LHP) and Na-fluorinated plasma (NFP) in blood collected from healthy volunteers were determined by using routine hexokinase procedures. The percentage range of pre-analytical error was quantitated by comparing LHP glucose values with NFP glucose values according to delaying analytical time (0, 60, and 120 min). LHP glucose values were decreased by 6.6% in 60 min., 17.7% in 120 min, whereas NFP glucose values decreased by 1.1% in 60 min, 2.0% in 120 min. Therefore it may be recommended that the NFP sampling method should be used for routine blood glucose determination in diabetes mellitus diagnosis.
The present paper deals with the comparative study on phylogenic difference in the patterns of energy metabolism of brain slices of several vertebrate species by measuring oxygen consumptionwith glucose-6-phosphate, glucose-1-phosphate, glyceraldehyde-3-phosphate or glutamate as respiratory substrate employing Warburg's manometric method, by determination of the utilization rate of glucose using glucose-1-C14 by analyzing patterns of free amino acid distribution , and by histochemical determination using glucose-1-C14 by analyzing patterns of free amino acid distribution acid distribution , and by histochemical determination of glycogen contents. 1. Glucose enhances the oxygen consumption of brain slices of animals belinging to reptile, aves and mammalia while it shows a tendency to decrease that of animals belonging to pisces and amphibia. 2. Glucose-6--phosphate increase oxygen consumption more than glucose in every species examined, while glucose-1-phosphate and glyceraldehyde-3-phosphate increase that of Rana nigromaculata only . In general m, it appears that phosphosugars are more effective as a respiratory substrate to those species which have less endogenous respiration than to those having larger endogenous respiration. 3. Similar patterns of free amino acid distribution and the relative amount are found among the species and in every species examined glutamic acid is detected in the larges amount . ${\gamma}$-Amino butyric acid, glycine, alanine and aspartic acid are found in every species. 4. Ophicephalus showed less oxygen consumption than endogenous respiration when glutamate was added to the medium. When sodium fluoride was added, the oxygen consumption was some what increased . Such phenomenon wasnot found in the frog. 5. The result of histochemcial analysis of the brain showed that glycogen was abundantly present in the fish , amphibia , and especially in the reptile and that no distinctive grains of glycogen were found in the bird and mammal . From these facts, it may be supposed that anaerobic glycolysis as energy source dominates in fish and amphibia and aerobic respiration through the oxidation of glucose dominates in bird and mamal , the reptile occupying transitional position between these two categories. The way of obtaining energy for brain activity by the oxidation of glucose supplied from the circulating blood is seemed to be first acquired by reptile and the function is completed both in aves and mammal.
Citrobacter freundii와 그의 organelle을 CO$_2$ gas-sensor에 고정시켜서 glucose 정량을 위한 biosensor를 조립하였다. 박테리아의 경우가 organelle 보다 감응은 우수하였으나 감응시간은 organelle의 경우가 훨씬 짧았다. 박테리아 전극은 30$^{\circ}C$의 온도에서 pH 7.0 인 0.2M tris-HCl 완충용액을 사용하면 7.0 ${\times}\;10^{-4}$ - 1.0 ${\times}\;10^{-2}$ M glucose 농도범위에서 42.2 mV/decade의 감응기울기를 나타냈다. 이 전극은 glucose에 대해서 선택성이 매우 우수하였으며, 혈청속의 glucose 정량에 사용한 결과 routine analyzer와 좋은 일치를 보였다.
멥쌀로 탁주를 제조하여 발효과정 중에 변화되는 에탄올 및 포도당의 함량을 동시에 측정할 수 있는 바이오센서를 dual cathode electrode를 이용하여 제작하였다. Alcohol oxidase와 glucose oxidase는 nylon net에 고정화시켜 anode가 한 개이고 cathode가 두 개인 dual cathode electrode에 부착하여 용존산소가 소모되는 변화량을 측정하여 간접적으로 포도당과 에탄올의 농도를 동시에 측정할 수 있도록 하였다. 이 시스템의 최적 조건은 $35^{\circ}C$에서 pH 7.5인 0.1 M 인산 완충용액이었다. 바이오센서를 이용하여 측정한 값을 분광광도법과 gas chromatography를 이용한 값과 비교해 본 결과 유사한 것으로 나타났다. Dual cathode electrode를 이용한 바이오센서로 측정할 경우 다른 분석방법과 같은 복잡한 전처리 과정없이 두 가지 성분을 동시에 측정하는 것이 가능함으로써 신속하게 측정할 수 있었으며, 탁주와 같은 발효식품의 발효 중 변화하는 두 가지 성분을 동시에 측정할 수 있었다.
한국산 무(Raphanus sativus L.)로부터 황산암모늄 분별침전과 CM-cellulose ion exchange chromatography를 사용하여 anionic peroxidase(POD)를 분리하였다. 분리된 한국산 무 anionic POD를 비색효소로, o-tolidine 혹은 4-aminoantipyrine/diethylaniline(4AA/DEA)을 비색기질로 사용하여 630nm에서의 흡광도를 측정함으로써 당 정량반응을 실시하였다. 한국산 무 anionic POD는 비색기질로 4AA/DEA을 사용한 경우 o-tolidine을 사용했을 때 보다 더 높은 비색 반응성을 나타내었다. Glutosr의 농도증가에 따른 검정곡선을 작성하였을 때 o-tolidine과 4AA/DEA을 사용한 경우 상관계수가 각각 r=0.9983과 r=0.9963로서 두 가지 방법의 검정곡선이 모두 좋은 직선성을 보여 주었다. 한국산 무 anionic POD와 horseradish POD의 기질산화에 대한 반응성을 비교하기 위하여 o-dianisidine과 guaiacol Km값을 조사한 결과, 한국산 무 anionic POD가 horseradish POD보다 o-dianisidine에 대해 약 40배, guaiacol 대하여 약 2배의 높은 기질 반응성을 나타내었다. 이러한 결과들은 한국산 무 anionic POD를 비색효소로 사용하여 검출감도가 높은 당 정량용 진단시약을 개발할 수 없음을 보여준다.
고정화효소와 산소전극 시스템을 이용한 효소센서를 제작하여 식품 중의 당, 유기산, 알코올 성분을 동시 측정 하였다. 효소가 기질과 반응하여 소비한 산소의 변화량이 전압차이로 나타나므로 시간당 전압 감소량이 최대인 값으로부터 각 성분의 농도를 측정하였으며, 이때 1분내에 최대기울기를 구할 수 있어 신속한 측정이 가능하였다. 효소의 고정화 지지체로는 nylon cloth를 사용하였고, asymmetrical coupling 방법에 의하여 기질 작용 순으로 위치하도록 효소를 고정화하였다. 한 개의 양극과 6개의 음극으로 제작된 multiple cathode system으로 포도당, 젖산, 에탄올 성분을 동시 측정할 수 있는 효소 센서를 제작하였다. 위의 센서 제작을 위하여 mutarotase과 glucose oxidase/lactate oxidase/alcohol oxidase와 catalase가 각기 사용되었다. 이들 효소센서의 최적조건은 $pH\;7.0,\;40^{\circ}C$의 0.1 M 인산완충용액이었으며 각 효소 센서의 방해물질을 알아 보기 위하여 여러 가지 당과 각종 유기산, 알콜류에 대한 효소 감응도를 살펴 본 결과 포도당 센서에서 유기산의 영향을 제외하고는 10% 내외였다. 따라서 포도당과 유기산을 동시 측정하기 위하여 포도당/젖산의 영향을 고려한 적절한 보정관계식을 도입하여 순수한 유리당과 유기산의 값을 측정할 수 있었다. 제작된 효소센서의 검증을 위하여 분광광도법. HPLC, GC를 이용한 결과, 분석방법간에 높은 상관관계를 보여 주었다. 아울러 각 효소센서의 안정성을 살펴본 결과 알코올 센서를 제외하고는 30일 이후에도 80%이상 효소감응도가 유지되었다.
흐름주입 장치를 이용하여 화학발광법에 의한 전혈 중의 당을 정량하는 방법에 대하여 연구하였다. 당의 효소반응에서 생성되는 과산화수소에 의하여 424nm에서 발생하는 luminol의 화학발광 세기의 차이를 정량에 이용하였다. 효소반응기는 glucose oxidase를 aminopropyl glass bead에 혼입하여 만들었으며, 흐름셀에서 발생하는 화학발광의 세기는 광섬유 다발을 이용하여 측정하였다. 최적 실험조건을 구하기 위하여 화학발광 시약 및 효소반응기의 pH, 흐름속도 및 온도가 화학발광세기에 미치는 영향을 조사하였다. 최적실험조건에서 구한 검정 곡선은 $1.0{\times}10^{-1}$~ 7.0mM에서 직선성이 성립하였으며, 검출한계는 $6.0{\times}10^{-2}$mM이었다. 본 방법을 전혈 중의 당 정량에 적용하였으며, 그 결과를 기존의 분석법에서 구한 결과와 비교하였다. 또한, 회수율 측정을 통하여 본 방법의 신뢰성을 검증하였다.
This study was designed to determine blood glucose responses to some cereals produced in Korea. The levels of blood glucose were measured over 2 hours after feeding healthy vounteers with 50g carbohydrate portions. The glycemic index(GI)k and glycemic index-rice(GI-rice) of a food has been defined as : GI=mean of (blood glucose response area of test food/ blood glucose response area of glucose taken by the same indicidual) $\times$100 and GI-rice=mean of (blood glucose response area of test food/blood glucose response area of rice taken by the same individual) $\times$100. The area under the curve is taken to be the area above the fasting value calculated geometrically from blood glucose increments. The GI of barely to glucose as the standard(57$\pm$7) was significantly (p<0.05) lower than those of other cereals whereas the GI of glutinous rice (110$\pm$8) was significantly (p<0.05) higher than other those of cereals. The GI values to rice as the standard were 63 $\pm$6 for barley, 79$\pm$5 for buckwheat, 85$\pm$6 for foxtail millet, 90$\pm$12 for unpolished rice, 100$\pm$0 for rice, 102$\pm$7 for glutinous rice, 106 $\pm$6 for unpolished glutinous rice, 115$\pm$13 for glutinous millet, 116$\pm$13 fro job's tear, and 122 $\pm$ 4 glutinous sorghum. The mean GI-rice was identical to the mean of the adjusted GI values, with a correlation coefficient of r=0.964(p<0.0001). This finding suggests that white rice could be used as standard food for the determination of GI.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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