Kim Kyoung-Cheol;Kim Si-Wouk;Kim Myong-Jun;Kim Seong-Jun
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.10
no.1
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pp.52-59
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2005
The study was targeted to saccharify foodwastes with the cellulolytic and amylolytic enzymes obtained from culture supernatant of Trichoderma harzianum FJ1 and analyze the kinetics of the saccharification in order to enlarge the utilization in industrial application. T. harzianum FJ1 highly produced various cellulolytic (filter paperase 0.9, carboxymethyl cellulase 22.0, ${\beta}$-glucosidase 1.2, Avicelase 0.4, xylanase 30.8, as U/mL-supernatant) and amylolytic (${alpha}$-amylase 5.6, ${\beta}$-amylase 3.1, glucoamylase 2.6, as U/mL-supernatant) enzymes. The $23{\sim}98\;g/L$ of reducing sugars were obtained under various experimental conditions by changing FPase to between $0.2{\sim}0.6\;U/mL$ and foodwastes between $5{\sim}20\%$ (w/v), with fixed conditions at $50^{\circ}C$, pH 5.0, and 100 rpm for 24 h. As the enzymatic hydrolysis of foodwastes were performed in a heterogeneous solid-liquid reaction system, it was significantly influenced by enzyme and substrate concentrations used, where the pH and temperature were fixed at their experimental optima of 5.0 and $50^{\circ}C$, respectively. An empirical model was employed to simplify the kinetics of the saccharification reaction. The reducing sugars concentration (X, g/L) in the saccharification reaction was expressed by a power curve ($X=K{\cdot}t^n$) for the reaction time (t), where the coefficient, K and n. were related to functions of the enzymes concentrations (E) and foodwastes concentrations (S), as follow: $K=10.894{\cdot}Ln(E{\cdot}S^2)-56.768,\;n=0.0608{\cdot}(E/S)^{-0.2130}$. The kinetic developed to analyze the effective saccharification of foodwastes composed of complex organic compounds could adequately explain the cases under various saccharification conditions. The kinetics results would be available for reducing sugars production processes, with the reducing sugars obtained at a lower cost can be used as carbon and energy sources in various fermentation industries.
Park, Eun-Min;Kim, Young-Hwa;Park, So-Jin;Kim, Yun-Im;Ha, Yu-Mi;Kim, Sung-Koo
Journal of Life Science
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v.14
no.4
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pp.683-688
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2004
A bacteriocin-producing lactic acid bacteria was isolated from Kimchi on MRS selective media with the use of Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii as an indicator strain. The strain YH-10 was identified as Lactococcus lactis subsp. lactis through the API test. The crude bacteriocin (freeze-dried 50% ammonium sulfate precipitate of culture supernatant) produced by the strain was named as lacticin YH-10. Lacticin YH-10 showed the growth inhibitory activity against Gram positive pathogenic bacteria and other lactic acid bacteria. The bacteriocin was inactivated by proteases such as protamex and aroase AP-10 and partially inactivated by amylase, proteinase K, trypsin, and papain. The lacticin YH-10 remained its activity with the treatment of heat at 10$0^{\circ}C$ for 60 min or the changes of pH 2 to 11. However, the activity was lost at high pH combined with the exposure to 10$0^{\circ}C$. The bacteriocin production of the strain was started in the exponential phase and stopped in the stationary phase. The approximate molecular mass of the bacteriocin produced by the strain was approximate 14 kDa in the analysis on SDS-PAGE.
A total of sixty-six samples of Nuruk, a fermention starter used to make the Korean traditional rice wine, Makgeolli, were collected from central and southern regions of Korea in 2013 and 2014. We classified two groups of the Nuruk samples, "commercial" and "home-made", according to the manufacturing procedure and purpose of use. Commercial Nuruks were made in a controlled environment where the temperature and humidity are fixed and the final product is supplied to Makgeolli manufacturers. Home-made Nuruks were made under uncontrolled conditions in the naturally opened environment and were intended for use in the production of small amounts of home-brewed Makgeolli. We obtained more than five hundred isolates including filamentous fungi and yeasts from the Nuruk samples followed by identification of fungal species. Also we stored glycerol stocks of each single isolate at $-70^{\circ}C$. We identified the species of each isolate based on the sequences of ITS regions amplified with two different universal primer pairs. We also performed morphological characterization of the filamentous fungi and yeast species through observations under the microscope. We investigated the major fungal species of commercial and home-made Nuruks by counting the colony forming units (CFU) and analyzing the occurrence tendency of fungal species. While commercial Nuruks contained mostly high CFU of yeasts, home-made Nuruks showed relatively high occurrence of filamentous fungi. One of the representative Nuruk manufacturers used both domestic wheat bran and imported ones, mainly from US, as raw material. Depending on the source of ingredient, the fungal diversity was somewhat different. Another commercial Nuruk sample was collected twice, once in 2013 and again in 2014, and showed different diversity of fungal species in each year. Nuruks obtained from the southern regions of Korea and Jeju island showed high frequency of yeast such as Saccharomycopsis fibuligera and Pichia species as well as unique filamentous fungus, Monascus species. S. fibuligera was easily found in many Nuruk samples with high CFU. The major filamentous fungi were Aspergillus, Lichtheimia, Mucor and Penicillium species. In order to further our understanding of the isolates and their potential industrial applications, we assayed three enzymes, alpha amylase, glucoamylase and acid protease from 140 isolates out of about five hundred isolates and selected about 10 excellent strains with high enzyme activities. With these fungal isolates, we will perform omics analyses including genomics, transcriptomics, metabolic pathway analyses, and metabolomics followed by whole genome sequencing of unique isolates associated with the basic research of Nuruk and that also has applications in the Makgeolli making process.
This experiment was carried out to obtain the thermophilic fungus producing amylase and to investigate properties of the amylase. The selected strain, L-11 was obtained from soil in the vicinity of a hot spring and identified as Mocor sp.. And then the conditions for enzyme production in wheat bran cultures and properties of the crude enzyme were investigated. Furthermore, the enzyme was purified and the characteristics of purified enzyme were studied. The results obtained were as follows: 1. On the wheat bran medium added 80-100% water, amylase was effectively produced by the selected strain, L-11 for 48 hrs incubation at $50^{\circ}C$. 2. When the crude enzyme solution of the strain L-11 was passed through DEAE-Sephadex A-50 column chromatography, two peaks having amylase activity were obtained, and one peak was that of the main enzyme (enzyme of B peak). 3. The purified enzyme (enzyme of B peak) was recognized as single protein band on polyacrylamide disc gel electrophoresis. 4. In the hydrolysis reaction of soluble starch by the enzyme of main amylase, oligosaccharides produced at early stage were maltose and maltotriose mainly and procedure of the reaction maltose amount of maltose and glucose was increased. 5. The strain L-11 was recognized as a special strain producing ${\alpha}-amylase$ mainly and scarcely glucoamylase. 6. The optimum pH, optimum temperature, pH stability, and temperature stability of ${\alpha}-amylase$ were pH 4.0, $60-65^{\circ}C$, pH 4.0-9.0, and below$70^{\circ}C$.
Several antagonistic bacteria, SD-1, 4, 10, 11, 14, 15, and 16, which have strong CMCase and amylase activities, were isolated from the fermented mushroom media. Among them, SD-1, 10, 11, and 15 have strong antibacterial activities against the mushroom pathogenic bacteria Pseudomonas sp., and SD-1, 10, 11, 14, and 16 have strong antifungal activities against the mushroom pathogenic fungi, Trichoderma sp. SD-14, 15, and 16 did not inhibit the growth of mushroom Pleurotus eryngii ASI-2302, and Pleurotus ostreatus ASI-2042 and ASI-2180. When the culture broth mixture of the seven bacterial strains was applied to the mushroom media, the growths of pathogens, Pseudomonas sp. and Trichoderma sp., were inhibited.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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