A novel protease gene from Bacillus gibsonii, aprBG, was cloned, expressed in B. subtilis, and characterized. High-level expression of aprBG was achieved in the recombinant strain when a junction was present between the promoter and the target gene. The purified recombinant enzyme exhibited similar N-terminal sequences and catalytic properties to the native enzyme, including high affinity and hydrolytic efficiency toward various substrates and a superior performance when exposed to various metal ions, surfactants, oxidants, and commercial detergents. AprBG was remarkably stable in 50% organic solvents and retained 100% activity and stability in 0-4 M NaCl, which is better than the characteristics of previously reported proteases. AprBG was most closely related to the high-alkaline proteases of the subtilisin family with a 57-68% identity. The secretion and maturation mechanism of AprBG was dependent on the enzyme activity, as analyzed by site-directed mutagenesis. Thus, when taken together, the results revealed that the halo-solvent-tolerant protease AprBG displays significant activity and stability under various extreme conditions, indicating its potential for use in many biotechnology applications.
The optimum conditions for the removal of hydrogen sulfide by Fe-EDTA complex in the bubble column reactor were investigated. As the concentrations of the complex increased, the conversion rate of hydrogen sulfide increased, while Fe concentration and pH were stably decreased and the amount of elemental sulfur produced was also increased. Hydrogen sulfide was removed efficiently when the concentration of Fe-EDTA complex was maintained more than 0.05M. pH acts as an important factor for the stability of complex in the oxidation of hydrogen sulfide and optimum pH range was 8.5~9.5. As the molar ratio of EDTA : Fe was increased, the conversion rate of hydrogen sulfide became stable. However, the rate was decreased due to the precipitation of FeS when the concentration of EDTA was decreased. As the concentration of EDTA increased, the conversion rate of hydrogen sulfide increased due to the high stability of Fe-EDTA complex.
This study was designed to investigate the effects of reactive oxygen species (ROS) on DNA stability in human spermatozoa. To verify human spermatozoa were incubated with xanthine-xanthine oxidase (X 100$\mu$M-XO 50 mlU ~ 400 mIU), $H_2O_2$ (125 $\mu$M ~ 1 mM), sodium nitroprusside (SNP 0.1 $\mu$M ~ 100 $\mu$M) or lymphocyte. Otherwise, spermatozoa were incubated under low $O_2$ (5%) condition. Damage of sperm DNA was analyzed by single cell electrophoresis (Comet assay) and flow cytometry after acridine orange staining. In the presence of ROS, there was increase in DNA damage. The rate of DNA single strand breakage (9.0$\pm$1.0% ~ 46.0$\pm$4.6%) and DNA fragmentation (7.51$\pm$1.0% ~ 29.5$\pm$4.6%) were similar regardless of the kinds of ROS and exposure time. DNA damage in the lower $O_2$ condition (5%) was lower than ambient $O_2$ condition (20%). Taken together, it suggested that sperm DNA might be damaged by ROS. In the presence of ROS, increase in DNA damage and chromatin instability was obvious in spite of short exposure. Although present study reconfirmed that sperm incubation in the low concentration of ROS have the benefit m the induction of capacitation and Ah, the increase in DNA damage by ROS and possible genetic problem should be considered before the human trials.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.29
no.1
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pp.134-139
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2000
Angelica gigas Nakai (danggui) is a popular herb which has been used as a blood-building decoction for recovery from weakness in the Chinese medicine. Its demand increased in functional foods and pharmaceutical industries. For its hygiene, fumigation has been used, but the use of fumigants are going to be prohibited for food processing. In order to investigate gamma irradiation technique for hygiene of danggui, the immunomodulation activity of danggui after irradiation was examined. The water extract of irradiated danggui showed a strong mitogenic effect on splenocytes in vitro to the same level of lipopolysaccharide (LPS) and phytohemagglutinin (PHA). The effect was not different from that of non-danggui. It was tested whether there was any difference between irradiated and non-irradiated danggui in effects on the secretion of antibodies and graft versus host reaction in vivo. It turned out that intraperitoneal (i.p.) administration of the extract of irradiated danggui for 4 days remarkably increased the number of antibody-secreting cells in mice injected with sheep red blood cells (SRBC). Splenomegaly, due to graft versus host reacton, was also increased after 7 days i.p. administration of the extract of danggui in mice injected with allogeneic splenocytes. In these two in vivo test, the effect were not different from those of non-irradiated danggui. These results indicated that immunomodulation activity of danggui might be preserved after irradiation. In the other experiments (data not shown), the irradiated danggui was stable in active component analysis and safe in genetic toxicity test. In further research, the stability in other physiological activity of irradiated danggui will have to be proved before practical application of irradiation for hygiene.
Seung Young Lee;Hyun-Sook Lee;Chang-Min Lee;Su-Kyung Ha;Youngjun Mo;Ji-Ung Jeung
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2022.10a
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pp.252-252
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2022
Genotype-by-environment interaction (GEI) refers to the comparative response of genotypes to different environments conditions. Thus, understanding GEI is a fundamental component for selecting superior genotypes for breeding programs. The significance of utilizing early maturing cultivars not only provides flexibility in planting dates, but also serves as an effective strategy to reduce methane emission from the paddy fields. In this study, we conducted multi-environment trials (METs) to evaluate yield-related traits such as culm length, panicle length, panicle number, spikelet per plant, and thousand grain weight. A total of eighty-one Korean commercial rice cultivars categorized as early maturing cultivars, were cultivated in three regions, two planting seasons for two years. The genotype main effect plus genotype-by-environment interaction (GGE) biplot analysis of yield-related traits and grain yield explained 70.02-91.24% of genotype plus GEI variation, and exhibited various patterns of mega-environment delineation, discriminating ability, representativeness, and genotype rankings across the planting seasons and environments. Moreover, simultaneous selection using weighted average of absolute scores from the singular value decomposition (WAASB) and multi-trait stability index (MTSI) revealed six highly recommended genotypes with high stability and crop productivity. The winning genotypes under specific environment can be utilized as useful genetic materials to develop regional specialty cultivars, and recommended genotypes can be used as elite climate-resilient parents to improve yield-potential and reduce methane emission as part to accomplish carbon-neutrality.
Background: Many studies have reported associations of the X-ray repair cross-complementing group 3 (XRCC3) Thr241Met polymorphism with colorectal cancer (CRC) risk, but the results remained controversial. Hence, we performed the present meta-analysis with different inheritance models. Materials and Methods: We searched the PubMed and Google scholar databases for studies relating to associations between XRCC3 Thr241Met polymorphism and risk of CRC. 16 studies with 5,193 cases and 6,645 controls were finally included into the meta-analysis. Results: We found that the XRCC3 Thr241Met polymorphism was associated with increased CRC risk only under a dominant genetic model (CC+CT vs. TT: OR 0.575, 95%CI 0.498-1.665, p<0.001, $P_{heterogeneity}=0.00$, $I^2=83%$). There was a significant association between XRCC3 Thr241Met polymorphism and CRC risk in Caucasian in the overall 8 studies under only in the heterozygote genetic model (CT vs. TT: OR=0.929, 95%CI =0.806-1.070, P=0.308, $P_{heterogeneity}=0.002$, $I^2=57%$). Four studies evaluated the XRCC3 Thr241Met polymorphism and CRC risk in Asians. Two genetic models of the XRCC3 polymorphism were significantly correlated with increasing risk in Asians (dominant model: CC+CT vs. TT: OR= 0.609, 95%CI=411-0.902, P=0.013, $P_{heterogeneity}=0.54$, $I^2=0.00%$; Allele model: C vs. T: OR=0.708, 95 %=CI 0.605-0.829, p=0.000, $P_{heterogeneity}=0.000$, $I^2=92%$). The sensitivity analysis suggested stability of this meta-analysis and no publication bias was detected. Conclusions: In conclusion, this meta-analysis indicates that XRCC3 Thr241Met shows an increased CRC risk, particularly in Asians rather than Caucasians.
Objective: Epidemiology studies have reported conflicting results between glutathione S-transferase Mu-1 (GSTM1), glutathione S-transferase theta-1 (GSTT1) and glutathione S-transferase pi-1 (GSTP1) and ovarian cancer (OC) susceptibility. In this study, an updated meta-analysis was applied to determine whether the deletion of GSTM1, GSTT1 and GSTP1 has an influence on OC susceptibility. Methods: A published literature search was performed through PubMed, Embase, Cochrane Library, and Science Citation Index Expanded database for articles published in English. Pooled odds ratios (ORs) and 95% confidence intervals (95%CIs) were calculated using random or fixed effects models. Heterogeneity between studies was assessed using the Cochrane Q test and $I^2$ statistics. Sub-group analysis was conducted to explore the sources of heterogeneity. Sensitivity analysis was employed to evaluate the respective influence of each study on the overall estimate. Results: In total, 10 published studies were included in the final analysis. The combined analysis revealed that there was no significant association between GSTM1 null genotype and OC risk (OR=1.01, 95%CI: 0.91-1.12). Additionally, there was no significant association between GSTT1 genetic polymorphisms and OC risk (OR=0.98, 95% CI: 0.85-1.13). Similalry, no significant associations were found concerning the GSTP1 rs1695 locus and OC risk. Meanwhile, subgroup analysis did not show a significant increase in eligible studies with low heterogeneity. However, sensitivity analysis, publication bias and cumulative analysis demonstrated the reliability and stability of the current meta-analysis. Conclusions: These findings suggest that GSTs genetic polymorphisms may not contribute to OC susceptibility. Large epidemiological studies with the combination of GSTM1 null, GSTT1 null and GSTP1 Ile105Val polymorphisms and more specific histological subtypes of OC are needed to prove our findings.
Goszczynski, Daniel Estanislao;Mazzucco, Juliana Papaleo;Ripoli, Maria Veronica;Villarreal, Edgardo Leopoldo;Rogberg-Munoz, Andres;Mezzadra, Carlos Alberto;Melucci, Lilia Magdalena;Giovambattista, Guillermo
Journal of Animal Science and Technology
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v.58
no.4
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pp.14.1-14.9
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2016
Background: Peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARG), CCAAT/enhancer binding protein alpha (CEBPA) and retinoid X receptor alpha (RXRA) are nuclear transcription factors that play important roles in regulation of adipogenesis and fat deposition. The objectives of this study were to characterise the variability of these three candidate genes in a mixed sample panel composed of several cattle breeds with different meat quality, validate single nucleotide polymorphisms (SNPs) in a local crossbred population (Angus - Hereford - Limousin) and evaluate their effects on meat quality traits (backfat thickness, intramuscular fat content and fatty acid composition), supporting the association tests with bioinformatic predictive studies. Results: Globally, nine SNPs were detected in the PPARG and CEBPA genes within our mixed panel, including a novel SNP in the latter. Three of these nine, along with seven other SNPs selected from the Single Nucleotide Polymorphism database (SNPdb), including SNPs in the RXRA gene, were validated in the crossbred population (N = 260). After validation, five of these SNPs were evaluated for genotype effects on fatty acid content and composition. Significant effects were observed on backfat thickness and different fatty acid contents (P < 0.05). Some of these SNPs caused slight differences in mRNA structure stability and/or putative binding sites for proteins. Conclusions: PPARG and CEBPA showed low to moderate variability in our sample panel. Variations in these genes, along with RXRA, may explain part of the genetic variation in fat content and composition. Our results may contribute to knowledge about genetic variation in meat quality traits in cattle and should be evaluated in larger independent populations.
This paper presents a novel design approach that could generate structural design alternatives having different topologies and then, select the optimum structure from them with simulataneously determining its optimum design variables related to geometry and the member size subjected to the multiple objective design environments. For this purpose, a specialized genetic algorithm, called StrGA_DeAl + MOGA, which can handle the design alternatives and multi-criteria problems very effectively, is developed for the optimal structural design. To validate the developed method, method, plain truss design problems are considered as illustrative example. To begin with, some possible topological of the truss structure are suggested based on the stability criterion that should be satisfied under the given loading condition. Then, with the consideration of the given multi-criteria, several different topology forms are selected as design alternatives for the second step of the conceptual design process. Based on the chosen topolgy of truss structures, the sizing or shaping optimization process starts to determine the optimum design parameters. Ten-bar truss problems are given in the paper to confirm the above concept and methodology.
International Journal of Aeronautical and Space Sciences
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v.17
no.3
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pp.285-295
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2016
A contact strip shape of a high speed train pantograph system was optimized with CFD to increase the aerodynamic performance and stability of contact force, and the results were validated by a wind tunnel test. For design of the optimal contact strip shape, a Kriging model and genetic algorithm were used to ensure the global search of the optimal point and reduce the computational cost. To enhance the performance and robustness of the contact strip for high speed pantograph, the drag coefficient and the fluctuation of the lift coefficient along the angle of attack were selected as design objectives. Aerodynamic forces were measured by a load cell and HWA (Hot Wire Anemometer) was used to measure the Strouhal number of wake flow. PIV (Particle Image Velocimetry) was adopted to visualize the flow fields. The optimized contact strip shape was shown a lower drag with smaller fluctuation of vertical lift force than the general shaped contact strip. And the acoustic noise source strength of the optimized contact strip was also reduced. Finally, the reduction amount of drag and noise was assessed when the optimized contact strip was applied to three dimensional pantograph system.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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